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基本信息
- 項目名稱：
- 雙標(biāo)配體法檢測LDL受體活性試劑盒的研發(fā)
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 大類：
- 科技發(fā)明制作A類
- 簡介：
- 現(xiàn)代快節(jié)奏的生活中諸多因素，均可導(dǎo)致高膽固醇血癥的發(fā)生，進(jìn)而誘發(fā)危險的心腦血管病。低密度脂蛋白膽固醇是造成血脂升高的主要原因。有效的檢測LDLR活性功能對及早檢查和治療高膽固醇血癥對防治心血管疾病具有十分重要的意義。 我們通過開發(fā)低價高效、快速穩(wěn)定、科研臨床通用的雙標(biāo)配體試劑盒，進(jìn)一步完善LDLR活性的檢測技術(shù)，極大地促進(jìn)相關(guān)領(lǐng)域的研究，提高臨床診斷篩選家族性高膽固醇血癥的效率。
- 詳細(xì)介紹：
- 隨著人們生活水平的提高，飲食結(jié)構(gòu)的改變，所引起的脂質(zhì)代謝紊亂（如高脂血癥，冠狀動脈粥樣硬化等疾?。┱饾u威脅著人們的身心健康，這些疾病正越來越受到人們的重視。經(jīng)研究表明，低密度脂蛋白膽固醇（LDLC）是造成血脂升高的主要原因，它在體內(nèi)主要是通過LDLR介導(dǎo)，內(nèi)吞進(jìn)入細(xì)胞而完成代謝活動的。所以，如何有效的檢測LDLR活性功能的手段將可以為及早檢查和治療高膽固醇血癥對防治心血管疾病具有十分重要的意義。 目前，國內(nèi)市場上已有商品化的LDL受體 ELISA檢測試劑盒被廣泛應(yīng)用，但是這種方法只能檢測細(xì)胞LDL受體的含量，而無法反映LDL受體結(jié)合、內(nèi)吞活性的變化及LDL在細(xì)胞內(nèi)的分布情況，而且操作過程繁瑣，費時、昂貴。 國外公司研制的DiI-LDL試劑雖然已具有一定的市場，但因其價格昂貴,大大增加了檢測成本, 仍未被國內(nèi)大多數(shù)研究機(jī)構(gòu)和醫(yī)院采用。從而嚴(yán)重制約著我國LDL受體功能活性研究、臨床FH診斷篩選以及脂蛋白探針標(biāo)記技術(shù)等的發(fā)展。而且我國市場上尚未有商品化的膠體金Au熒光素DiI標(biāo)記的LDL（Au-DiI-LDL）配體檢測LDL受體的試劑盒，且國內(nèi)市場上的商品化DiI-LDL,僅有北京協(xié)生生物科技有限責(zé)任本項目的熒光標(biāo)記的氧化型低密度脂蛋白、上海麥莎生物科技有限本項目DiI標(biāo)記氧化型低密度脂蛋白，但市場份額較小，進(jìn)行LDL受體活性檢測研究所需要的DiI-LDL大多依賴于國外公司（如BTI公司的DiI標(biāo)記的人低密度脂蛋白、Kanlen BioMedical公司的DiI-n-LDL等）。而同時利用熒光素DiI和膠體金Au共同標(biāo)記配體LDL，并將該雙標(biāo)記配體(Au-DiI-LDL)進(jìn)一步研制成試劑盒，用于檢測LDL受體活性的方法在國內(nèi)外均未見報道。 本項目的雙標(biāo)配體試劑盒能夠?qū)?xì)胞LDL受體活性做定性定量檢測，靈敏度高，特異性強(qiáng)，操作簡便，對人體無毒害，并且能夠反映單細(xì)胞LDL受體的活性變化及LDL被細(xì)胞攝入后在細(xì)胞內(nèi)的分布情況，所蘊含的市場前景巨大。 同批細(xì)胞即可應(yīng)用熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀、激光共聚焦顯微鏡等多種檢測技術(shù)對細(xì)胞LDL受體結(jié)合、內(nèi)吞的活性進(jìn)行定性定量分析，也可以利用透射電鏡直觀檢測單細(xì)胞內(nèi)LDL受體的內(nèi)吞活性及LDL在細(xì)胞內(nèi)的分布情況，即可應(yīng)用于科學(xué)研究中對LDL受體的活性檢測，也可應(yīng)用于臨床高效診斷篩選FH，具有較高的應(yīng)用價值。 技術(shù)關(guān)鍵和主要技術(shù)指標(biāo)： 本項目根據(jù)低密度脂蛋白（LDL）受體能夠特異性結(jié)合LDL，并內(nèi)吞進(jìn)入胞內(nèi)代謝這一機(jī)制，旨在利用成熟的LDL提取純化技術(shù)、熒光素(DiI)標(biāo)記和膠體金(Au)標(biāo)記技術(shù)。通過靈敏性、穩(wěn)定性、重復(fù)性、樣本適用性等指標(biāo)進(jìn)行質(zhì)量檢測。
