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基本信息
- 項目名稱：
- 雷公藤內(nèi)酯醇對AD細(xì)胞模型NO釋放及iNOS表達(dá)的影響
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡介：
- 本研究發(fā)現(xiàn)Aβ1－42在激活小膠質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)AD的炎癥反應(yīng)中發(fā)揮重要作用；T10可通過抑制小膠質(zhì)細(xì)胞NO釋放和iNOS表達(dá)拮抗Aβ1-42引起的海馬神經(jīng)元存活率的降低，發(fā)揮其神經(jīng)保護(hù)作用，從而為今后臨床治療AD提供實驗依據(jù)和理論依據(jù)。
- 詳細(xì)介紹：
- AD是一種多發(fā)于中老年期的中樞神經(jīng)系統(tǒng)退變性疾病，其病因與發(fā)病機(jī)制尚不清楚，目前尚無特效治療方法和藥物。大量研究表明， Aβ沉積激活膠質(zhì)細(xì)胞引發(fā)的腦內(nèi)炎癥反應(yīng)在AD的發(fā)生發(fā)展中扮演著重要角色?；罨哪z質(zhì)細(xì)胞可分泌大量細(xì)胞毒性物質(zhì)參與神經(jīng)元的退變過程，而抑制膠質(zhì)細(xì)胞活化的藥物具有神經(jīng)保護(hù)作用。 T10是從中藥雷公藤中提取的小分子單體活性成分，其主要藥理活性為抗炎和免疫抑制。T10為小分子脂溶性物質(zhì)，可以通過血腦屏障，并且腦是T10的代謝富集部位之一，說明T10在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中也可能具有類似的抗炎活性。 本實驗利用小膠質(zhì)細(xì)胞活化--AD細(xì)胞模型，進(jìn)一步了解免疫異常和氧化應(yīng)激在AD發(fā)病機(jī)制中的作用，通過觀察T10對小膠質(zhì)細(xì)胞NO釋放（Griess反應(yīng)）及iNOS表達(dá)（Western blot）的影響，探討雷公藤在AD模型上的抗炎活性及神經(jīng)保護(hù)作用，弄清楚藥物的作用途徑和靶點，為今后臨床治療阿爾茨海默病提供實驗依據(jù)和理論依據(jù)。 本課題的確立與研究依據(jù)充分，研究方法切實可行，結(jié)論可靠，具有一定的推廣價值。國內(nèi)尚未查到本課題設(shè)計的關(guān)于雷公藤內(nèi)酯醇/單體對AD作用及機(jī)制的文獻(xiàn)報道。
作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 本實驗利用小膠質(zhì)細(xì)胞活化—AD細(xì)胞模型，通過觀察雷公藤對小膠質(zhì)細(xì)胞NO釋放及iNOS表達(dá)的影響，探討雷公藤在AD模型上的抗炎活性及神經(jīng)保護(hù)作用，為今后臨床治療AD提供實驗依據(jù)和理論依據(jù)。
科學(xué)性、先進(jìn)性及獨特之處
- 本課題的確立與研究依據(jù)充分，研究方法切實可行，結(jié)論可靠，國內(nèi)尚未查到本課題設(shè)計的關(guān)于雷公藤內(nèi)酯醇/單體對AD作用及機(jī)制的相關(guān)文獻(xiàn)報道，具有一定的推廣價值。
應(yīng)用價值和現(xiàn)實意義
- 隨著人口的老齡化，AD已嚴(yán)重威脅老年人的生命，目前AD尚無特效治療方法和藥物。本課題通過研究雷公藤內(nèi)酯醇對AD的防治作用及其機(jī)制，期望開發(fā)出治療AD的高效低毒藥物。
學(xué)術(shù)論文摘要
- 目的：以Aβ1-42寡聚體為工具藥建立AD的炎癥模型，觀察雷公藤內(nèi)酯醇對AD的防治作用并初步探討其作用機(jī)制。 方法：用10μM Aβ1-42作用12 h建立小膠質(zhì)細(xì)胞活化——AD炎癥細(xì)胞模型。用不同濃度的T10 (10-11、10-10、10-9、10-8M)預(yù)孵育小膠質(zhì)細(xì)胞12h，然后加入10μM Aβ1-42共孵育12h， Griess反應(yīng)檢測上清NO的含量，Western blot檢測iNOS蛋白表達(dá)。收獲條件培養(yǎng)基，加入海馬神經(jīng)元中，作用24h，MTT法檢測神經(jīng)元存活率，以探討T10對AD的防治作用及其機(jī)制。 結(jié)果：Aβ1-42可刺激小膠質(zhì)細(xì)胞釋放NO，而10-11～10-8M的T10可抑制小膠質(zhì)細(xì)胞釋放NO，減少iNOS表達(dá)，從而減輕神經(jīng)元的損傷。 結(jié)論：在體外T10可減少Aβ1-42寡聚體介導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞NO的釋放及iNOS表達(dá)，該抑制作用可能參與了T10在AD治療中的神經(jīng)保護(hù)機(jī)制。
