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基本信息
- 項(xiàng)目名稱：
- 食管癌細(xì)胞ECa109S100A4表達(dá)干預(yù)的生物學(xué)意義
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡介：
- 應(yīng)用細(xì)胞培養(yǎng)、爬片技術(shù)、免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測S100A4 RNA干擾前后該蛋白的表達(dá)，臺盼藍(lán)細(xì)胞計(jì)數(shù)研究細(xì)胞增殖變化，應(yīng)用劃痕實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)該細(xì)胞增殖、遷移及侵襲能力的改變。探討S100A4蛋白在食管癌ECA-109細(xì)胞中的表達(dá)特點(diǎn)及RNA干擾沉默基因表達(dá)后，腫瘤的生長，增殖及遷移的改變。
- 詳細(xì)介紹：
- 食管癌是我國高發(fā)的惡性腫瘤之一，其發(fā)病機(jī)制不明確，患者往往就診時即為罹患腫瘤晚期，手術(shù)損傷大且患者生存質(zhì)量差，目前尚缺乏準(zhǔn)確有效的早期診斷方法，而對于不能接受手術(shù)的晚期患者亦沒有理想的分子/基因治療手段，因而導(dǎo)致食管癌高死亡率居高不下。本研究為深入了解食管癌發(fā)展和侵襲的關(guān)鍵分子、篩選早期診斷和晚期分子治療的有效指標(biāo)提供有價值的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。探討S100A4蛋白在食管癌ECA-109細(xì)胞中的表達(dá)特點(diǎn)及RNA干擾沉默基因表達(dá)后，腫瘤的生長，增殖及遷移的改變。 基本思路：應(yīng)用細(xì)胞培養(yǎng)、爬片技術(shù)、免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測S100A4 RNA干擾前后該蛋白的表達(dá)，臺盼藍(lán)細(xì)胞計(jì)數(shù)研究細(xì)胞增殖變化，應(yīng)用劃痕實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)該細(xì)胞增殖、遷移及侵襲能力的改變。
作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 目的：探討S100A4蛋白在食管癌ECA-109細(xì)胞中的表達(dá)特點(diǎn)及RNA干擾沉默基因表達(dá)后，腫瘤的生長，增殖及遷移的改變。 基本思路：應(yīng)用細(xì)胞培養(yǎng)、爬片技術(shù)、免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測S100A4 RNA干擾前后該蛋白的表達(dá)，臺盼藍(lán)細(xì)胞計(jì)數(shù)研究細(xì)胞增殖變化，應(yīng)用劃痕實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)該細(xì)胞增殖、遷移及侵襲能力的改變。
科學(xué)性、先進(jìn)性及獨(dú)特之處
- 本研究食管癌細(xì)胞系ECA-109從中科院上海細(xì)胞庫引進(jìn)；免疫細(xì)胞化學(xué)采用ABC法，S100A4 siRNA試劑購自上海吉瑪生物公司。實(shí)驗(yàn)中設(shè)立對照組。采用細(xì)胞培養(yǎng)、爬片技術(shù)、、免疫細(xì)胞化學(xué)、臺盼藍(lán)細(xì)胞計(jì)數(shù)、劃痕實(shí)驗(yàn)等多種技術(shù)。作品首次證實(shí)了S100A4在食管癌ECA-109細(xì)胞中的表達(dá)與其生長增殖無關(guān)，但劃痕實(shí)驗(yàn)顯示其與細(xì)胞的遷移與侵襲能力關(guān)系密切。
應(yīng)用價值和現(xiàn)實(shí)意義
- 食管癌是我國高發(fā)的惡性腫瘤之一，其發(fā)病機(jī)制不明確，患者往往就診時即為罹患腫瘤晚期，手術(shù)損傷大且患者生存質(zhì)量差，目前尚缺乏準(zhǔn)確有效的早期診斷方法，而對于不能接受手術(shù)的晚期患者亦沒有理想的分子/基因治療手段，因而導(dǎo)致食管癌高死亡率居高不下。本研究為深入了解食管癌發(fā)展和侵襲的關(guān)鍵分子、篩選早期診斷和晚期分子治療的有效指標(biāo)提供有價值的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
學(xué)術(shù)論文摘要
- 【摘要】 目的 探討S100A4蛋白在食管癌ECA-109細(xì)胞中的表達(dá)特點(diǎn)及RNA干擾沉默該基因表達(dá)后，腫瘤細(xì)胞生長、增殖及遷移的改變。 方法 應(yīng)用細(xì)胞培養(yǎng)、爬片技術(shù)、免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測S100A4 RNA干擾前后該蛋白的表達(dá)，臺盼藍(lán)細(xì)胞計(jì)數(shù)研究細(xì)胞增殖變化，應(yīng)用劃痕實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)該細(xì)胞增殖、遷移及侵襲能力的改變。 結(jié)果 RNA干擾3天后，S100A4在食管癌ECA-109細(xì)胞中的表達(dá)明顯下調(diào)，其生長與增殖未受影響，但劃痕顯示干擾后該細(xì)胞遷移與侵襲能力下降。 關(guān)鍵詞 食管癌ECA-109細(xì)胞；S100A4；RNA干擾；遷移與侵襲
獲獎情況
- 大連醫(yī)科大學(xué)課外科技作品大賽校級三等獎
鑒定結(jié)果
- 無
參考文獻(xiàn)
- 細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)、RNA干擾技術(shù)、劃痕實(shí)驗(yàn) Ma X, et al. Small interfering RNA-directed knockdown of S100A4 decreases proliferation and invasiveness of osteosarcoma cells. Cancer Lett 299:171-81, 2010.
同類課題研究水平概述
- 食管癌是我國最常見的癌癥之一,目前其臨床治療效果還相當(dāng)有限,5年生存率不到15%.我國研究者對食管癌進(jìn)行了長期的研究并取得顯著成績,提出環(huán)境因素是食管癌病因的假說.然而,同樣暴露于相似環(huán)境因素的人群,卻只有少數(shù)人發(fā)生食管癌,提示個人的遺傳因素對食管癌發(fā)生可能有重要作用.目前普遍認(rèn)為食管癌是多因素作用,多基因參與,多階段發(fā)展的疾病,然而其發(fā)生和發(fā)展的確切機(jī)制仍未闡明.已有許多研究探討了食管癌中癌基因和抑癌基因的改變[1],有人用cDNA芯片分析食管癌變不同階段的基因表達(dá)譜[2],這些研究有助于認(rèn)識食管癌的生物學(xué)性質(zhì)以及發(fā)生和發(fā)展過程中的分子生物學(xué)的改變.最近有人對我國北方食管癌家族聚集性進(jìn)行研究,認(rèn)為存在高度外顯的易感基因[3],另一研究也提示林縣食管癌符合孟德爾常染色體隱性遺傳[4].然而,至今尚無直接證據(jù)證明確實(shí)存在高度外顯的食管癌易感基因.我們設(shè)想,即使存在這種高度特異的易感基因,也可能只局限于一些家族性食管癌,正如BRCA1/2與乳腺癌一樣;而大多數(shù)散發(fā)性食管癌更可能是一系列多態(tài)性相關(guān)基因之間以及這些基因與環(huán)境之間相互作用引起的.
