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基本信息
- 項(xiàng)目名稱：
- 副豬嗜血桿菌分離鑒定及液體培養(yǎng)工藝條件優(yōu)化的研究
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡介：
- 從送檢的副豬嗜血桿菌疑似病例中進(jìn)行分離純化，形態(tài)、血清型及生化鑒定，進(jìn)一步對其液體培養(yǎng)工藝條件的優(yōu)化進(jìn)行研究。研究結(jié)果表明：副豬嗜血桿菌具有NAD依賴性，呈現(xiàn)“衛(wèi)星現(xiàn)象”，生化鑒定中，對吲哚、尿酶、硫化氫呈陰性。液體培養(yǎng)基中添加克林霉素，有效抑制革蘭氏陽性菌的生長，對NAD濃度的研究得出，在0.004%NAD培養(yǎng)基中細(xì)菌大量生長，降低了成本，為副豬嗜血桿菌疫苗的制備做好了前期準(zhǔn)備工作。
- 詳細(xì)介紹：
- 隨著生豬產(chǎn)業(yè)快速發(fā)展的同時(shí)，生豬的疫病問題日益嚴(yán)重，成為制約生豬產(chǎn)業(yè)健康持續(xù)發(fā)展的主要因素。尤其是養(yǎng)豬工業(yè)化和集約化程度不斷的提高，一些新的或原來危害比較低的疾病不斷爆發(fā)，危害程度不斷加大，對養(yǎng)豬企業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損傷。豬副嗜血桿菌?。ㄓ址Q格拉澤氏病，Haemophillu sparasuis，HPs）就是這樣一個(gè)養(yǎng)豬工業(yè)化和集約化帶來的疫病產(chǎn)物，該病已成為全球范圍內(nèi)危害養(yǎng)豬業(yè)最嚴(yán)重的細(xì)菌性疾病之一，龍巖學(xué)院動物醫(yī)學(xué)研究所2009年接診豬的277例豬病中，豬瘟病例134例，占接診病例的48.4%；副嗜血桿菌病43例，占接診病例的15.5%，而且大多數(shù)是與豬瘟混合感染，副豬嗜血桿造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。 本論文研究主要包括兩個(gè)方面：（1）副豬嗜血桿菌病原菌分離鑒定及其生物學(xué)特性研究。分離福建省乃至全國各地區(qū)副豬嗜血桿菌流行菌株，并對分離的副豬嗜血桿菌進(jìn)行血清、基因分型及培養(yǎng)、生化特性、致病性研究（2）副豬嗜血桿菌大規(guī)模液體培養(yǎng)工藝優(yōu)化。對分離的不同血清型菌株進(jìn)行篩選，選出多個(gè)血清型的菌株作為疫苗株，進(jìn)行液體培養(yǎng)，建立一種優(yōu)勢菌株的大規(guī)模高效液體培養(yǎng)方法，對培養(yǎng)工藝進(jìn)行優(yōu)化，獲得最大量菌體，為疫苗研制做好前期準(zhǔn)備。
作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 目的：分離福建省乃至全國各地區(qū)副豬嗜血桿菌流行菌株、優(yōu)化其大規(guī)模液體培養(yǎng)工藝條件。 基本思路：分離福建省乃至全國各地區(qū)副豬嗜血桿菌流行菌株，并對分離的副豬嗜血桿菌進(jìn)行血清、分型及培養(yǎng)、生化特性、致病性研究。并對分離的不同血清型菌株進(jìn)行篩選，選出多個(gè)血清型的菌株作為疫苗株，進(jìn)行液體培養(yǎng)，建立一種優(yōu)勢菌株的大規(guī)模高效液體培養(yǎng)方法，對培養(yǎng)工藝進(jìn)行優(yōu)化，獲得最大量菌體，為疫苗研制做好前期準(zhǔn)備。
科學(xué)性、先進(jìn)性及獨(dú)特之處
- 該作品的研究思路、技術(shù)路線都符合該領(lǐng)域當(dāng)前的研究趨勢，具有較強(qiáng)的科學(xué)性；其先進(jìn)性和獨(dú)特性表現(xiàn)在利用龍巖學(xué)院動物醫(yī)學(xué)研究所的平臺分離福建省乃至全國各地區(qū)副豬嗜血桿菌流行菌株，并建立一種副豬嗜血桿菌大規(guī)模高效液體培養(yǎng)方法的建立，為將來研制不同血清型、基因型的疫苗提供理論基礎(chǔ)和做好前期的準(zhǔn)備工作。
