基本信息
- 項目名稱：
- 艾葉多糖對小鼠腹腔巨噬細胞內酶活性的影響
- 小類：
- 生命科學
- 大類：
- 自然科學類學術論文
- 簡介：
- 巨噬細胞作為很重要的免疫細胞，不僅參與機體的特異性免疫反應和非特異性免疫反應，而且是兩種免疫反應聯(lián)系的“橋梁細胞”，并作為效應細胞起作用。艾葉資源豐富，經濟易得，對其提取物的藥理活性研究也逐漸增多，但國內外對艾葉多糖的研究主要集中在抗體活性上，因此，研究艾葉多糖對巨噬細胞的激活作用將具有重要意義。本實驗旨在通過細胞化學術研究艾葉多糖對體外巨噬細胞胞內酶的影響。
- 詳細介紹：
- 為了研究艾葉多糖對巨噬細胞的活化作用，本文采用水浴回流和乙醇沉淀法提取了艾葉多糖，從小鼠腹腔中分離提取了巨噬細胞。將分離培養(yǎng)7 d后的巨噬細胞分為對照組和多糖組。多糖組分別以終濃度為10μg/mL、100μg/mL和500μg/mL艾葉多糖作用巨噬細胞，對照組用相應體積的水溶媒，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48 h后行酶化學染色，檢測巨噬細胞內酶的活性。圖1顯示酸性磷酸酶（ACP）染色結果，與對照組比較，各濃度組顏色均加深，且濃度越高顏色越深；圖2顯示α一醋酸奈酚酯酶（ANAE）染色結果，與對照組比較，各濃度組顏色均加深，且濃度越高顏色越深；圖3顯示琥珀酸脫氫酶（SDH）染色結果，與對照組比較，低中濃度組顏色無變化，而高濃度組顏色明顯加深；圖4顯示三磷酸腺苷酶（ATPase）染色結果，與對照組比較，各濃度多糖組顏色均無明顯變化。由此可見艾葉多糖能增強體外培養(yǎng)巨噬細胞ACP、ANAE、SDH的活性。
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作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 文獻報道多糖具有提高機體免疫功能的作用，但艾葉多糖在這方面的研究未見有報道。本實驗從大鼠腹腔分離提取巨噬細胞，用不同濃度的艾葉多糖作用巨噬細胞，采用細胞酶化學技術定性研究艾葉多糖對巨噬細胞特異性酶，即酸性磷酸酶（ACP），α-醋酸奈酚酯酶（ANAE ）、三磷酸腺苷酶酶（ATPase）以及琥珀酸脫氫酶（SDH）的影響，從而研究艾葉多糖對巨噬細胞的激活作用，旨在研究艾葉多糖提高機體免疫力的藥理活性。
科學性、先進性及獨特之處
- 本實驗采用細胞模型，運用細胞酶化學技術，將分子生物學和形態(tài)學相結合形象客觀地研究了艾葉多糖對巨噬細胞內酶的激活作用。
應用價值和現(xiàn)實意義
- 本實驗結果將從提高巨噬細胞免疫功能角度，說明艾葉的抗腫瘤和抑菌活性，為艾葉的開發(fā)和利用提供理論依據(jù)。同時，通過對本實驗的研究和論文的撰寫更好地培養(yǎng)學生的科研能力和創(chuàng)新思維能力，以及撰寫學術論文的能力。
學術論文摘要