作品圖片
作品專業(yè)信息
設(shè)計、發(fā)明的目的和基本思路、創(chuàng)新點、技術(shù)關(guān)鍵和主要技術(shù)指標(biāo)
- 隨著人們生活水平的提高，飲食結(jié)構(gòu)的改變，所引起的脂質(zhì)代謝紊亂正逐漸威脅著人們的身心健康，這些疾病正越來越受到人們的重視。經(jīng)研究表明，低密度脂蛋白膽固醇是造成血脂升高的主要原因。所以，如何有效的檢測LDLR活性功能的手段將可以為及早檢查和治療高膽固醇血癥對防治心血管疾病具有十分重要的意義。 本項目的雙標(biāo)配體試劑盒能夠?qū)?xì)胞LDL受體活性做定性定量檢測，靈敏度高，特異性強(qiáng)，操作簡便，對人體無毒害，并且能夠反映單細(xì)胞LDL受體的活性變化及LDL被細(xì)胞攝入后在細(xì)胞內(nèi)的分布情況，所蘊含的市場前景巨大。 同批細(xì)胞即可應(yīng)用熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀、激光共聚焦顯微鏡等多種檢測技術(shù)對細(xì)胞LDL受體結(jié)合、內(nèi)吞的活性進(jìn)行定性定量分析，也可以利用透射電鏡直觀檢測單細(xì)胞內(nèi)LDL受體的內(nèi)吞活性及LDL在細(xì)胞內(nèi)的分布情況，即可應(yīng)用于科學(xué)研究中對LDL受體的活性檢測，也可應(yīng)用于臨床高效診斷篩選FH，具有較高的應(yīng)用價值。 本項目根據(jù)低密度脂蛋白（LDL）受體能夠特異性結(jié)合LDL，并內(nèi)吞進(jìn)入胞內(nèi)代謝這一機(jī)制，旨在利用成熟的LDL提取純化技術(shù)、熒光素(DiI)標(biāo)記和膠體金(Au)標(biāo)記技術(shù)。通過靈敏性、穩(wěn)定性、重復(fù)性、樣本適用性等指標(biāo)進(jìn)行質(zhì)量檢測。
科學(xué)性、先進(jìn)性
- 本項目根據(jù)低密度脂蛋白受體能夠特異性結(jié)合LDL，并內(nèi)吞進(jìn)入胞內(nèi)代謝這一機(jī)制，旨在利用成熟的LDL提取純化技術(shù)、熒光素標(biāo)記和膠體金標(biāo)記技術(shù)，研制開發(fā)低價高效、快速穩(wěn)定、科研臨床通用的雙標(biāo)配體法檢測LDL受體活性的試劑盒，同批細(xì)胞即可應(yīng)用熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀、激光共聚焦顯微鏡等多種檢測技術(shù)對細(xì)胞LDL受體結(jié)合、內(nèi)吞的活性進(jìn)行定性定量分析，也可以利用透射電鏡直觀檢測單細(xì)胞內(nèi)LDL受體的內(nèi)吞活性及LDL在細(xì)胞內(nèi)的分布情況，即可應(yīng)用于科學(xué)研究中對LDL受體的活性檢測，也可應(yīng)用于臨床高效診斷篩選FH，具有較高的應(yīng)用價值。 本試劑盒標(biāo)記配體的獲得率高，樣品適用范圍廣，通過質(zhì)量檢測與控制保證該試劑盒的特異性達(dá)99%，在10～25ug/ml工作范圍內(nèi)敏感性≥95%，重復(fù)性好、穩(wěn)定性高、兩種信號的交叉性小、完全能滿足LDL受體活性檢測試劑盒的要求。
獲獎情況及鑒定結(jié)果
- 1、論文：《Construction of Colloid Gold-Fluorescein Double-Labelled Method to Detect LDL Receptor Function》一篇，已投稿Methods（IF：3.763）。 2、《雙標(biāo)配體法檢測LDL受體活性試劑盒的研發(fā)》獲得2009年的浙江省大學(xué)生科技創(chuàng)新活動計劃（新苗人才計劃）的資助。（編號：1160100631）
