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基本信息
- 項目名稱：
- 《基于痰脫落細胞學(xué)制備技術(shù)在肺癌診斷中的研究》
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡介：
- 肺癌是最常見惡性腫瘤之一，發(fā)病率以及死亡率均位于首位，近年發(fā)病率呈增長趨勢。為此肺癌的早期發(fā)現(xiàn)，早期診斷尤為重要。痰找脫落細胞檢查是目前臨床診斷肺癌的常用方法，但敏感度較低。LCT是近年來一項新技術(shù)，可以使細胞快速固定并去除雜質(zhì)干擾，能提高細胞檢出率及試驗可重復(fù)性。高滲鹽水霧化吸入通過其高滲刺激作用使支氣管深部痰液易于引出。因此，我們進行將高滲鹽水霧化、LCT及ICC技術(shù)結(jié)合運用于肺癌診斷的研究。
- 詳細介紹：
- 肺癌是世界各地最常見的惡性腫瘤之一，也是我國最常見的惡性腫瘤，長期存活率低，預(yù)后較差，發(fā)病率以及死亡率均位于所有惡性腫瘤首位，近年發(fā)病率呈增長趨勢。為此肺癌的早期發(fā)現(xiàn)，早期診斷尤為重要。痰找脫落細胞檢查是目前臨床診斷肺癌的常用方法，其具有無創(chuàng)、簡便和易被患者接受的特點 ,其特異度高 ,但敏感度較低 ,假陰性率約為 20 %～60 % ,并有一定的假陽性(約 2 %)。 LCT是近年來引進的一項新技術(shù)，其使用專門的細胞固定液及特殊的處理程序，可以使細胞快速固定并去除其中的血液、黏液、炎癥細胞等的干擾，從而提高細胞檢出率及試驗的可重復(fù)性。 高滲鹽水霧化吸入對支氣管和肺泡內(nèi)壁有一定的潤滑作用，同時其高滲刺激作用也可使支氣管深部痰液易于引出。因此，誘導(dǎo)排痰作為一種無創(chuàng)性檢查手段逐漸受到臨床醫(yī)師的認(rèn)可。 本研究首先探討液基薄層細胞學(xué)（LCT）和細胞免疫化學(xué)（ICC）技術(shù)在肺癌患者痰液檢測中的應(yīng)用價值。其次在體外建立粘膜受損模型，研究不同濃度氯化鈉在不同時間內(nèi)對粘膜細胞的形態(tài)學(xué)影響，探索細胞受電解質(zhì)濃度影響的耐受程度，找出較適宜的濃度范圍及作用時間，使臨床霧化吸入的高滲鹽水的濃度及作用時間更加適宜，減少脫落細胞的損傷，以提高肺癌診斷率。最后在原有的高滲鹽水霧化技術(shù)及LCT上，改進制備細胞病理標(biāo)本工藝使得細胞膜不被破壞，保證了細胞的完整性，便于細胞的免疫組化，提高肺癌診斷率及病理分型。 研究一：應(yīng)用LCT檢測 3 466例痰標(biāo)本，共檢出135例肺癌，其中有10例不能明確癌細胞類型的標(biāo)本，應(yīng)用ICC技術(shù)，分別進行34βE12、Ckpan等抗體標(biāo)記，結(jié)果顯示：經(jīng)ICC標(biāo)記后明確診斷鱗癌3例、腺癌2例、小細胞癌4例，并得到纖支鏡活檢證實。用ICC標(biāo)記后診斷明確率達90%，明顯優(yōu)于單純LCT。結(jié)論：在痰液脫落細胞檢查中，LCT結(jié)合ICC能使肺癌細胞類型診斷明確率顯著提高。 研究二：通過爬片培養(yǎng)粘膜上皮細胞30份，分5組，分別以5個梯度濃度（0.9%、1.8%、2.7%、3.6%、4.5%）NaCl溶液作用，并各取6個時間點（10min、20min、30min、40min、50min、60min）的玻片進行HE染色固定；應(yīng)用病理顯微圖像分析系統(tǒng)采集圖片測定細胞及胞核的等效直徑，統(tǒng)計細胞總數(shù)、裸核細胞數(shù)；計算核漿比和裸核出現(xiàn)率。結(jié)果顯示：粘膜上皮細胞核漿比例和裸核細胞出現(xiàn)率與高滲鹽水的濃度和作用時間呈正相關(guān)。且高滲鹽水濃度達到2.7%、作用時間達到20min時，粘膜上皮細胞的核漿比例和裸核細胞出現(xiàn)率均開始出現(xiàn)顯著升高。結(jié)論：粘膜上皮細胞對高滲鹽水濃度低于2.7%且作用時間在20min內(nèi)具有耐受現(xiàn)象，超過此范圍可對細胞產(chǎn)生較嚴(yán)重的損傷。為高滲鹽水霧化吸入提供了適宜的濃度及時間。 研究三：40例疑診為支氣管肺癌患者經(jīng)霧化吸入40ml的2.7%的高滲鹽水20min，所得到痰標(biāo)本進行LCT處理，進行常規(guī)診斷， 35例LCT殘液同時進行ICC標(biāo)記。