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基本信息
- 項(xiàng)目名稱：
- 雙標(biāo)配體法檢測(cè)LDL受體活性試劑盒的研發(fā)
- 來(lái)源：
- 第十二屆“挑戰(zhàn)杯”省賽作品
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 大類：
- 科技發(fā)明制作A類
- 簡(jiǎn)介：
- 現(xiàn)代快節(jié)奏的生活中諸多因素，均可導(dǎo)致高膽固醇血癥的發(fā)生，進(jìn)而誘發(fā)危險(xiǎn)的心腦血管病。低密度脂蛋白膽固醇是造成血脂升高的主要原因。有效的檢測(cè)LDLR活性功能對(duì)及早檢查和治療高膽固醇血癥對(duì)防治心血管疾病具有十分重要的意義。 我們通過(guò)開(kāi)發(fā)低價(jià)高效、快速穩(wěn)定、科研臨床通用的雙標(biāo)配體試劑盒，進(jìn)一步完善LDLR活性的檢測(cè)技術(shù)，極大地促進(jìn)相關(guān)領(lǐng)域的研究，提高臨床診斷篩選家族性高膽固醇血癥的效率。
- 詳細(xì)介紹：
- 隨著人們生活水平的提高，飲食結(jié)構(gòu)的改變，所引起的脂質(zhì)代謝紊亂（如高脂血癥，冠狀動(dòng)脈粥樣硬化等疾?。┱饾u威脅著人們的身心健康，這些疾病正越來(lái)越受到人們的重視。經(jīng)研究表明，低密度脂蛋白膽固醇（LDLC）是造成血脂升高的主要原因，它在體內(nèi)主要是通過(guò)LDLR介導(dǎo)，內(nèi)吞進(jìn)入細(xì)胞而完成代謝活動(dòng)的。所以，如何有效的檢測(cè)LDLR活性功能的手段將可以為及早檢查和治療高膽固醇血癥對(duì)防治心血管疾病具有十分重要的意義。 目前，國(guó)內(nèi)市場(chǎng)上已有商品化的LDL受體 ELISA檢測(cè)試劑盒被廣泛應(yīng)用，但是這種方法只能檢測(cè)細(xì)胞LDL受體的含量，而無(wú)法反映LDL受體結(jié)合、內(nèi)吞活性的變化及LDL在細(xì)胞內(nèi)的分布情況，而且操作過(guò)程繁瑣，費(fèi)時(shí)、昂貴。 國(guó)外公司研制的DiI-LDL試劑雖然已具有一定的市場(chǎng)，但因其價(jià)格昂貴,大大增加了檢測(cè)成本, 仍未被國(guó)內(nèi)大多數(shù)研究機(jī)構(gòu)和醫(yī)院采用。從而嚴(yán)重制約著我國(guó)LDL受體功能活性研究、臨床FH診斷篩選以及脂蛋白探針標(biāo)記技術(shù)等的發(fā)展。而且我國(guó)市場(chǎng)上尚未有商品化的膠體金Au熒光素DiI標(biāo)記的LDL（Au-DiI-LDL）配體檢測(cè)LDL受體的試劑盒，且國(guó)內(nèi)市場(chǎng)上的商品化DiI-LDL,僅有北京協(xié)生生物科技有限責(zé)任本項(xiàng)目的熒光標(biāo)記的氧化型低密度脂蛋白、上海麥莎生物科技有限本項(xiàng)目DiI標(biāo)記氧化型低密度脂蛋白，但市場(chǎng)份額較小，進(jìn)行LDL受體活性檢測(cè)研究所需要的DiI-LDL大多依賴于國(guó)外公司（如BTI公司的DiI標(biāo)記的人低密度脂蛋白、Kanlen BioMedical公司的DiI-n-LDL等）。而同時(shí)利用熒光素DiI和膠體金Au共同標(biāo)記配體LDL，并將該雙標(biāo)記配體(Au-DiI-LDL)進(jìn)一步研制成試劑盒，用于檢測(cè)LDL受體活性的方法在國(guó)內(nèi)外均未見(jiàn)報(bào)道。 