作品所處階段
- 中試階段
技術(shù)轉(zhuǎn)讓方式
- 面議
作品可展示的形式
- 實物、產(chǎn)品
使用說明,技術(shù)特點和優(yōu)勢,適應(yīng)范圍,推廣前景的技術(shù)性說明,市場分析,經(jīng)濟(jì)效益預(yù)測
- 本項目試劑盒的部分推廣范圍包括國內(nèi)各大醫(yī)院（臨床上明確高血脂的病因并確定相應(yīng)的治療方法，從人群中普查體檢篩選FH患者等診斷需要）、科研單位（相關(guān)科學(xué)研究中對LDL-R檢測）等LDL-R檢測試劑盒的用戶，市場前景非常廣闊。該產(chǎn)品試劑盒與進(jìn)口試劑相比，在不影響檢測效果的情況下，由于技術(shù)含量高，生產(chǎn)成本低，有很強(qiáng)的市場競爭力，市場潛在價值非?？捎^。 根據(jù)雙標(biāo)配體法檢測LDL受體試劑盒的產(chǎn)品特點項目推廣將選擇無差異市場營銷。無差異市場營銷指公司只推出一種產(chǎn)品,或只用一套市場營銷辦法來進(jìn)行市場推廣，采取大量市場營銷策略. 大量生產(chǎn)雙標(biāo)配體法檢測LDL受體試劑盒產(chǎn)品，并通過眾多的渠道大量推銷該產(chǎn)品，用這個產(chǎn)品來獲取市場，取得有利競爭力，提高經(jīng)濟(jì)效益。
同類課題研究水平概述
- 細(xì)胞表面LDL-R的分析方法主要包括受體含量檢測和受體活性檢測兩個方面：利用LDL-R抗體和酶聯(lián)免疫的方法可以直接測定LDL-R的含量，但是這種方法只能檢測細(xì)胞LDL-R的含量，而無法反映LDL-R結(jié)合、內(nèi)吞活性的變化及LDL在細(xì)胞內(nèi)的分布情況（如目前已有商品化的LDL受體 ELISA檢測試劑盒被廣泛應(yīng)用。但是這種方法只能檢測細(xì)胞LDL受體的含量，而無法反映LDL受體結(jié)合、內(nèi)吞活性的變化及LDL在細(xì)胞內(nèi)的分布情況）。 而為了體外研究LDL的細(xì)胞代謝和LDL-R活性，起先使用同位素，采樣困難和操作過程繁瑣，且費時、昂貴，故在研究和臨床診斷中難以廣泛開展。后用膠體金記配體LDL制備Au-LDL探針，與細(xì)胞直接孵育，利用透射電鏡觀察細(xì)胞內(nèi)LDL-R的內(nèi)吞功能及LDL在細(xì)胞內(nèi)的分布情況。 近年來，隨著熒光顯微鏡技術(shù)的發(fā)展和專一的熒光分子探針的問世，以DiI、FITC等熒光試劑標(biāo)記的LDL已代替125I-LDL成為檢測LDL-R結(jié)合、內(nèi)吞活性的主要技術(shù)手段，并得到廣泛應(yīng)用。這種方法能夠?qū)?xì)胞LDL-R功能做定性定量檢測，靈敏度高，特異性強(qiáng)，操作簡便，對人體無毒害，并且能夠反映單細(xì)胞LDL-R的活性變化及LDL被細(xì)胞攝入后在細(xì)胞內(nèi)的分布情況。 隨著人們生活水平的提高，飲食結(jié)構(gòu)的改變，所引起的脂質(zhì)代謝紊亂（如高脂血癥，冠狀動脈粥樣硬化等疾?。?，相關(guān)的疾病正越來越受到人們的重視，同時相關(guān)的研究也在逐漸的深入。 目前，我國市場上尚未有商品化的膠體金Au熒光素DiI標(biāo)記的LDL配體檢測LDL受體的試劑盒，且國內(nèi)市場上的商品化DiI-LDL,僅有北京協(xié)生生物科技有限責(zé)任本項目的熒光標(biāo)記的氧化型低密度脂蛋白、上海麥莎生物科技有限本項目DiI標(biāo)記氧化型低密度脂蛋白，但市場份額較小，進(jìn)行LDL受體活性檢測研究所需要的DiI-LDL大多依賴于國外本項目。雖然國外本項目研制的DiI-LDL試劑已具有一定的市場，但因其價格昂貴,大大增加了檢測成本, 仍未被國內(nèi)大多數(shù)研究機(jī)構(gòu)和醫(yī)院采用，從而嚴(yán)重制約著我國LDL受體功能活性研究、臨床FH診斷篩選以及脂蛋白探針標(biāo)記技術(shù)等的發(fā)展。而同時利用熒光素DiI和膠體金Au共同標(biāo)記配體LDL，并將該雙標(biāo)記配體(Au-DiI-LDL)進(jìn)一步研制成試劑盒，用于檢測LDL受體活性的方法在國內(nèi)外均未見報道。