結(jié)果顯示： 40例可疑患者中，常規(guī)診斷肺癌共35例，陽性檢出率87.50%，靈敏度100%，特異性100%，兩種方法肺癌檢出率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。35例經(jīng)ICC標(biāo)記結(jié)果顯示細胞類型與常規(guī)診斷一致。結(jié)論：運用2.7%高滲鹽水霧化20min后結(jié)合LCT技術(shù)與ICC技術(shù)檢查的研究值得重視和推廣，可為早期肺癌及其他呼吸系統(tǒng)疾病的研究、監(jiān)測和普查奠定了基礎(chǔ)。 LCT技術(shù)的應(yīng)用在很大程度上解決了常規(guī)痰涂片中存在的粘液、炎細胞及其它雜質(zhì)等的干擾問題，如結(jié)合ICC技術(shù)，不但能提高痰脫落細胞的陽性檢出率，并且能明確腫瘤細胞的類型，為臨床治療提供幫助。 本組研究表明，應(yīng)用2.7%濃度的高滲鹽水霧化誘導(dǎo)20分鐘，可解決痰量少等問題，并且能保證細胞的完整性，為明確腫瘤診斷提供了保證。我們發(fā)現(xiàn)在取痰的過程中，有些患者盡管超聲霧化吸入，但還是不能將痰液咳出。臨床上，患有呼吸系統(tǒng)疾病的病人也會出現(xiàn)咳痰困難的現(xiàn)象，如慢性阻塞性肺疾病、呼吸衰竭病人。痰液的潴留對機體帶來危害，并促進呼吸道內(nèi)的微生物繁殖滋生，導(dǎo)致炎癥惡化與擴散，引發(fā)繼發(fā)感染。因此，我們設(shè)計一款操作簡單、實用、經(jīng)濟的輔助排痰裝置?；颊呖梢杂迷撗b置自行刺激排痰，從而節(jié)省護士在協(xié)助排痰上所浪費的時間。由于此款裝置操作簡單，在家療養(yǎng)的患者也可使用此裝置。
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作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 目的：改進痰脫落細胞學(xué)制備技術(shù)，提高肺癌診斷率。 基本思路：首先，探討液基薄層細胞學(xué)（LCT）技術(shù)及免疫化學(xué)標(biāo)記（ICC）技術(shù)在肺癌及其類型診斷中價值。其次，研究不同濃度氯化鈉和時間對粘膜細胞形態(tài)學(xué)影響，說明高滲鹽水誘導(dǎo)痰在臨床應(yīng)用中出現(xiàn)裸核及細胞膜破裂原因。再次，在原有高滲鹽水霧化技術(shù)及LCT上，改進制備細胞病理標(biāo)本工藝，保證細胞完整性。最后，設(shè)計一款簡單、實用輔助排痰裝置，協(xié)助患者排痰。
科學(xué)性、先進性及獨特之處
- 1、高滲鹽水霧化誘導(dǎo)取痰能增加痰量和卷帶脫落細胞量，根據(jù)體外建模得到的耐受濃度和時間提取細胞能有效提高肺癌陽性診斷率，且較纖支鏡安全。 2、液基細胞診斷試劑能保存細胞完整性、抗原生物特性并能去除痰中雜質(zhì)，延長痰液送檢時間，最大限度收集有效細胞，利于病理醫(yī)師觀察診斷。 3、按壓胸骨切跡上氣管前壁引起咳嗽從而促進痰排出是一種生理反射，對機體無損害。設(shè)計的裝置使臨床取痰標(biāo)本更簡便、安全、有效。
應(yīng)用價值和現(xiàn)實意義
- 1、體外得到的耐受濃度可作為今后粘膜細胞提取的參考，助于完整細胞提取。 2、將高滲鹽水霧化誘導(dǎo)痰、LCT與ICC結(jié)合運用于肺癌早期診斷及分型的技術(shù)可操作性好、無創(chuàng)，能避免一系列并發(fā)癥且成本較低，可廣泛運用于肺癌篩查及診斷，為肺癌治療提供依據(jù)，改善肺癌患者生活質(zhì)量并提高生存率，進而增加社會和經(jīng)濟效益。 3、制作的裝置方便患者自行取痰，減少人力浪費；也可在家使用，減少醫(yī)院人流及醫(yī)源性感染機會。
學(xué)術(shù)論文摘要
