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基本信息
- 項(xiàng)目名稱：
- 補(bǔ)陽還五湯預(yù)處理對(duì)腦缺血再灌注損傷沙鼠海馬微血管的保護(hù)作用
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡介：
- 實(shí)驗(yàn)應(yīng)用補(bǔ)陽還五湯預(yù)處理腦缺血再灌注長爪沙鼠，通過激光多普勒監(jiān)測、單寧酸-氯化鐵媒染以及電鏡等方法觀察微血管變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)陽還五湯預(yù)處理腦缺血再灌注損傷沙鼠海馬微血管抗損傷能力增強(qiáng)，微血管密度及微血管面積比增加，通過減少微血管閉塞，增強(qiáng)微血管再通能力，增加了腦組織血流量，抑制神經(jīng)元損傷。
- 詳細(xì)介紹：
- 補(bǔ)陽還五湯對(duì)改善腦缺血患者的微循環(huán)、下調(diào)缺血再灌注損傷誘導(dǎo)的ET-1基因的異常表達(dá)，緩解腦血管痙攣，提高再灌注后期NO合成、促進(jìn)腦出血大鼠腦內(nèi)VEGF mRNA的表達(dá)，調(diào)整血管的新生過程及緩解臨床癥狀均有顯著的效果，在治療腦血管疾病方面顯示出很好的應(yīng)用前景。然而，補(bǔ)陽還五湯對(duì)腦缺血再灌注損傷后腦組織血流量、微血管損傷的病理生理過程的影響尚無公識(shí)。 從觀察缺血再灌注損傷后大腦海馬組織中微血管形態(tài)結(jié)構(gòu)、數(shù)量等變化及因此產(chǎn)生的神經(jīng)元的損傷入手，以中藥方劑補(bǔ)陽還五湯為影響因素，采用激光多普勒血流儀、單寧酸-氯化鐵媒染法、HE染色技術(shù)和電子顯微技術(shù)，監(jiān)測正常對(duì)照組、假手術(shù)組、模型組、補(bǔ)陽還五湯預(yù)處理組腦組織血流量，微血管形態(tài)、微血管密度（MVD）和微血管面積比（MVA），神經(jīng)元形態(tài)、神經(jīng)元密度（ND）以及血腦屏障超微結(jié)構(gòu)變化。探討補(bǔ)陽還五湯干預(yù)對(duì)缺血再灌注腦組織的預(yù)防性保護(hù)作用及其機(jī)制。本文充分證實(shí)：1、腦缺血再灌注后引起的急性高灌注和延遲性低灌注是腦缺血再灌注損傷的主要因素。2、內(nèi)皮細(xì)胞損傷和微血管功能障礙也是腦缺血再灌注損傷的重要影響因素。3、補(bǔ)陽還五湯預(yù)處理可增強(qiáng)微血管抗損傷能力，緩解微血管痙攣，減輕其損傷程度，使MVD及MVA增加；保護(hù)BBB，以抑制腦組織水腫，有效調(diào)節(jié)腦組織血流量，增加腦組織供血供氧，從而達(dá)到預(yù)防性保護(hù)腦缺血再灌注損傷微血管及神經(jīng)元的目的，可適用于腦卒中高危人群的預(yù)防。
作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 從觀察缺血再灌注損傷后大腦組織中微血管形態(tài)結(jié)構(gòu)、數(shù)量等變化及因此產(chǎn)生的神經(jīng)元的損傷入手，以中藥方劑補(bǔ)陽還五湯為影響因素，采用激光多普勒、單寧酸-氯化鐵媒染法、HE染色技術(shù)和電子顯微技術(shù)，監(jiān)測假手術(shù)組、模型組、補(bǔ)陽還五湯預(yù)處理組腦組織血流量，微血管形態(tài)、微血管密度和微血管面積，神經(jīng)元形態(tài)、神經(jīng)元密度以及血腦屏障超微結(jié)構(gòu)變化。探討補(bǔ)陽還五湯干預(yù)對(duì)缺血再灌注腦組織的預(yù)防性保護(hù)作用及其機(jī)制。
科學(xué)性、先進(jìn)性及獨(dú)特之處
- 應(yīng)用單寧酸-氯化鐵媒染法可清晰的顯示大腦海馬組織內(nèi)各級(jí)微血管，便于對(duì)微血管的形態(tài)結(jié)構(gòu)、數(shù)量、密度的研究，方法簡捷易行，效果可靠。本作品應(yīng)用此法探討腦缺血再灌注損傷機(jī)制以及用補(bǔ)陽還五湯預(yù)處理以評(píng)價(jià)干預(yù)效果。迄今為止國內(nèi)外尚未見相關(guān)報(bào)道。 將血管保護(hù)作為腦缺血性損傷防治的新靶點(diǎn)，進(jìn)行微血管生物學(xué)特性及微血管與神經(jīng)元之間的關(guān)系研究，有可能為腦梗塞的防治開辟新途徑。