本項(xiàng)目的雙標(biāo)配體試劑盒能夠?qū)?xì)胞LDL受體活性做定性定量檢測(cè)，靈敏度高，特異性強(qiáng)，操作簡(jiǎn)便，對(duì)人體無(wú)毒害，并且能夠反映單細(xì)胞LDL受體的活性變化及LDL被細(xì)胞攝入后在細(xì)胞內(nèi)的分布情況，所蘊(yùn)含的市場(chǎng)前景巨大。 同批細(xì)胞即可應(yīng)用熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀、激光共聚焦顯微鏡等多種檢測(cè)技術(shù)對(duì)細(xì)胞LDL受體結(jié)合、內(nèi)吞的活性進(jìn)行定性定量分析，也可以利用透射電鏡直觀檢測(cè)單細(xì)胞內(nèi)LDL受體的內(nèi)吞活性及LDL在細(xì)胞內(nèi)的分布情況，即可應(yīng)用于科學(xué)研究中對(duì)LDL受體的活性檢測(cè)，也可應(yīng)用于臨床高效診斷篩選FH，具有較高的應(yīng)用價(jià)值。 技術(shù)關(guān)鍵和主要技術(shù)指標(biāo)： 本項(xiàng)目根據(jù)低密度脂蛋白（LDL）受體能夠特異性結(jié)合LDL，并內(nèi)吞進(jìn)入胞內(nèi)代謝這一機(jī)制，旨在利用成熟的LDL提取純化技術(shù)、熒光素(DiI)標(biāo)記和膠體金(Au)標(biāo)記技術(shù)。通過(guò)靈敏性、穩(wěn)定性、重復(fù)性、樣本適用性等指標(biāo)進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè)。
作品圖片
作品專業(yè)信息
設(shè)計(jì)、發(fā)明的目的和基本思路、創(chuàng)新點(diǎn)、技術(shù)關(guān)鍵和主要技術(shù)指標(biāo)
- 隨著人們生活水平的提高，飲食結(jié)構(gòu)的改變，所引起的脂質(zhì)代謝紊亂正逐漸威脅著人們的身心健康，這些疾病正越來(lái)越受到人們的重視。經(jīng)研究表明，低密度脂蛋白膽固醇是造成血脂升高的主要原因。所以，如何有效的檢測(cè)LDLR活性功能的手段將可以為及早檢查和治療高膽固醇血癥對(duì)防治心血管疾病具有十分重要的意義。 本項(xiàng)目的雙標(biāo)配體試劑盒能夠?qū)?xì)胞LDL受體活性做定性定量檢測(cè)，靈敏度高，特異性強(qiáng)，操作簡(jiǎn)便，對(duì)人體無(wú)毒害，并且能夠反映單細(xì)胞LDL受體的活性變化及LDL被細(xì)胞攝入后在細(xì)胞內(nèi)的分布情況，所蘊(yùn)含的市場(chǎng)前景巨大。 同批細(xì)胞即可應(yīng)用熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀、激光共聚焦顯微鏡等多種檢測(cè)技術(shù)對(duì)細(xì)胞LDL受體結(jié)合、內(nèi)吞的活性進(jìn)行定性定量分析，也可以利用透射電鏡直觀檢測(cè)單細(xì)胞內(nèi)LDL受體的內(nèi)吞活性及LDL在細(xì)胞內(nèi)的分布情況，即可應(yīng)用于科學(xué)研究中對(duì)LDL受體的活性檢測(cè)，也可應(yīng)用于臨床高效診斷篩選FH，具有較高的應(yīng)用價(jià)值。 本項(xiàng)目根據(jù)低密度脂蛋白（LDL）受體能夠特異性結(jié)合LDL，并內(nèi)吞進(jìn)入胞內(nèi)代謝這一機(jī)制，旨在利用成熟的LDL提取純化技術(shù)、熒光素(DiI)標(biāo)記和膠體金(Au)標(biāo)記技術(shù)。通過(guò)靈敏性、穩(wěn)定性、重復(fù)性、樣本適用性等指標(biāo)進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè)。