- 為提高早期肺癌患者支氣管黏膜脫落細胞的陽性檢出率。首先應(yīng)用LCT技術(shù)對3466例可疑肺癌痰標(biāo)本檢查診斷，判斷陽性率，不能明確癌細胞類型的，結(jié)合ICC對其LCT殘液分別進行抗體標(biāo)記，從而確定細胞類型，探討LCT和ICC技術(shù)在肺癌診斷中的應(yīng)用價值。其次爬片培養(yǎng)粘膜上皮細胞30份，分5組以5個梯度濃度（0.9%、1.8%、2.7%、3.6%、4.5%）NaCl溶液作用，并各取6個時間點玻片進行HE染色固定，應(yīng)用病理顯微圖像分析系統(tǒng)采集圖片測定細胞及胞核的等效直徑，統(tǒng)計細胞總數(shù)、裸核細胞數(shù)，計算核漿比和裸核出現(xiàn)率，為高滲鹽水霧化吸入提供適宜的數(shù)據(jù)。最后對40例疑診為支氣管肺癌的患者霧化吸入適宜濃度高滲鹽水獲取痰液，并對其痰標(biāo)本進行LCT處理，并應(yīng)用ICC標(biāo)記，以明確肺癌診斷及細胞分型。 經(jīng)上述研究發(fā)現(xiàn)：1.痰液脫落細胞檢查中，LCT結(jié)合ICC使肺癌細胞類型診斷明確率顯著提高。2. 粘膜上皮細胞對高滲鹽水濃度低于2.7%且作用時間在20min內(nèi)具有耐受現(xiàn)象，超過此范圍對細胞可產(chǎn)生較嚴(yán)重的損傷。3. 運用2.7%高滲鹽水霧化20min后結(jié)合LCT技術(shù)與ICC技術(shù)檢查的研究值得重視和推廣。
獲獎情況
- 1、《LCT與ICC在肺癌患者痰液檢測中的應(yīng)用及評價》發(fā)表于二級核心期刊《山東醫(yī)藥》2009 年49卷52期 。 2、《粘膜上皮細胞對高滲鹽水的耐受性研究》發(fā)表于《嘉興學(xué)院學(xué)報》2010年22卷6期。
鑒定結(jié)果
- 同意推薦。
參考文獻
- LCT技術(shù): [1]陳世梁.膜式超薄液基細胞學(xué)檢測技術(shù)在肺癌診斷中的應(yīng)用[J].實用癌癥雜志,2007,3(2):196-197. [2]Laverty CR, Farnsworth A, Thurloe J K, et al. Evaluation of the Cyto Rich slide preparation process [J]. Anal Quant Cytol Histol, 1997,19(3):239-245. [3]李建華,付志民,吳廣平,等.液基細胞學(xué)檢測對非婦科細胞標(biāo)本腫瘤細胞診斷的意義[J].中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2004,10(5):414-420. [4]吳廣平,王恩華,李建華,等.液基細胞學(xué)檢查系統(tǒng)在肺癌患者痰液檢查中的臨床應(yīng)用價值[J].中國肺癌雜志,2006,9(2):192-195. 高滲鹽水超聲霧化技術(shù): [1]楊曉蕓，胡雪蓮，景莉玲.高滲鹽水霧化吸入誘導(dǎo)痰在肺癌細胞學(xué)診斷中的應(yīng)用[J].寧夏醫(yī)學(xué)雜志,2008,30（4）:336. [2]羅曉東，婁德劍等.高滲鹽水霧化吸入誘導(dǎo)痰對老年人肺癌細胞學(xué)的診斷作用[J] .中華老年醫(yī)學(xué)雜志,2005,2(24):117-118.
同類課題研究水平概述
- 纖維支氣管鏡肺泡灌洗術(shù)是目前臨床肺癌確診常用手段，其是以纖支鏡嵌入到肺段或亞段支氣管水平，反復(fù)以無菌生理鹽水灌洗、回收的一項技術(shù)，并對其回收液（BALF）進行細胞學(xué)、生化學(xué)、酶學(xué)和免疫學(xué)等一系列檢測和分析。 該技術(shù)與霧化吸入高滲鹽水誘導(dǎo)痰比較： 共同目的：支氣管末端粘膜脫落細胞制備與診斷 不同之處：纖維支氣管鏡肺泡灌洗術(shù)是使用纖維支氣管鏡進行操作，對近期心肌梗死、嚴(yán)重心律失?；颊呤墙玫?；在患有高血壓病、冠心病、大咯血急性期、危重病人或體質(zhì)極度衰弱者的情況下需要慎用；在操作過程中可能出現(xiàn)惡心、咳嗽、紫紺、出汗、煩躁、呼吸困難、肺部哮鳴音、呼吸和（或）心跳停止等情況；術(shù)后會出現(xiàn)鼻腔咽喉不適、疼痛、鼻衄、聲嘶、頭暈、胸悶等狀況。而霧化吸入高滲鹽水誘導(dǎo)痰是使用霧化機，適用于任何患者，甚至對于重癥穩(wěn)定性哮喘、慢性阻塞性肺病患者、對纖維支鏡檢有相對禁忌證或有危險或拒絕纖維支氣管鏡檢的老年人；無任何禁忌癥、慎用情況、操作過程中可能出現(xiàn)的不良情況以及術(shù)后不良反應(yīng)。從上述比較中，可以發(fā)現(xiàn)霧化吸入高滲鹽水誘導(dǎo)痰技術(shù)不論從適用對象、操作方式還是操作后對機體的影響上均占優(yōu)勢。
