題-1_100_100.jpg)
基本信息
- 項(xiàng)目名稱：
- 半枝蓮醇提物抑制腫瘤血管新生的分子機(jī)制研究
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡介：
- 本實(shí)驗(yàn)通過在體實(shí)驗(yàn)觀察半枝蓮醇提物（EESB）對血管新生的影響； MTT 法測定不同濃度EESB對HUVEC增殖的影響，通過劃痕損傷實(shí)驗(yàn)觀察不同濃度EESB對HUVEC遷移的影響，采用體外管腔試驗(yàn)觀察不同濃度EESB對新血管形成的影響；采用ELISA法檢測結(jié)腸癌細(xì)胞（HT-29）HUVEC中VEGF mRNA含量及其表達(dá)情況等實(shí)驗(yàn)方法，以探討半枝蓮醇提物抑制腫瘤生長轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制。
- 詳細(xì)介紹：
- 探討半枝蓮醇提物（ethanol extract of Scutellaria Barbata D. Don簡稱EESB）通過抑制血管新生實(shí)現(xiàn)抑制腫瘤生長的作用機(jī)制。實(shí)驗(yàn)通過在體實(shí)驗(yàn)（CAM模型）觀察半枝蓮醇提物（EESB）對血管新生的影響；采用人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC）常規(guī)體外培養(yǎng)，隨機(jī)設(shè)定對照組和不同濃度半枝蓮提取物組，干預(yù)24 h。倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)變化．MTT 法測定不同濃度半枝蓮醇提物（EESB）對HUVEC細(xì)胞增殖的影響，通過劃痕損傷實(shí)驗(yàn)觀察不同濃度半枝蓮醇提物（EESB）對HUVEC細(xì)胞遷移的影響，采用體外管腔試驗(yàn)觀察不同濃度半枝蓮醇提物（EESB）對新血管形成的影響；采用ELISA法檢測結(jié)腸癌細(xì)胞（HT-29）HUVEC細(xì)胞中VEGF mRNA含量及其表達(dá)情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，高濃度的EESB能抑制雞胚新生血管的形成，實(shí)驗(yàn)組血管數(shù)量明顯少于對照組；半枝蓮醇提物（EESB）干預(yù)HUVEC細(xì)胞24 h后，HUVEC細(xì)胞密度明顯減少、細(xì)胞變小， 可明顯抑制HUVEC細(xì)胞增殖（P＜0.01），具有顯著地劑量依賴；細(xì)胞遷移、生成實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示半枝蓮提取物（EESB）各劑量均有顯著抑制血管遷移、生成，并具有明顯的劑量依賴性;RT-PCR和ELISA結(jié)果顯示，EESB能抑制HT-29和HUVEC細(xì)胞中VEGF的表達(dá)，同時(shí)與VEGF蛋白的表達(dá)明確相關(guān)。
作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 目的：清熱解毒類中藥半枝蓮已被廣泛應(yīng)用于臨床抗腫瘤治療，且療效顯著，闡明其抗腫瘤作用機(jī)制，有助于為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，為臨床用藥提供更好的理論指導(dǎo)。 基本思路： （1）、培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC）和結(jié)腸癌細(xì)胞（HT-29）； （2）、采用CAM模型法、MTT法、劃痕試驗(yàn)法、體外血管網(wǎng)生成實(shí)驗(yàn)、RT-PCR和ELISA實(shí)驗(yàn)法等試驗(yàn)對該實(shí)驗(yàn)進(jìn)行探討驗(yàn)證。
科學(xué)性、先進(jìn)性及獨(dú)特之處
- 大量研究已表明，腫瘤的惡性生長和轉(zhuǎn)移依賴于腫瘤血管新生。腫瘤血管新生作為靶點(diǎn)的治療已成為腫瘤治療研究領(lǐng)域的主要方向之一。清熱解毒類中藥半枝蓮已被廣泛應(yīng)用于臨床抗腫瘤治療，并取得顯著療效。但是以往的研究主要注重于半枝蓮的臨床療效觀察，對其抗腫瘤作用機(jī)制的研究還不夠系統(tǒng)和深入，本研究將著重探討半枝蓮抗腫瘤血管新生的分子機(jī)制，以闡明半枝蓮?fù)ㄟ^抑制血管新生而達(dá)到抑制腫瘤生長、轉(zhuǎn)移的作用機(jī)制。
應(yīng)用價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義
- 此作品的結(jié)果進(jìn)一步明確闡述半枝蓮?fù)ㄟ^抑制血管新生而實(shí)現(xiàn)其抑制腫瘤的生長、轉(zhuǎn)移的機(jī)制，為后續(xù)進(jìn)一步探討半枝蓮與血管調(diào)節(jié)因子關(guān)系等研究提供了方向，同時(shí)也為臨床用藥提供更為可靠的理論依據(jù)。
學(xué)術(shù)論文摘要
