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基本信息

項目名稱:
一種蟲草金屬硫蛋白的生產(chǎn)方法
小類:
生命科學(xué)
簡介:
金屬硫蛋白是一種分子量較小、富含半胱氨酸的非酶蛋白質(zhì),在生物制藥、保健品及化妝品等領(lǐng)域有廣泛用途。本項目研究開發(fā)了一種以蟲草為原料生產(chǎn)金屬硫蛋白的方法,首先在發(fā)酵液中添加適量濃度的Zn++,利用液體深層發(fā)酵技術(shù)大規(guī)模發(fā)酵培養(yǎng)蟲草菌絲體,誘導(dǎo)菌絲體產(chǎn)生大量的金屬硫蛋白,然后收集菌絲體,經(jīng)分離純化獲得金屬硫蛋白。本項技術(shù)具有可連續(xù)批量、工業(yè)規(guī)?;a(chǎn),培養(yǎng)周期短,成本低,效益高的特點。
詳細(xì)介紹:
金屬硫蛋白含有豐富的巰基,能螯合大量金屬離子,具有超強清除自由基、解除毒素、防止細(xì)胞癌變等功能。自1977年-2005年已專門召開五次國際專題會議,其結(jié)構(gòu)、功能已取得了巨大的成就,但由于其材料來源有限,提取工藝復(fù)雜,未得到廣泛使用。本項目研究開發(fā)了一種利用現(xiàn)代生物工程技術(shù),通過發(fā)酵蟲草屬真菌(同時添加適量Zn++誘導(dǎo))得到其菌絲體并通過生物化學(xué)手段分離純化得到金屬硫蛋白的方法。本發(fā)明與已有技術(shù)相比,具有培養(yǎng)周期短、成本低、效益高等特點,且消除了動物來源的生化制品有傳染疾病的潛在隱患并可實現(xiàn)工業(yè)規(guī)?;a(chǎn)。由蟲草生產(chǎn)的金屬硫蛋白可廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)藥、保健品和化妝品等領(lǐng)域。

作品專業(yè)信息

設(shè)計、發(fā)明的目的和基本思路、創(chuàng)新點、技術(shù)關(guān)鍵和主要技術(shù)指標(biāo)

1 作品發(fā)明的目的: 隨著對金屬硫蛋白(MT)結(jié)構(gòu)、功能等研究的深入,其用途日益擴(kuò)大,對其需求量也越來越大。目前國內(nèi)僅有幾家生產(chǎn)MT的廠家,主要從兔肝中提取,由于MT原料需求特別,且生產(chǎn)工藝復(fù)雜,導(dǎo)致目前MT產(chǎn)量不大且價格昂貴。所以迄今為止一直缺乏一種高產(chǎn)量、低成本、安全性高、適宜于規(guī)模化生產(chǎn)MT的技術(shù)和方法。 2 基本思路: 本實驗室在對蟲草屬真菌的長期研究中發(fā)現(xiàn),一些蟲草屬真菌對于鋅離子和錳離子有超強耐性和富集特性。我們進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),蟲草真菌對于鋅、錳的解毒機制之一是誘導(dǎo)產(chǎn)生了大量的金屬硫蛋白,來螯合胞內(nèi)游離的鋅、錳離子。經(jīng)測定,菌絲體中金屬硫蛋白的含量遠(yuǎn)高于兔肝中誘導(dǎo)產(chǎn)生的金屬硫蛋白的量。 3 項目創(chuàng)新點 本項目解決了金屬硫蛋白的生產(chǎn)源問題,以液態(tài)深層發(fā)酵法生產(chǎn)金屬硫蛋白,比起兔肝法生產(chǎn)工藝,具有易于工業(yè)化、生產(chǎn)周期短、成本低、無動物制品的潛在傳染疾病危險等優(yōu)勢。 4 技術(shù)關(guān)鍵與主要技術(shù)指標(biāo) 4.1技術(shù)關(guān)鍵:高產(chǎn)MT菌株的選育與MT分離純化工藝的探究。 4.2 主要技術(shù)指標(biāo): 1、選育出2株MT產(chǎn)生能力高、易培養(yǎng)的蛹蟲草菌株和九州蟲草菌株。 2、通過培養(yǎng)條件優(yōu)化,獲得了搖瓶培養(yǎng)產(chǎn)生MT的最佳參數(shù)組合。 3、發(fā)酵罐放大實驗。完成了20L罐規(guī)模進(jìn)行放大實驗。 4、菌絲體中金屬硫蛋白的產(chǎn)量達(dá)到養(yǎng)兔法生產(chǎn)兔肝中金屬硫蛋白產(chǎn)量的4倍以上。 5、金屬硫蛋白提取率85%以上,純度達(dá)到90%以上。 6、得到了適于分離蟲草屬真菌金屬硫蛋白的生產(chǎn)工藝。