科學(xué)性、先進(jìn)性
- 本項(xiàng)目根據(jù)低密度脂蛋白受體能夠特異性結(jié)合LDL，并內(nèi)吞進(jìn)入胞內(nèi)代謝這一機(jī)制，旨在利用成熟的LDL提取純化技術(shù)、熒光素標(biāo)記和膠體金標(biāo)記技術(shù)，研制開(kāi)發(fā)低價(jià)高效、快速穩(wěn)定、科研臨床通用的雙標(biāo)配體法檢測(cè)LDL受體活性的試劑盒，同批細(xì)胞即可應(yīng)用熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀、激光共聚焦顯微鏡等多種檢測(cè)技術(shù)對(duì)細(xì)胞LDL受體結(jié)合、內(nèi)吞的活性進(jìn)行定性定量分析，也可以利用透射電鏡直觀檢測(cè)單細(xì)胞內(nèi)LDL受體的內(nèi)吞活性及LDL在細(xì)胞內(nèi)的分布情況，即可應(yīng)用于科學(xué)研究中對(duì)LDL受體的活性檢測(cè)，也可應(yīng)用于臨床高效診斷篩選FH，具有較高的應(yīng)用價(jià)值。 本試劑盒標(biāo)記配體的獲得率高，樣品適用范圍廣，通過(guò)質(zhì)量檢測(cè)與控制保證該試劑盒的特異性達(dá)99%，在10～25ug/ml工作范圍內(nèi)敏感性≥95%，重復(fù)性好、穩(wěn)定性高、兩種信號(hào)的交叉性小、完全能滿足LDL受體活性檢測(cè)試劑盒的要求。
獲獎(jiǎng)情況及鑒定結(jié)果
- 1、論文：《Construction of Colloid Gold-Fluorescein Double-Labelled Method to Detect LDL Receptor Function》一篇，已投稿Methods（IF：3.763）。 2、《雙標(biāo)配體法檢測(cè)LDL受體活性試劑盒的研發(fā)》獲得2009年的浙江省大學(xué)生科技創(chuàng)新活動(dòng)計(jì)劃（新苗人才計(jì)劃）的資助。（編號(hào)：1160100631）
作品所處階段
- 中試階段
技術(shù)轉(zhuǎn)讓方式
- 面議
作品可展示的形式
- 實(shí)物、產(chǎn)品
使用說(shuō)明,技術(shù)特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì),適應(yīng)范圍,推廣前景的技術(shù)性說(shuō)明,市場(chǎng)分析,經(jīng)濟(jì)效益預(yù)測(cè)
- 本項(xiàng)目試劑盒的部分推廣范圍包括國(guó)內(nèi)各大醫(yī)院（臨床上明確高血脂的病因并確定相應(yīng)的治療方法，從人群中普查體檢篩選FH患者等診斷需要）、科研單位（相關(guān)科學(xué)研究中對(duì)LDL-R檢測(cè)）等LDL-R檢測(cè)試劑盒的用戶，市場(chǎng)前景非常廣闊。該產(chǎn)品試劑盒與進(jìn)口試劑相比，在不影響檢測(cè)效果的情況下，由于技術(shù)含量高，生產(chǎn)成本低，有很強(qiáng)的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力，市場(chǎng)潛在價(jià)值非常可觀。 根據(jù)雙標(biāo)配體法檢測(cè)LDL受體試劑盒的產(chǎn)品特點(diǎn)項(xiàng)目推廣將選擇無(wú)差異市場(chǎng)營(yíng)銷。無(wú)差異市場(chǎng)營(yíng)銷指公司只推出一種產(chǎn)品,或只用一套市場(chǎng)營(yíng)銷辦法來(lái)進(jìn)行市場(chǎng)推廣，采取大量市場(chǎng)營(yíng)銷策略. 大量生產(chǎn)雙標(biāo)配體法檢測(cè)LDL受體試劑盒產(chǎn)品，并通過(guò)眾多的渠道大量推銷該產(chǎn)品，用這個(gè)產(chǎn)品來(lái)獲取市場(chǎng)，取得有利競(jìng)爭(zhēng)力，提高經(jīng)濟(jì)效益。