- 摘要：目的 探討半枝蓮醇提物（ethanol extract of Scutellaria Barbata D. Don簡稱EESB）通過抑制血管新生實(shí)現(xiàn)抑制腫瘤生長的作用機(jī)制。方法 通過CAM模型觀察EESB對血管新生的影響；MTT 法測定不同濃度EESB對HUVEC增殖的影響，通過劃痕損傷實(shí)驗(yàn)觀察不同濃度EESB對HUVEC遷移的影響，采用體外管腔試驗(yàn)觀察不同濃度EESB對血管形成的影響；采用ELISA法檢測結(jié)腸癌細(xì)胞（HT-29）和HUVEC中VEGF mRNA含量及其表達(dá)情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，高濃度的EESB能抑制雞胚新生血管的形成，實(shí)驗(yàn)組血管數(shù)量明顯少于對照組；EESB干預(yù)HUVEC24 h后，HUVEC密度明顯減少、細(xì)胞變小， 可明顯抑制HUVEC增殖（P＜0.01）；EESB各劑量均有顯著抑制血管遷移、生成，并具有明顯的劑量依賴性;RT-PCR和ELISA顯示，EESB能抑制HT-29和HUVEC中VEGF的表達(dá)，同時(shí)與VEGF蛋白的表達(dá)明確相關(guān)。 結(jié)論 半枝蓮提取物抑制腫瘤生長機(jī)制與抑制血管新生密切相關(guān)。 關(guān)鍵字：半枝蓮；HUVEC；VEGF ；血管新生
獲獎(jiǎng)情況
- 2011年3月份在臺(tái)灣元培科技大學(xué)參加由元培科技大學(xué)主辦的“2011 International Students Academic Presentation”
鑒定結(jié)果
- 該項(xiàng)目通過探討半枝蓮醇提物對腫瘤血管的遷移、生長的機(jī)制研究，進(jìn)一步深入探究半枝蓮抑制腫瘤生長、遷移機(jī)制，為半枝蓮的臨床用藥提供更為可靠的理論依據(jù)。
參考文獻(xiàn)
- [1] Carron CP．Meyer DM，Pegg JA．et a1．A PeptIid- onlinletica- ntagenist 0f the interin alpha- (v)beta 3 Inhibitisleydigce- lltumor growth end development of hypercalcemia of malign- nancy- [J]．Cancer Res，1998，58(9)：1930． [2].Roberts WG, Whalen PM, Soderstrom E, et al. Antiangiogenic and antitumor activity of a selective PDGFR tyrosine kinase inhibitor, CP-673, 451. Cancer Res, 2005, 65(3): 957-966. [3].Liu YQ, Poon RT, Li QY, et al. Both antiangiogenesis- and angiogenesis-independent efects are responsible for hepatocellular carci- noma growth arrest by tyrosine kin- ase inhibitor PTK787/ZK222584. Cancer Res, 2005, 65(9): 3691-3699. [4].Li-Fen Yu , Ying Cheng ,Min-Min Qiao , et al. Activation of STAT3 signaling in human stomach adenocarcinoma drug-resistant cell line and its relationship with expression of vascular endo 9.Dument A,Mschein M,Bierei G ,et a1 ． Cancer Res ．1997．57(17) ：3860 - 3864 ．
同類課題研究水平概述
- 實(shí)驗(yàn)以表明，腫瘤血管新生過程受血管新生促進(jìn)因子與抑制因子的嚴(yán)密調(diào)控，其中促進(jìn)因子包括血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)、血小板源性生長因子(PDGF) 等；抑制因子有血管生長抑素、內(nèi)皮生長抑素和腫瘤抑素等。腫瘤血管新生始于上述兩類因子之間的平衡失調(diào)。在眾多血管新生促進(jìn)因子中，血管內(nèi)皮生長因子(VEGF) 活性最強(qiáng)，在腫瘤血管新生過程中發(fā)揮著非常重要的作用。 抗腫瘤血管生成治療已成為目前一種極具潛能的腫瘤治療策略，但目前應(yīng)用的抗血管生成藥物有二十幾種，大多數(shù)處于臨床試驗(yàn)階段，而且多為單一化合物，針對單一靶點(diǎn)，易產(chǎn)生耐藥，而且對心血管的毒副反應(yīng)不可忽視，當(dāng)前臨床試驗(yàn)表明生物靶向藥物的聯(lián)合用也未能體現(xiàn)協(xié)同效應(yīng)。 尋找高效低毒的血管生成抑制劑已經(jīng)成為當(dāng)前抗腫瘤藥物的熱點(diǎn)，大量的臨床及實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，許多中藥及復(fù)方具有抗腫瘤轉(zhuǎn)移和抗血管生成的作用，其中，半枝蓮作為一種常用的抗腫瘤中藥，對肝癌、肺癌、胃癌、直腸癌、鼻咽癌等多種腫瘤細(xì)胞均有一定的抑制作用。但是以往的研究主要著重于半枝蓮的臨床療效觀察，對其抗腫瘤作用機(jī)制的研究還不夠系統(tǒng)和深入。
