基本信息
- 項目名稱：
- 副豬嗜血桿菌分離鑒定及液體培養(yǎng)工藝條件優(yōu)化的研究
- 小類：
- 生命科學
- 大類：
- 自然科學類學術論文
- 簡介：
- 從送檢的副豬嗜血桿菌疑似病例中進行分離純化，形態(tài)、血清型及生化鑒定，進一步對其液體培養(yǎng)工藝條件的優(yōu)化進行研究。研究結果表明：副豬嗜血桿菌具有NAD依賴性，呈現(xiàn)“衛(wèi)星現(xiàn)象”，生化鑒定中，對吲哚、尿酶、硫化氫呈陰性。液體培養(yǎng)基中添加克林霉素，有效抑制革蘭氏陽性菌的生長，對NAD濃度的研究得出，在0.004%NAD培養(yǎng)基中細菌大量生長，降低了成本，為副豬嗜血桿菌疫苗的制備做好了前期準備工作。
- 詳細介紹：
- 隨著生豬產業(yè)快速發(fā)展的同時，生豬的疫病問題日益嚴重，成為制約生豬產業(yè)健康持續(xù)發(fā)展的主要因素。尤其是養(yǎng)豬工業(yè)化和集約化程度不斷的提高，一些新的或原來危害比較低的疾病不斷爆發(fā)，危害程度不斷加大，對養(yǎng)豬企業(yè)造成嚴重的經濟損傷。豬副嗜血桿菌?。ㄓ址Q格拉澤氏病，Haemophillu sparasuis，HPs）就是這樣一個養(yǎng)豬工業(yè)化和集約化帶來的疫病產物，該病已成為全球范圍內危害養(yǎng)豬業(yè)最嚴重的細菌性疾病之一，龍巖學院動物醫(yī)學研究所2009年接診豬的277例豬病中，豬瘟病例134例，占接診病例的48.4%；副嗜血桿菌病43例，占接診病例的15.5%，而且大多數(shù)是與豬瘟混合感染，副豬嗜血桿造成嚴重的經濟損失。 本論文研究主要包括兩個方面：（1）副豬嗜血桿菌病原菌分離鑒定及其生物學特性研究。分離福建省乃至全國各地區(qū)副豬嗜血桿菌流行菌株，并對分離的副豬嗜血桿菌進行血清、基因分型及培養(yǎng)、生化特性、致病性研究（2）副豬嗜血桿菌大規(guī)模液體培養(yǎng)工藝優(yōu)化。對分離的不同血清型菌株進行篩選，選出多個血清型的菌株作為疫苗株，進行液體培養(yǎng)，建立一種優(yōu)勢菌株的大規(guī)模高效液體培養(yǎng)方法，對培養(yǎng)工藝進行優(yōu)化，獲得最大量菌體，為疫苗研制做好前期準備。
作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 目的：分離福建省乃至全國各地區(qū)副豬嗜血桿菌流行菌株、優(yōu)化其大規(guī)模液體培養(yǎng)工藝條件。 基本思路：分離福建省乃至全國各地區(qū)副豬嗜血桿菌流行菌株，并對分離的副豬嗜血桿菌進行血清、分型及培養(yǎng)、生化特性、致病性研究。并對分離的不同血清型菌株進行篩選，選出多個血清型的菌株作為疫苗株，進行液體培養(yǎng)，建立一種優(yōu)勢菌株的大規(guī)模高效液體培養(yǎng)方法，對培養(yǎng)工藝進行優(yōu)化，獲得最大量菌體，為疫苗研制做好前期準備。
科學性、先進性及獨特之處
- 該作品的研究思路、技術路線都符合該領域當前的研究趨勢，具有較強的科學性；其先進性和獨特性表現(xiàn)在利用龍巖學院動物醫(yī)學研究所的平臺分離福建省乃至全國各地區(qū)副豬嗜血桿菌流行菌株，并建立一種副豬嗜血桿菌大規(guī)模高效液體培養(yǎng)方法的建立，為將來研制不同血清型、基因型的疫苗提供理論基礎和做好前期的準備工作。
應用價值和現(xiàn)實意義
- 通過該課題的研究，福建省乃至全國各地區(qū)副豬嗜血桿菌流行菌株進行血清型和基因型的鑒定，和通過液體培養(yǎng)獲得最大量的菌體，對副豬嗜血桿菌疫苗的研制提供了前期的理論基礎，為將來預防副豬嗜血桿菌病起到積極的作用。
學術論文摘要
- 本論文通過分離福建省乃至全國各地區(qū)副豬嗜血桿菌流行菌株，分析不同地區(qū)流行的主要血清型和基因型；篩選免疫原性好的優(yōu)勢菌株，建立大規(guī)模高效液體培養(yǎng)方法，優(yōu)化培養(yǎng)工藝，為研制開發(fā)具有知識產權的本土疫苗奠定良好的理論基礎和做好前期的準備工作。
獲獎情況
- 作品尚未發(fā)表
鑒定結果
- 無
參考文獻