同類課題研究水平概述
- 細(xì)胞表面LDL-R的分析方法主要包括受體含量檢測(cè)和受體活性檢測(cè)兩個(gè)方面：利用LDL-R抗體和酶聯(lián)免疫的方法可以直接測(cè)定LDL-R的含量，但是這種方法只能檢測(cè)細(xì)胞LDL-R的含量，而無(wú)法反映LDL-R結(jié)合、內(nèi)吞活性的變化及LDL在細(xì)胞內(nèi)的分布情況（如目前已有商品化的LDL受體 ELISA檢測(cè)試劑盒被廣泛應(yīng)用。但是這種方法只能檢測(cè)細(xì)胞LDL受體的含量，而無(wú)法反映LDL受體結(jié)合、內(nèi)吞活性的變化及LDL在細(xì)胞內(nèi)的分布情況）。 而為了體外研究LDL的細(xì)胞代謝和LDL-R活性，起先使用同位素，采樣困難和操作過(guò)程繁瑣，且費(fèi)時(shí)、昂貴，故在研究和臨床診斷中難以廣泛開(kāi)展。后用膠體金記配體LDL制備Au-LDL探針，與細(xì)胞直接孵育，利用透射電鏡觀察細(xì)胞內(nèi)LDL-R的內(nèi)吞功能及LDL在細(xì)胞內(nèi)的分布情況。 近年來(lái)，隨著熒光顯微鏡技術(shù)的發(fā)展和專一的熒光分子探針的問(wèn)世，以DiI、FITC等熒光試劑標(biāo)記的LDL已代替125I-LDL成為檢測(cè)LDL-R結(jié)合、內(nèi)吞活性的主要技術(shù)手段，并得到廣泛應(yīng)用。這種方法能夠?qū)?xì)胞LDL-R功能做定性定量檢測(cè)，靈敏度高，特異性強(qiáng)，操作簡(jiǎn)便，對(duì)人體無(wú)毒害，并且能夠反映單細(xì)胞LDL-R的活性變化及LDL被細(xì)胞攝入后在細(xì)胞內(nèi)的分布情況。 隨著人們生活水平的提高，飲食結(jié)構(gòu)的改變，所引起的脂質(zhì)代謝紊亂（如高脂血癥，冠狀動(dòng)脈粥樣硬化等疾?。?，相關(guān)的疾病正越來(lái)越受到人們的重視，同時(shí)相關(guān)的研究也在逐漸的深入。 目前，我國(guó)市場(chǎng)上尚未有商品化的膠體金Au熒光素DiI標(biāo)記的LDL配體檢測(cè)LDL受體的試劑盒，且國(guó)內(nèi)市場(chǎng)上的商品化DiI-LDL,僅有北京協(xié)生生物科技有限責(zé)任本項(xiàng)目的熒光標(biāo)記的氧化型低密度脂蛋白、上海麥莎生物科技有限本項(xiàng)目DiI標(biāo)記氧化型低密度脂蛋白，但市場(chǎng)份額較小，進(jìn)行LDL受體活性檢測(cè)研究所需要的DiI-LDL大多依賴于國(guó)外本項(xiàng)目。雖然國(guó)外本項(xiàng)目研制的DiI-LDL試劑已具有一定的市場(chǎng)，但因其價(jià)格昂貴,大大增加了檢測(cè)成本, 仍未被國(guó)內(nèi)大多數(shù)研究機(jī)構(gòu)和醫(yī)院采用，從而嚴(yán)重制約著我國(guó)LDL受體功能活性研究、臨床FH診斷篩選以及脂蛋白探針標(biāo)記技術(shù)等的發(fā)展。而同時(shí)利用熒光素DiI和膠體金Au共同標(biāo)記配體LDL，并將該雙標(biāo)記配體(Au-DiI-LDL)進(jìn)一步研制成試劑盒，用于檢測(cè)LDL受體活性的方法在國(guó)內(nèi)外均未見(jiàn)報(bào)道。