- 為了研究艾葉多糖對巨噬細胞的活化作用，采用水浴回流和乙醇沉淀法，從艾葉中提取了多糖，以無血清DMEM培養(yǎng)液灌洗小鼠腹腔，分離提取腹腔巨噬細胞，艾葉多糖以不同濃度與體外培養(yǎng)巨噬細胞作用48 h，行細胞酶化學染色，光學顯微鏡觀察巨噬細胞胞內酶的活性變化。結果：艾葉多糖能使巨噬細胞的酸性磷酸酶、α一醋酸奈酚酯酶和琥珀酸脫氫酶的活性明顯增強，且與其濃度有關，對三磷酸腺苷酶的活性不增強。結論：艾葉多糖能增強體外培養(yǎng)巨噬細胞的多種胞內酶的活性。
獲獎情況
- 2010年12月《艾葉水提物及其分離組分的抑菌活性研究》獲黃理工學院大學生科技節(jié)科技論文大賽二等獎 《艾葉水提物及分離組分對金黃色葡萄球菌的抑菌活性研究》發(fā)表于2010年第六期黃石理工學院學報
鑒定結果
- 艾葉多糖能增強體外培養(yǎng)巨噬細胞的多種胞內酶的活性
參考文獻
- 現(xiàn)有技術：1.分離提取原代細胞 2. 原代細胞的體外培養(yǎng) 3. 酶細胞化學染色 技術文獻： [1] 謝錦玉.細胞化學方法,鄂征.組織培養(yǎng)[M]，第二版.北京人民衛(wèi)生出版社,1988:202–240 [2] 趙德來.豬苓多糖和氫化考的松對小鼠腹腔巨噬細胞的作用－細胞化學研究[J].解剖學報，1986，17(2):186–187 [4] 胡慶和，謝錦玉，張蒞峽，等.紅毛五加多糖對腹腔巨噬細胞作用的定量細胞化學研究[J].中國組織化學與細胞化學雜志，1993，2(3):192–194
同類課題研究水平概述
- 近幾十年來，人們發(fā)現(xiàn)從植物多糖具有免疫調節(jié)、抗腫瘤、抗炎癥、抗病毒、抗輻射及降血糖等多種功能,有“生物反應調節(jié)劑”之稱。植物多糖對機體的特異性和非特異性免疫功能具有增強作用，其激活巨噬細胞是其發(fā)揮免疫調節(jié)作用的重要途徑之一。大量植物多糖能提高巨噬細胞酶類（如SOD、LSZ等）和細胞因子（TNF-a、IL-6、IL-12等）的分泌，從而提高其免疫效應。 巨噬細胞內具有多種胞內和胞外酶，也可分泌一些可溶性因子。溶菌酶（LSZ）是巨噬細胞的一種胞外酶，可在體外溶解細菌[1]。胞內酶中含有細胞的特異性酶，如酸性磷酸酶(ACPase)等。巨噬細胞的運動、吞噬、對抗原的處理及活性物質的分泌均與細胞內酶的活性有關[2-5]。受到刺激的巨噬細胞進一步分化成熟，活力增強，吞噬功能增強，促使細胞內溶菌酶大量增多，細胞胞內多種酶活性顯著增強，有效地執(zhí)行其功能。 有報道稱艾葉具有抗癌和抑菌作用。目前我們正參與喻昕院長關于艾葉提取物的抗癌、抗菌項目的研究，證實了艾葉水提物具有抗癌和抑菌的藥理活性。項目成員基于文獻報道多種植物多糖能提高免疫功能，試圖從艾葉的多糖提取物，從提高免疫功能角度，探究艾葉的抗癌抗菌作用。 對于艾葉多糖的研究，國內外對艾葉多糖的藥理活性主要集中在抗體活性上。巨噬細胞作為很重要的免疫細胞，外源性活性物質對巨噬細胞的最基本作用就是刺激巨噬細胞，使胞外酶活性增強，同時釋放更多的細胞因子。項目研究目的是從巨噬細胞的特異性酶以及多種胞內酶出發(fā)，探討艾葉多糖對巨噬細胞的激活作用。本實驗的陽性結果將從提高巨噬細胞免疫功能角度，說明艾葉的抗腫瘤和抑菌活性。同時，通過對本項目研究也能更好地培養(yǎng)我們的科研能力和創(chuàng)新思維能力，以及承擔科研項目的能力。