- [1] 蔡旭旺，陳煥春，劉正飛，等.副豬嗜血桿菌的分離培養(yǎng)和血清型鑒定[J].華中農業(yè)大學學報，2005, 24:55-58 [2] 蔡旭旺.副豬嗜血桿菌的分離鑒定及診斷方法與滅活疫苗的研究[D].華中農業(yè)大學,2006:18-20. [3] 李曉華，楊小燕，鄭新添，等. 副豬嗜血桿菌的分離與鑒定[J].中國畜牧獸醫(yī)，2010，37：10-2. [4] Aareatrup F M,. Seyfarth A M, Angen O. Antimicrobial susceptibility of Haemophilus parasuis and Histophilus somni from pigs and cattle in Denmark[J]. Vet Microbiol, 2004, 101:143-146. [5] Aarestrup F M, Jorsal S E, Jensen N E. Serological characterization and antimicrobial susceptibility of Streptococcus isolates from diagnostic samples in Denmark during 2004and2005[J]. Vet Microbiol, 2007, 60:59-66. [6] Cai X, Chen H, Blackall P J,et al.Serological Characterization of Haemophilus Parasuis Isolates from China[J].Veterinary Microbiology,2005,111(3-4):231-236.
同類課題研究水平概述
- 副豬嗜血桿菌病，是常規(guī)飼養(yǎng)豬群上呼吸道的一種常在菌，但在特定條件下可以侵入機體并引起嚴重的全身性疾病，以纖維素性多發(fā)性漿膜炎、關節(jié)炎和腦膜炎為特征，該病又稱為革拉瑟氏?。∣liveira et al,2004）。國外已對副豬嗜血桿菌的研究引起高度重視，美國、日本、加拿大、德國、澳大利亞、丹麥、西班牙等養(yǎng)豬業(yè)較發(fā)達的國家均已對本國的副豬嗜血桿菌流行病學進行了調查，表明副豬嗜血桿菌病從臨床發(fā)病豬中的分離率高達20%左右，而且流行的血清型通常為副豬嗜血桿菌當中毒力較強的血清型，如血清5型、4型和13型等(Oliveira et al,2003,Angen et al)。 在我國，上個世紀關于豬場發(fā)生多發(fā)性漿膜炎與關節(jié)炎的報導極少，幾乎處于空白，無人開展過病原學方面的研究工作。2002年，華中農大從已分離鑒定和保存的副豬嗜血桿菌當中取出15株在澳大利亞首次對我國的副豬嗜血桿菌進行血清型鑒定，并從中篩選出菌株對該菌的生物學特性進行研究，從而建立了該菌的快速分離鑒定、培養(yǎng)和保存方法（蔡旭旺等，2005）。近幾年，其它各地關于各豬場發(fā)生多發(fā)性漿膜炎和關節(jié)炎也有陸續(xù)報道，特別是在近兩年已成急驟上升之勢，但鮮有病原分離鑒定的報道，沒有血清學分型方面的研究（肖運德等，2002；高豐等，2002；王天齊，2004；尹秀鳳，2004；王平利，2005；王成達，2005；黃伊穎，2005；鐘妮娜，2005；洪江庭，2005；鄭西義，2005；張長剛，2006）。 副嗜血桿菌可以用藥物預防和治療， 但開發(fā)使用疫苗是目前比較理想而經濟的有效預防辦法。目前市場上已有以進口為主的商品疫苗，分離副豬嗜血桿菌流行菌株，篩選免疫原性較好的菌株，開發(fā)研制具有交叉保護的多價疫苗，是預防和控制副豬嗜血桿菌病的必然要求和大勢所趨。目前，副豬嗜血桿菌疫苗的研制，還是采用傳統(tǒng)的分離病原體菌株，固體平板培養(yǎng)滅活制備，此方法獲得的疫苗價格較為昂貴，華中農大通過液體培養(yǎng)副豬嗜血桿菌，制備單價和多價疫苗，取得了一定的進展（蔡旭旺等，2006），但還存在著一定的缺陷，本課題通過所分離的副豬嗜血桿菌建立大規(guī)模高效液體培養(yǎng)方法，優(yōu)化培養(yǎng)工藝，為研制開發(fā)具有知識產權的本土疫苗奠定良好的理論基礎和做好前期的準備工作，具有較為深遠的意義。