應(yīng)用價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義
- 本文充分證實(shí)補(bǔ)陽還五湯可增強(qiáng)微血管抗損傷能力，緩解微血管痙攣，減輕其損傷程度，使微血管密度及微血管面積比增加；保護(hù)血腦屏障，以抑制腦組織水腫，有效調(diào)節(jié)腦組織血流量，增加腦組織供血供氧，從而達(dá)到預(yù)防性保護(hù)腦缺血再灌注損傷微血管及神經(jīng)元的目的，適用于腦卒中高危人群的預(yù)防。
學(xué)術(shù)論文摘要
- 補(bǔ)陽還五湯對(duì)腦缺血再灌注損傷后腦海馬組織血流量、微血管損傷的病理生理過程的影響尚無定論。實(shí)驗(yàn)應(yīng)用補(bǔ)陽還五湯預(yù)處理腦缺血再灌注長爪沙鼠，通過激光多普勒監(jiān)測、單寧酸-氯化鐵媒染以及電鏡等方法觀察微血管變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，1、腦缺血再灌注后引起的急性高灌注和延遲性低灌注是腦缺血再灌注損傷的主要因素。2、內(nèi)皮細(xì)胞損傷和微血管功能障礙也是腦缺血再灌注損傷的重要影響因素。3、補(bǔ)陽還五湯預(yù)處理腦缺血再灌注損傷沙鼠海馬微血管抗損傷能力增強(qiáng)，微血管密度及微血管面積比增加，通過減少微血管閉塞，增強(qiáng)微血管再通能力，增加了腦組織血流量，抑制神經(jīng)元損傷。
獲獎(jiǎng)情況
- 1、補(bǔ)陽還五湯預(yù)處理對(duì)腦缺血再灌注沙鼠海馬組織微血管的保護(hù)作用.中國組織工程研究與臨床康復(fù),已錄用,2011年待發(fā)表。 2、獲得本校大學(xué)生課外科技作品競賽一等獎(jiǎng)。
鑒定結(jié)果
- 無
參考文獻(xiàn)
- 1、趙淑敏,孔祥玉.一種媒染微血管的新方法-單寧酸—氯化鐵法[J].解剖學(xué)雜志,2001, 24(1):91-92. 2、吳以嶺."脈絡(luò)-血管系統(tǒng)病”新概念及其治療探討. 疑難病雜志,2006,4(5):285-287. 3、陳冬, 楊潔紅.補(bǔ)陽還五湯抗腦缺血作用的研究進(jìn)展.中華中醫(yī)藥學(xué)刊, 2010,28(1):72-74. 4、Li JM. The temperature-dependent modulation of an inhibitory circuit in hippocampal slices as revealed by a population spike recording is mediated by extracellular adenosine. Jpn Physiol. 2007;7(12):1147-1151. 5、Plaisier F, Bastide M, Ouk T, et al. Stobadine-induced hastening of sensorimotor recovery after focal ischemia/reperfusion is associated with cerebrovascular protection. Brain Res. 2008;120(8):240-249. 6、Durukan A, Tatlisumak T. Preconditioning-induced ischemic tolerance: a window into endogenous gearing for cerebroprotection. Exp Transl Stroke Med. 2010;2(1):2-8. 7、Jung JE, Kim GS, Chen H, et al. Reperfusion and neurovascular dysfunction in stroke: from basic mechanisms to potential strategies for neuroprotection. Mol Neurobiol. 2010;17(4):145-149.
