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基本信息

項目名稱:
丹參水溶性部位抑制血管內(nèi)皮細胞凋亡的作用及機制研究
小類:
生命科學
簡介:
探明丹參水溶性部位對脂多糖(LPS)處理的血管內(nèi)皮細胞(VEC)凋亡的保護作用及機制。內(nèi)毒素處理培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細胞造成細胞凋亡。培養(yǎng)液中添加系列濃度的丹參水溶性成分培養(yǎng)細胞,倒置相差顯微鏡觀測細胞形態(tài)變化。吖啶橙染色,共聚焦顯微鏡觀測凋亡細胞核片段化狀況;PI染核,流式細胞儀檢測細胞周期分布。
詳細介紹:
目的 探明丹參水溶性部位對脂多糖(LPS)處理的血管內(nèi)皮細胞(VEC)凋亡的保護作用及機制。方法 內(nèi)毒素處理培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細胞造成細胞凋亡。培養(yǎng)液中添加系列濃度的丹參水溶性成分培養(yǎng)細胞,倒置相差顯微鏡觀測細胞形態(tài)變化。吖啶橙染色,共聚焦顯微鏡觀測凋亡細胞核片段化狀況;PI染核,流式細胞儀檢測細胞周期分布。生化試劑盒檢測細胞內(nèi)丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)活性。結(jié)果 脂多糖處理使血管內(nèi)皮細胞形成大量凋亡小體,細胞核片段化嚴重。明顯降低了細胞存活率,改變了細胞周期的正常分布,阻止細胞由G1期進入S期。同時顯著上調(diào)了細胞中的MDA含量,而下調(diào)了其中的SOD、GSH-PX活性明顯。丹參水溶性部位在一定濃度范圍內(nèi),劑量依賴性地逆轉(zhuǎn)脂多糖引起的上述變化。結(jié)論 丹參水溶性部位可能通過調(diào)節(jié)細胞氧化應激狀態(tài)抑制脂多糖導致的血管內(nèi)皮細胞凋亡。 丹參具有抗動脈粥樣硬化、改善微循環(huán)、抑制和解除血小板聚集、增加冠脈流量等藥理學作用,對多種心腦血管疾病療效顯著。血管內(nèi)皮損傷是多種血腦管類疾病的始動環(huán)節(jié)和中心環(huán)節(jié),因而保護、修復內(nèi)皮細胞的功能也成為防治該類疾病的重要途徑。 現(xiàn)有的丹參保護血管內(nèi)皮細胞的研究,均針對丹參復方、丹參全成分或丹參的脂溶性成分;未見關(guān)于丹參水溶性部位對血管內(nèi)皮藥理作用的報道。而鑒于中藥傳統(tǒng)的用藥方式,研究丹參水溶性部位的藥理活性更有意義。我們利用內(nèi)毒素(脂多糖,LPS)誘導人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞(Human Umbilical Vascular Endothelial Cells, HUVEC)凋亡,研究丹參水溶性部位對血管內(nèi)皮細胞的保護作用。

作品圖片

  • 丹參水溶性部位抑制血管內(nèi)皮細胞凋亡的作用及機制研究
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  • 丹參水溶性部位抑制血管內(nèi)皮細胞凋亡的作用及機制研究
  • 丹參水溶性部位抑制血管內(nèi)皮細胞凋亡的作用及機制研究

作品專業(yè)信息

撰寫目的和基本思路

探明丹參水溶性部位對脂多糖(LPS)處理的血管內(nèi)皮細胞(VEC)凋亡的保護作用及機制。內(nèi)毒素處理培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細胞造成細胞凋亡。培養(yǎng)液中添加系列濃度的丹參水溶性成分培養(yǎng)細胞,倒置相差顯微鏡觀測細胞形態(tài)變化。吖啶橙染色,共聚焦顯微鏡觀測凋亡細胞核片段化狀況;PI染核,流式細胞儀檢測細胞周期分布。

科學性、先進性及獨特之處

現(xiàn)有的丹參保護血管內(nèi)皮細胞的研究,均針對丹參復方、丹參全成分或丹參的脂溶性成分;未見關(guān)于丹參水溶性部位對血管內(nèi)皮藥理作用的報道。而鑒于中藥傳統(tǒng)的用藥方式,研究丹參水溶性部位的藥理活性更有意義。我們利用內(nèi)毒素(脂多糖,LPS)誘導人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞(Human Umbilical Vascular Endothelial Cells, HUVEC)凋亡,研究丹參水溶性部位對血管內(nèi)皮細胞的保護作用。

應用價值和現(xiàn)實意義

實驗結(jié)果表明,內(nèi)毒素處理使血管內(nèi)皮細胞形成大量凋亡小體,細胞核片段化嚴重。同時顯著降低了細胞存活率,改變了細胞周期的正常分布,阻止細胞由G1期進入S期。而丹參水溶性部位在一定濃度范圍內(nèi),劑量依賴性地顯著抑制了內(nèi)毒素誘導的細胞凋亡小體的形成;提高了細胞存活率,使細胞周期基本恢復正常。該結(jié)果表明丹參水溶性部位能夠抑制內(nèi)毒素誘導的血管內(nèi)皮細胞凋亡。