科學(xué)性、先進(jìn)性

蟲草屬真菌產(chǎn)生金屬硫蛋白的高能力,可以解決金屬硫蛋白產(chǎn)生源的問題。蟲草菌絲體可利用液體深層發(fā)酵工藝,實現(xiàn)大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)金屬硫蛋白。本發(fā)明具有生產(chǎn)周期短,金屬硫蛋白產(chǎn)率高,生產(chǎn)成本低的優(yōu)點。 同已有技術(shù)相比生產(chǎn)金屬硫蛋白具有周期短,產(chǎn)率高(菌絲體中金屬硫蛋白的產(chǎn)量達(dá)到養(yǎng)兔法生產(chǎn)兔肝中金屬硫蛋白產(chǎn)量的4倍以上);并解決了原有技術(shù)用動物成本高、來源少的難題;不受自然條件的影響。

獲獎情況及鑒定結(jié)果

作品所處階段

實驗室階段

技術(shù)轉(zhuǎn)讓方式

技術(shù)所有權(quán)有償轉(zhuǎn)讓,合作開發(fā)

作品可展示的形式

樣品

使用說明,技術(shù)特點和優(yōu)勢,適應(yīng)范圍,推廣前景的技術(shù)性說明,市場分析,經(jīng)濟(jì)效益預(yù)測

本項目研究開發(fā)了一種以蟲草金屬硫蛋白的方法,首先在發(fā)酵液中添加適量濃度的硫酸鋅,利用液態(tài)深層發(fā)酵法誘導(dǎo)菌絲體產(chǎn)生大量的金屬硫蛋白,然后收集菌絲體,經(jīng)分離純化獲得金屬硫蛋白。本項技術(shù)具有可連續(xù)批量、工業(yè)規(guī)?;a(chǎn),培養(yǎng)周期短,成本低,效益高的特點。 金屬硫蛋白具有超強的清除自由基的能力,已被用于化妝品、保健品和醫(yī)藥等領(lǐng)域。本發(fā)明大大降低了生產(chǎn)成本,金屬硫蛋白的使用有望能得到推廣。 目前國內(nèi)僅有幾家生產(chǎn)MT的廠家,主要從兔肝中提取,由于MT原料需求特別,且生產(chǎn)工藝復(fù)雜,目前MT產(chǎn)量不大,價格昂貴。在國際市場上,金屬硫蛋白每毫克售價高達(dá)66美元,在國內(nèi)售價10-15元/mg,具有極為廣闊的市場空間與利潤空間。 過去的四年中MT每年的產(chǎn)量呈二位數(shù)增長幅度,而這個增長幅度遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足MT市場需求量的增長幅度。根據(jù)MT在化妝品、保健品和新醫(yī)藥等三個領(lǐng)域的應(yīng)用發(fā)展情況,近期內(nèi)需求為每年1100-1500Kg,中長期考慮需求量為每年6000Kg左右。該產(chǎn)品需求量極大,有幾十億元的市場空間。

同類課題研究水平概述

自金屬硫蛋白1957年發(fā)現(xiàn)以來,世界上已先后召開了五次金屬硫蛋白國際專題會議,關(guān)于其結(jié)構(gòu)及生物學(xué)功能的探究已取得了豐碩的成果,其具有清除體內(nèi)自由基、防止機體衰老;解除重金屬毒素;參與微量元素儲存、運輸和代謝;增強人體對各種不良狀態(tài)的適應(yīng)能力;鋅元素貯存庫;防止細(xì)胞癌變;抗輻射;護(hù)膚美容(功效是SOD的1000—10000倍)等功能。 由于MT有超強的清除自由基能力,富MT的化妝品將會比富SOD的同類產(chǎn)品具有更好的美容效果及抗輻射作用,同時用MT生產(chǎn)的藥物或保健品將會非常有效地增強機體的應(yīng)激反應(yīng)和抵抗力,為心血管疾病、糖尿病的治療提供一種新的途徑。在腫瘤預(yù)防和治療中,MT可抵抗重金屬和烷化劑的致癌、致突變作用。隨著人們對MT研究的深入,用MT治療腫瘤可望成為一種有效手段。因此,MT具有廣泛的應(yīng)用前景和巨大的市場潛力。 現(xiàn)在關(guān)于金屬硫蛋白的結(jié)構(gòu),功能研究已取得了豐碩的成果,但其生產(chǎn)源問題一直沒有得到解決。目前國際上僅有幾家生產(chǎn)MT的廠家,主要從兔肝和轉(zhuǎn)基因工程菌中提取,由于MT原料需求特別,且生產(chǎn)工藝復(fù)雜,目前MT產(chǎn)量不大,價格昂貴。在國際市場上,金屬硫蛋白每毫克售價高達(dá)66美元,在國內(nèi)售價10-15元/mg(純度低,非醫(yī)藥用)。因此金屬硫蛋白的大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)具有良好的社會效應(yīng)和巨大的經(jīng)濟(jì)效應(yīng)。
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