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基本信息
- 項(xiàng)目名稱：
- 負(fù)載VEGF DNA質(zhì)粒膠原-磺化羧甲基殼聚糖真皮支架修復(fù)豬III度燒傷創(chuàng)面支架血管化及創(chuàng)面修復(fù)機(jī)理
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡介：
- 該課題是多學(xué)科相結(jié)合的綜合性課題，實(shí)驗(yàn)者熟練掌握外科無菌術(shù)及基本操作，能獨(dú)立完成皮膚移植等手術(shù)；學(xué)習(xí)醫(yī)學(xué)美容課程，熟悉皮膚缺損后修復(fù)的基本原理。在前期實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)用負(fù)載VEGF DNA質(zhì)粒膠原-殼聚糖真皮支架對豬III度燒傷有顯著的血管誘導(dǎo)和創(chuàng)面修復(fù)作用，本實(shí)驗(yàn)建立理想的豬III度燒傷全層皮膚缺損模型，應(yīng)用負(fù)載VEGF DNA質(zhì)粒膠原-磺化羧甲基殼聚糖真皮支架研究其血管化和創(chuàng)面修復(fù),明確該材料優(yōu)點(diǎn)。
- 詳細(xì)介紹：
- 該課題是一多個(gè)學(xué)科相結(jié)合的綜合性課題，申請人熟練掌握外科無菌術(shù)及外科的基本操作，能獨(dú)立完成皮膚移植等手術(shù)；通過細(xì)胞培養(yǎng)的理論和實(shí)驗(yàn)課程的學(xué)習(xí)，掌握了分離培養(yǎng)豬角質(zhì)形成細(xì)胞和真皮成纖維細(xì)胞的技術(shù)；學(xué)習(xí)了醫(yī)學(xué)美容的一些課程，熟悉皮膚缺損后修復(fù)的基本原理，并對缺損和修復(fù)的研究產(chǎn)生了濃厚的興趣。申請人可以充分發(fā)揮自身的臨床技能、實(shí)驗(yàn)技能為完成該課題奠定基礎(chǔ)。 經(jīng)過前期的實(shí)驗(yàn)研究證明，膠原-殼聚糖真皮支架、膠原-磺羧甲基殼聚糖真皮支架均能修復(fù)創(chuàng)傷及燒傷所致的全層皮膚缺損。在Ⅲ度燒傷創(chuàng)面的修復(fù)中，后者優(yōu)于前者。皮膚組織工程的關(guān)鍵是基質(zhì)材料的快速血管化而能盡早地發(fā)揮真皮修復(fù)創(chuàng)面的功能。本課題在以往實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步優(yōu)化真皮支架基質(zhì)材料，通過在膠原-磺化羧甲基殼聚糖真皮支架上復(fù)合VEGF質(zhì)粒，以驗(yàn)證這種改進(jìn)的支架能否進(jìn)一步提升人工真皮支架血管化的速度，同時(shí)與膠原－磺化羧甲基殼聚糖真皮支架創(chuàng)面修復(fù)效果及機(jī)理進(jìn)行比較，并在此真皮支架的基礎(chǔ)上進(jìn)行表皮移植，對創(chuàng)面的修復(fù)進(jìn)行觀察，進(jìn)行生物學(xué)檢測，明確該材料的醫(yī)學(xué)應(yīng)用價(jià)值。為此材料最終應(yīng)用到臨床提供依據(jù)，該材料如果驗(yàn)證成功，則可在一定程度上緩解臨床上大面積皮膚缺損而出現(xiàn)的皮源緊張的問題，所以該研究具有實(shí)用的臨床價(jià)值。建立豬III度燙傷全層皮膚缺損模型。用負(fù)載VEGF質(zhì)粒的膠原－磺化羧甲基殼聚糖真皮支架作為人工真皮置入創(chuàng)面，并對該真皮支架植入后不同時(shí)間點(diǎn)血管化程度進(jìn)行檢測，根據(jù)負(fù)載VEGF質(zhì)粒的膠原－磺化羧甲基殼聚糖真皮支架血管化程度，在血管化真皮支架上進(jìn)行自身表皮移植，并對原位誘導(dǎo)修復(fù)創(chuàng)面效果進(jìn)行比較。用組織學(xué)檢測、免疫組織化學(xué)法和TUNEL等方法來檢測支架中血管生長、成纖維細(xì)胞浸潤生長情況、修復(fù)創(chuàng)面的組織結(jié)構(gòu)、各種生長細(xì)胞因子的變化、自身膠原替代人工真皮支架情況以及創(chuàng)面修復(fù)過程中的細(xì)胞凋亡等。