同類課題研究水平概述
- 應(yīng)用分子生物技術(shù)從西醫(yī)角度探討補(bǔ)陽還五湯的藥理作用是近年的研究熱點(diǎn)，僅CNKI就能搜到幾千篇相關(guān)文獻(xiàn)，證實(shí)補(bǔ)陽還五湯能抑制鈣離子超載、拮抗氧自由基、阻斷炎癥反應(yīng)、降低細(xì)胞凋亡，改善血液流變學(xué)等。但目前有關(guān)補(bǔ)陽還五湯對(duì)腦缺血再灌注損傷后腦組織血流量及微血管影響的研究少見報(bào)道（王新陸等發(fā)現(xiàn)補(bǔ)陽還五湯可在一定程度上下調(diào)缺血再灌注損傷誘導(dǎo)的ET-1基因的異常表達(dá),從而緩解腦血管痙攣；劉志龍等發(fā)現(xiàn)補(bǔ)陽還五湯可提高再灌注后期NO合成；燦杰等證實(shí)補(bǔ)陽還五湯可以促進(jìn)腦出血大鼠腦內(nèi)VEGFmRNA的表達(dá)，從而調(diào)整血管的新生過程）。 目前腦缺血再灌注損傷有關(guān)微血管的研究多通過免疫組化法標(biāo)記內(nèi)皮細(xì)胞，以內(nèi)皮細(xì)胞個(gè)數(shù)計(jì)數(shù)微血管密度、或者通過墨汁血管灌注法觀察血管數(shù)量的變化，還有人應(yīng)用分子生物學(xué)手段通過VEGF、Tie-2、總AKT、磷酸化AKT表達(dá)觀察藥物對(duì)腦缺血再灌注血管新生的影響。但目前有關(guān)補(bǔ)陽還五湯對(duì)腦缺血再灌注損傷微血管的研究少見報(bào)道。 通過PubMed 檢索到的文獻(xiàn)看，有關(guān)補(bǔ)陽還五湯的外文文獻(xiàn)多以國人的研究報(bào)道為主，主要發(fā)表在Journal of Ethnopharmacology 雜志上，報(bào)道內(nèi)容為補(bǔ)陽還五湯對(duì)脊髓、心肌缺血再灌注損傷的影響。但有關(guān)補(bǔ)陽還五湯對(duì)腦缺血再灌注損傷微血管的研究除了本課題組發(fā)表的論文外，尚未見其它報(bào)道。 由于以往堿性磷酸酶媒染血管的方法復(fù)雜、不能顯示血管壁結(jié)構(gòu)，血管充填法和墨汁灌注法時(shí)因壓力、溫度、色素顆粒大小等因素的影響而導(dǎo)致血管顯示不全失其自然或不能準(zhǔn)確觀測血管形態(tài)，因此，國內(nèi)、外腦缺血再灌注損傷微血管及血流量變化的研究報(bào)道甚少。 本文應(yīng)用單寧酸-氯化鐵媒染法（此方法簡捷易行，重復(fù)性好，媒染效果可靠，反差鮮明，不改變?cè)醒苄螒B(tài)結(jié)構(gòu)）觀察應(yīng)用補(bǔ)陽還五湯預(yù)處理后腦缺血再灌注損傷微血管數(shù)量、形態(tài)變化，并與未加保護(hù)的缺血再灌注大腦微血管進(jìn)行比較，研究其對(duì)微血管的保護(hù)作用；應(yīng)用激光多普勒血流儀監(jiān)測腦組織血流量，觀察缺血再灌注損傷腦微循環(huán)血流量的變化及補(bǔ)陽還五湯預(yù)處理后的變化，結(jié)果證實(shí)：補(bǔ)陽還五湯預(yù)處理可使微血管抗損傷能力增強(qiáng)，緩解微血管痙攣，減輕其損傷程度，使MVD及MVA增加；保護(hù)BBB，以抑制腦組織水腫，有效調(diào)節(jié)腦組織血流量，增加腦組織供血供氧，從而達(dá)到預(yù)防性保護(hù)缺血再灌注損傷微血管及神經(jīng)元的目的。