學術(shù)論文摘要

[1]杜冠華,張均田.丹參現(xiàn)代研究概況與進展[J].醫(yī)藥導報,2004,23(6): 355-360. [2]吳立玲主編.心血管病理生理學[M].北京:北京醫(yī)科大學出版社,2000,8-10. [3]Landmesser U, Drexl ER H.The clinical significance of endothelial dysfunction[J].Curr Opin Cardiol,2005,20:547-551. [4]王志華,黃姝芬.復方丹參滴丸對冠心病患者血管內(nèi)皮功能影響[J].海南醫(yī)學,2007,18(4):17-19. [7]Jaffe, E.A., Nachman, R.L., Becker, C.G.. Culture of human endothelial cells derived from umbilical veins[J].J Clin. Invest ,1973,52:2745-2756.

獲獎情況

鑒定結(jié)果

參考文獻

[1]杜冠華,張均田.丹參現(xiàn)代研究概況與進展[J].醫(yī)藥導報,2004,23(6): 355-360. [2]吳立玲主編.心血管病理生理學[M].北京:北京醫(yī)科大學出版社,2000,8-10. [3]Landmesser U, Drexl ER H.The clinical significance of endothelial dysfunction[J].Curr Opin Cardiol,2005,20:547-551. [4]王志華,黃姝芬.復方丹參滴丸對冠心病患者血管內(nèi)皮功能影響[J].海南醫(yī)學,2007,18(4):17-19. [5]魏林樹.丹參對腦缺血再灌注區(qū)白細胞與內(nèi)皮細胞粘附的影響[J].西南國防醫(yī)藥,2006,16(6):596-597. [6]李林平,孫曉斐,武宗寅,等.丹參酮ⅡA磺酸鈉對不穩(wěn)定型心絞痛患者血管內(nèi)皮功能的影響[J].濟寧醫(yī)學院學報,2008,31(3):288-290. [7]Jaffe, E.A., Nachman, R.L., Becker, C.G.. Culture of human endothelial cells derived from umbilical veins[J].J Clin. Invest ,1973,52:2745-2756. [8]Qitao Zhao, Nan Wang, Ru Jia, Shangli Zhang, Junying Miao. Integrin β4 is a target of rattlesnake venom during inducing apoptosis of vascular endothelial cells[J].Vascular Pharmacology,2004,41:1-6. [9]許冬青,張 旭,蔡文峰,等.丹參藥物血清保護血管內(nèi)皮細胞分子機制研究[J].中成藥,2005,27(2):229-230. [10]方麗娟,劉乃豐.細胞凋亡與動脈粥樣硬化關(guān)系的研究進展[J].東南大學學報(醫(yī)學版),2010,1:107-110. [11]王桂霞,劉 義,楊春玲.原花青素對血管內(nèi)皮細胞過氧化氫損傷的保護作用[J].中國動脈硬化雜志,2009,17(3):193-196.

同類課題研究水平概述

現(xiàn)有的丹參保護血管內(nèi)皮細胞的研究,均針對丹參復方、丹參全成分或丹參的脂溶性成分;未見關(guān)于丹參水溶性部位對血管內(nèi)皮藥理作用的報道。而鑒于中藥傳統(tǒng)的用藥方式,研究丹參水溶性部位的藥理活性更有意義。我們利用內(nèi)毒素(脂多糖,LPS)誘導人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞(Human Umbilical Vascular Endothelial Cells, HUVEC)凋亡,研究丹參水溶性部位對血管內(nèi)皮細胞的保護作用。 參考文獻 [1]杜冠華,張均田.丹參現(xiàn)代研究概況與進展[J].醫(yī)藥導報,2004,23(6): 355-360. [2]吳立玲主編.心血管病理生理學[M].北京:北京醫(yī)科大學出版社,2000,8-10. [3]Landmesser U, Drexl ER H.The clinical significance of endothelial dysfunction[J].Curr Opin Cardiol,2005,20:547-551. [4]王志華,黃姝芬.復方丹參滴丸對冠心病患者血管內(nèi)皮功能影響[J].海南醫(yī)學,2007,18(4):17-19. [5]魏林樹.丹參對腦缺血再灌注區(qū)白細胞與內(nèi)皮細胞粘附的影響[J].西南國防醫(yī)藥,2006,16(6):596-597. [6]李林平,孫曉斐,武宗寅,等.丹參酮ⅡA磺酸鈉對不穩(wěn)定型心絞痛患者血管內(nèi)皮功能的影響[J].濟寧醫(yī)學院學報,2008,31(3):288-290. [7]Jaffe, E.A., Nachman, R.L., Becker, C.G.. Culture of human endothelial cells derived from umbilical veins[J].J Clin. Invest ,1973,52:2745-2756. [8]Qitao Zhao, Nan Wang, Ru Jia, Shangli Zhang, Junying Miao. Integrin β4 is a target of rattlesnake venom during inducing apoptosis of vascular endothelial cells[J].Vascular Pharmacology,2004,41:1-6.
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