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作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 明確負(fù)載VEGF DNA質(zhì)粒的膠原－磺化羧甲基殼聚糖真皮支架修復(fù)豬創(chuàng)傷后全層皮膚缺損的的可能性和實(shí)用性，在豬III度燒傷創(chuàng)面植入支架，待其血管化后，將表皮移植到血管化的支架上，觀察修復(fù)情況，用免疫組織化學(xué)方法對“人工皮膚”中的血管、各種生長細(xì)胞因子進(jìn)行檢測，明確應(yīng)用負(fù)載VEGF DNA質(zhì)粒的膠原－磺化羧甲基殼聚糖真皮支架加表皮移植修復(fù)豬III度燒傷的實(shí)際效果，為此材料最終應(yīng)用到臨床提供依據(jù)。
科學(xué)性、先進(jìn)性及獨(dú)特之處
- 臨床上經(jīng)常情況需要進(jìn)行自體皮膚移植才能修復(fù),由于患者的供皮區(qū)有限, 需要用一些皮膚替代物覆蓋創(chuàng)面。在現(xiàn)有的真皮支架中，存在血管化速度緩慢，血管化程度不足的缺點(diǎn)，本課題是在以往實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上通過對比的方法，研究負(fù)載VEGF質(zhì)粒的膠原—磺化羧甲基殼聚糖真皮支架創(chuàng)面修復(fù)及血管化的速度，驗(yàn)證這種改進(jìn)的支架能否進(jìn)一步提升人工真皮支架血管化的速度，進(jìn)一步明確新材料的優(yōu)缺點(diǎn)。
應(yīng)用價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義
- 當(dāng)大面積燙傷或損傷時(shí)需要進(jìn)行自體皮膚移植才能修復(fù)或用其他皮膚替代物覆蓋保護(hù)和促進(jìn)愈合。現(xiàn)有的技術(shù)有：第一自體全層皮膚移植，因皮源緊張受到限制；第二各種真皮基質(zhì)，價(jià)格昂貴，來源有限；第三應(yīng)用表皮細(xì)胞膜片修復(fù)，移植后存在外觀功能差、不耐磨等缺點(diǎn)；第四組織工程研究。各種皮膚替代物在一定程度上緩解了大面積燒傷病人的皮源短缺問題,但是存在很多不足。臨床上很多皮膚替代物都是國外產(chǎn)品，價(jià)格昂貴，無法廣泛推廣。
學(xué)術(shù)論文摘要
- 目的 探討膠原-磺化羧甲基殼聚糖真皮支架負(fù)載血管內(nèi)皮生長因子VEGF DNA質(zhì)粒及膠原-磺化羧甲基殼聚糖真皮支架在修復(fù)III度燒傷創(chuàng)面中創(chuàng)面修復(fù)、支架血管化及肌成纖維細(xì)胞數(shù)量所導(dǎo)致的創(chuàng)面收縮與細(xì)胞凋亡的差異，明確血管化對修復(fù)過程中創(chuàng)面收縮和細(xì)胞凋亡的影響及與無支架植入的燒傷創(chuàng)面修復(fù)的區(qū)別。方法 將兩種不同真皮支架各移植于6頭豬（共18頭豬）III度燒傷清創(chuàng)后創(chuàng)面，對植入支架1、2、3周后的創(chuàng)面及植入支架1、2、3周創(chuàng)面加植表皮后2周的創(chuàng)面修復(fù)情況及病理切片進(jìn)行觀察。