應(yīng)用價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義
- 通過該課題的研究，福建省乃至全國各地區(qū)副豬嗜血桿菌流行菌株進(jìn)行血清型和基因型的鑒定，和通過液體培養(yǎng)獲得最大量的菌體，對副豬嗜血桿菌疫苗的研制提供了前期的理論基礎(chǔ)，為將來預(yù)防副豬嗜血桿菌病起到積極的作用。
學(xué)術(shù)論文摘要
- 本論文通過分離福建省乃至全國各地區(qū)副豬嗜血桿菌流行菌株，分析不同地區(qū)流行的主要血清型和基因型；篩選免疫原性好的優(yōu)勢菌株，建立大規(guī)模高效液體培養(yǎng)方法，優(yōu)化培養(yǎng)工藝，為研制開發(fā)具有知識產(chǎn)權(quán)的本土疫苗奠定良好的理論基礎(chǔ)和做好前期的準(zhǔn)備工作。
獲獎情況
- 作品尚未發(fā)表
鑒定結(jié)果
- 無
參考文獻(xiàn)
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同類課題研究水平概述
- 副豬嗜血桿菌病，是常規(guī)飼養(yǎng)豬群上呼吸道的一種常在菌，但在特定條件下可以侵入機(jī)體并引起嚴(yán)重的全身性疾病，以纖維素性多發(fā)性漿膜炎、關(guān)節(jié)炎和腦膜炎為特征，該病又稱為革拉瑟氏?。∣liveira et al,2004）。國外已對副豬嗜血桿菌的研究引起高度重視，美國、日本、加拿大、德國、澳大利亞、丹麥、西班牙等養(yǎng)豬業(yè)較發(fā)達(dá)的國家均已對本國的副豬嗜血桿菌流行病學(xué)進(jìn)行了調(diào)查，表明副豬嗜血桿菌病從臨床發(fā)病豬中的分離率高達(dá)20%左右，而且流行的血清型通常為副豬嗜血桿菌當(dāng)中毒力較強(qiáng)的血清型，如血清5型、4型和13型等(Oliveira et al,2003,Angen et al)。 在我國，上個(gè)世紀(jì)關(guān)于豬場發(fā)生多發(fā)性漿膜炎與關(guān)節(jié)炎的報(bào)導(dǎo)極少，幾乎處于空白，無人開展過病原學(xué)方面的研究工作。2002年，華中農(nóng)大從已分離鑒定和保存的副豬嗜血桿菌當(dāng)中取出15株在澳大利亞首次對我國的副豬嗜血桿菌進(jìn)行血清型鑒定，并從中篩選出菌株對該菌的生物學(xué)特性進(jìn)行研究，從而建立了該菌的快速分離鑒定、培養(yǎng)和保存方法（蔡旭旺等，2005）。近幾年，其它各地關(guān)于各豬場發(fā)生多發(fā)性漿膜炎和關(guān)節(jié)炎也有陸續(xù)報(bào)道，特別是在近兩年已成急驟上升之勢，但鮮有病原分離鑒定的報(bào)道，沒有血清學(xué)分型方面的研究（肖運(yùn)德等，2002；高豐等，2002；王天齊，2004；尹秀鳳，2004；王平利，2005；王成達(dá)，2005；黃伊穎，2005；鐘妮娜，2005；洪江庭，2005；鄭西義，2005；張長剛，2006）。 副嗜血桿菌可以用藥物預(yù)防和治療， 但開發(fā)使用疫苗是目前比較理想而經(jīng)濟(jì)的有效預(yù)防辦法。目前市場上已有以進(jìn)口為主的商品疫苗，分離副豬嗜血桿菌流行菌株，篩選免疫原性較好的菌株，開發(fā)研制具有交叉保護(hù)的多價(jià)疫苗，是預(yù)防和控制副豬嗜血桿菌病的必然要求和大勢所趨。目前，副豬嗜血桿菌疫苗的研制，還是采用傳統(tǒng)的分離病原體菌株，固體平板培養(yǎng)滅活制備，此方法獲得的疫苗價(jià)格較為昂貴，華中農(nóng)大通過液體培養(yǎng)副豬嗜血桿菌，制備單價(jià)和多價(jià)疫苗，取得了一定的進(jìn)展（蔡旭旺等，2006），但還存在著一定的缺陷，本課題通過所分離的副豬嗜血桿菌建立大規(guī)模高效液體培養(yǎng)方法，優(yōu)化培養(yǎng)工藝，為研制開發(fā)具有知識產(chǎn)權(quán)的本土疫苗奠定良好的理論基礎(chǔ)和做好前期的準(zhǔn)備工作，具有較為深遠(yuǎn)的意義。
