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基本信息
- 項(xiàng)目名稱：
- 豬瘟膠體金快速診斷試紙條的研制
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡介：
- 為建立一種快速、簡便的檢測豬瘟病毒（CSFV）的膠體金免疫層析法（GICA）。采用檸檬酸鈉還原法制備膠體顆粒，用CSF抗體標(biāo)記純化，并包被在玻璃纖維膜上，另外將純化的CSF抗體和羊抗鼠抗體包被在硝酸纖維膜上，組裝成CSF快速檢測條，對豬瘟病毒進(jìn)行及時檢測。 結(jié)果顯示，所研制的CSF試劑條在用于CSF診斷時，具有快速、靈敏、特異、簡便等特點(diǎn)，其應(yīng)用價值十分廣闊。
- 詳細(xì)介紹：
- 無
作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 本實(shí)驗(yàn)結(jié)合指導(dǎo)老師的科研項(xiàng)目，建立一種快速、簡便的檢測豬瘟病毒（CSFV）的膠體金免疫層析法（GICA），結(jié)果顯示，所研制的CSF試劑條在用于CSF診斷時，具有快速、靈敏、特異、簡便等特點(diǎn)，其應(yīng)用價值十分廣闊。
科學(xué)性、先進(jìn)性及獨(dú)特之處
- 1. 采用檸檬酸鈉還原法制備膠體顆粒，用CSF抗體標(biāo)記純化，并包被在玻璃纖維膜上，另外將純化的CSF抗體和羊抗鼠抗體包被在硝酸纖維膜上，組裝成CSF快速檢測條，對豬瘟病毒進(jìn)行及時檢測。 2. 使用所研制CSF快速檢測條，檢測收集的70份待檢樣品，檢出豬瘟陽性病例26例，而經(jīng)病毒分離鑒定陽性病例有28例，陽性符合率達(dá)92.8%，將5份陽性豬瘟病毒稀釋后用試紙條和ELISA方法進(jìn)行敏感性實(shí)驗(yàn)。
應(yīng)用價值和現(xiàn)實(shí)意義
- 1、首次研制CSF快速檢測條。 2、將純化的CSF抗體和羊抗鼠抗體包被在硝酸纖維膜上，組裝成CSF快速檢測條，對豬瘟病毒進(jìn)行及時檢測。
學(xué)術(shù)論文摘要
- 為建立一種快速、簡便的檢測豬瘟病毒（CSFV）的膠體金免疫層析法（GICA）。采用檸檬酸鈉還原法制備膠體顆粒，用CSF抗體標(biāo)記純化，并包被在玻璃纖維膜上，另外將純化的CSF抗體和羊抗鼠抗體包被在硝酸纖維膜上，組裝成CSF快速檢測條，對豬瘟病毒進(jìn)行及時檢測。使用所研制CSF快速檢測條，檢測收集的70份待檢樣品，檢出豬瘟陽性病例26例，而經(jīng)病毒分離鑒定陽性病例有28例，陽性符合率達(dá)92.8%，將5份陽性豬瘟病毒稀釋后用試紙條和ELISA方法進(jìn)行敏感性實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明診斷試紙條的敏感性較高，用試制條對ND、EDS-76、TGEV、藍(lán)耳病病毒進(jìn)行檢測，無交叉反應(yīng)。結(jié)果顯示，所研制的CSF試劑條在用于CSF診斷時，具有快速、靈敏、特異、簡便等特點(diǎn)，其應(yīng)用價值十分廣闊。
獲獎情況
- [1]. 趙強(qiáng),楊明.豬瘟膠體金快速診斷試紙條的研制.甘肅工業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)報(bào).2009年第12期． [2]. 楊明.豬瘟膠體金快速診斷試紙條的研制.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào).2009年第10期
鑒定結(jié)果
- 無
參考文獻(xiàn)
- [1] 王東勇,張松樂.免疫膠體金技術(shù)快速診斷中的應(yīng)用[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2003,13(3):391-392. [2] 孔繁德,黃印堯,賴清金,等.斑點(diǎn)免疫金滲濾法檢測豬瘟抗體的研究[J].中國動物檢疫,2003,20(11):27-29. [3] 黃印堯,張長弓,方 瑩,等.用于檢測豬瘟抗體的免疫金標(biāo)試紙條的研制與應(yīng)用研究[J].福建畜牧獸醫(yī),2002,1(24):3-4. [4] 沈關(guān)心,周汝麟.現(xiàn)代免疫學(xué)試驗(yàn)技術(shù)[M].武漢:湖北科技出版社,2002:132-135. [5] 侯惠仁,吳馮波,陳 鍵,等.AFP免疫層析測試條的研制[J].同位素,2000,13(3):142-146. [6] 吳馮波,侯惠仁,賀佑豐,等.免疫層析分析進(jìn)展[J].中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志,1998,21(2):122. [7] 張長弓,金顏輝,黃印堯,等.口蹄疫抗體免疫金標(biāo)快速檢測試紙法的建立[J].福建畜牧獸醫(yī),2004,26(1):4-5. [8] 姜先榮,楊杰.膠體金標(biāo)記蛋白及應(yīng)用[J].安徽教育學(xué)院學(xué)報(bào),1998,2:60-61. [9] 馬麗麗,王玉金,楊書豪,等.快速乙肝表面抗原膠體金免疫層析測定法的建立及應(yīng)用[J].標(biāo)記免疫分析與臨床,1997,4(4):225-227.
同類課題研究水平概述
- 豬瘟是由豬瘟病毒(CSFV)引起的豬的一種最嚴(yán)重的傳染病，不同品種和年齡的豬均發(fā)生。豬瘟每年給養(yǎng)豬業(yè)造成的經(jīng)濟(jì)損失相當(dāng)嚴(yán)重。我國在上世紀(jì)80年以后，隨著規(guī)?；?、集約化養(yǎng)豬業(yè)的迅速發(fā)展，大量生豬及其產(chǎn)品流通，隱性感染豬在全國范圍內(nèi)頻繁流動，使得CSF在我國呈現(xiàn)出區(qū)域性、散發(fā)性流行，疫情始終不斷。而且在許多地方出現(xiàn)了所謂“非典型CSF”和豬瘟病毒(CSFV)的持續(xù)感染、垂直感染，給養(yǎng)豬業(yè)造成極大的危害。 目前常規(guī)的方法ELISA、PCR、熒光法等，往往需要必要的儀器設(shè)備和試劑，費(fèi)時費(fèi)力，基層獸醫(yī)部門往往不具備工作條件和技術(shù)力量。膠體金快速免疫層析技術(shù)是上世紀(jì)90年代國外興起的一種快速診斷技術(shù)。國內(nèi)近年來在醫(yī)學(xué)上研究成功了許多診斷試劑盒或紙條，而動物醫(yī)學(xué)方面研究出的產(chǎn)品較少，應(yīng)用于臨床的更少。為此，我們開展了利用膠體金快速免疫層析技術(shù)研制一種快速、準(zhǔn)確診斷CSF試紙條。 本研究采用膠體金快速免疫層析技術(shù)所研制的豬瘟（抗原）快速診斷試劑條具有靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好、操作簡便快速，達(dá)到了研制的要求，是一項(xiàng)目市場前景好的產(chǎn)品，值得推廣。