同時(shí)，通過采用免疫組織化學(xué)、末端脫氧核苷酸介導(dǎo)的生物素化的脫氧尿嘧啶DNA切口末端標(biāo)記等方法，對不同時(shí)間的創(chuàng)面中表達(dá)CD 31的新生血管、α-SMA表達(dá)陽性的血管和肌成纖維細(xì)胞數(shù)量、TGF-β1、TGF-β1表達(dá)陽性的細(xì)胞數(shù)比較、VEGF表達(dá)陽性的細(xì)胞數(shù)和細(xì)胞凋亡發(fā)生情況進(jìn)行檢測和觀察。實(shí)驗(yàn)以不植入支架的燒傷創(chuàng)面作為對照。結(jié)論 負(fù)載VEGF DNA質(zhì)粒膠原-磺化羧甲基殼聚糖真皮支架可更好誘導(dǎo)血管生成，減少創(chuàng)面收縮，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡從而抑制瘢痕的增生，在臨床上具有良好的應(yīng)用前景。
獲獎(jiǎng)情況
- 2011年“挑戰(zhàn)杯”大學(xué)生課外學(xué)術(shù)科技作品競賽 校一等獎(jiǎng)
鑒定結(jié)果
- 負(fù)載VEGF DNA質(zhì)粒膠原-磺化羧甲基殼聚糖真皮支架可更好誘導(dǎo)血管生成，減少創(chuàng)面收縮，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡從而抑制瘢痕的增生，在臨床上具有良好的應(yīng)用前景。
參考文獻(xiàn)
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同類課題研究水平概述
- 目前國內(nèi)對人工皮膚的研究較多，包括第四軍醫(yī)大學(xué)的金巖已培育出帶活細(xì)胞的“人工皮膚”，但這些研究都需采用支架在體外與活細(xì)胞共同培養(yǎng)形成組織工程的“人工皮膚”，這需要花費(fèi)一定的時(shí)間和財(cái)力，且體外培養(yǎng)會受很多不確定因素的影響，會在一定程度上延誤患者的治療。膠原—?dú)ぞ厶钦嫫ぶЪ?、膠原—磺化羧甲基殼聚糖真皮支架、負(fù)載VEGF DNA質(zhì)粒的膠原—?dú)ぞ厶钦嫫ぶЪ軇?chuàng)面原位誘導(dǎo)修復(fù)創(chuàng)面可克服以上不足。原位誘導(dǎo)是否比組織工程更優(yōu)越。人工皮膚原位誘導(dǎo)支架材料血管化模擬真皮復(fù)合刃厚皮、表皮和表皮細(xì)胞移植與無人工真皮支架誘導(dǎo)的皮膚全層缺損創(chuàng)面、形成的瘢痕及在創(chuàng)面上移植刃厚皮、表皮和表皮細(xì)胞的區(qū)別。材料的血管化速度。人工真皮支架原位誘導(dǎo)和組織工程皮膚在相同的創(chuàng)面血管化速度是否一致。燒傷創(chuàng)面的血供比創(chuàng)傷創(chuàng)面差，用人工真皮支架原位誘導(dǎo)和組織工程皮膚修復(fù)效果是否一致。國內(nèi)對人工皮膚在燒傷創(chuàng)面的應(yīng)用研究較少。目前，人工皮膚的研究模型多為鼠等小型動(dòng)物，不能制造較大的創(chuàng)面，而小創(chuàng)面對實(shí)驗(yàn)的影響較大，且鼠的皮膚和皮下結(jié)構(gòu)與人不盡相同，而豬的皮膚和皮下結(jié)構(gòu)和人最為相似。目前，國內(nèi)外人工皮膚研究的細(xì)胞外基質(zhì)模擬物多采用天然材料，而對調(diào)節(jié)支架材料的表面自由能、電荷性質(zhì)對人工皮膚成活的影響和將外源性基因（血管內(nèi)皮生長因子）復(fù)合入材料，轉(zhuǎn)入目的細(xì)胞，加速支架的血管化較少研究。