獲獎情況
- 2011年4月在承德醫(yī)學(xué)院舉辦的大學(xué)生科研成果交流會上榮獲一等獎
鑒定結(jié)果
- 無
參考文獻(xiàn)
- 1.Zhou HF, Liu XY, Niu DB, et al. Triptolide protects dopaminergic neurons from inflammation -mediated damage induced by lipopolysaccharide intranigral injection. Neurobiol Dis. 2005;18: 441-449. 2.Zhou HF, Niu DB, Xue B, et al. Triptolide inhibits TNF-alpha, IL-1 beta and NO production in primary microglial cultures. Neuroreport. 2003;14: 1091-1095. 3.Bamberger ME, Harris ME, McDonald DR, Husemann J and Landreth GE. A cell surface receptor complex for fibrillar beta-amyloid mediates microglial activation. J Neurosci. 2003;23: 2665-2674. 4.Liu B，Hong JS. Role of microglia in inflammation-mediated neurodegenerative diseases: mechanisms and strategies for therapeutic intervention. J Pharmacol Exp Ther. 2003;304: 1-7. 5.薛冰，等.雷公藤單體T10對過氧化氫所致PC12細(xì)胞損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制的研究.中華神經(jīng)醫(yī)學(xué)雜志，2006，5（12）：1194-8
同類課題研究水平概述
- 隨著世界人口的老齡化，AD發(fā)病率逐年上升，嚴(yán)重危害中老年人的身心健康。。在發(fā)達(dá)國家，AD已成為繼心臟病、癌癥和中風(fēng)之后人類的第四位死因。在我國65歲以上人群中，每100人中有4.8人患AD，因而攻克AD、提高老年人的生命質(zhì)量，是當(dāng)今生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域的重大課題之一。迄今為止，AD尚無特效治療方法和藥物。目前治療AD的主要手段是使用乙酰膽堿酯酶抑制劑如毒扁豆堿，依色林等，這些制劑可以減少乙酰膽堿的降解，增加突觸乙酰膽堿的含量。但從總體上看，這些藥物對病情的改善程度都不是很大，其主要原因可能與AD病患者大腦進(jìn)行性退化引起其遞質(zhì)系統(tǒng)的廣泛改變，以及藥物作用時間短暫及其嚴(yán)重的外周副作用有關(guān)。神經(jīng)營養(yǎng)因子對于維持神經(jīng)元的存活、阻止神經(jīng)元的變性和促進(jìn)受損神經(jīng)元的修復(fù)和再生均有至關(guān)重要的作用，但由于神經(jīng)營養(yǎng)因子都是大分子蛋白質(zhì)，不易通過血腦屏障，嚴(yán)重影響了其臨床應(yīng)用。因此，尋找一種可以通過血腦屏障的小分子神經(jīng)營養(yǎng)物質(zhì)，對AD的治療具有重要意義。 雷公藤主要活性為抗炎和免疫抑制，目前用于系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等自身免疫炎癥性疾病的治療。近年來研究表明，在體內(nèi)外帕金森病模型中雷公藤對多巴胺神經(jīng)元具有神經(jīng)保護(hù)作用，作用機(jī)制與其抑制腦內(nèi)小膠質(zhì)細(xì)胞異?；罨目寡谆钚韵嚓P(guān)。雷公藤在AD模型上是否同樣具有抗炎活性及神經(jīng)保護(hù)作用，未見報道。
