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基本信息

項目名稱:
豬瘟膠體金快速診斷試紙條的研制
小類:
生命科學
簡介:
為建立一種快速、簡便的檢測豬瘟病毒(CSFV)的膠體金免疫層析法(GICA)。采用檸檬酸鈉還原法制備膠體顆粒,用CSF抗體標記純化,并包被在玻璃纖維膜上,另外將純化的CSF抗體和羊抗鼠抗體包被在硝酸纖維膜上,組裝成CSF快速檢測條,對豬瘟病毒進行及時檢測。 結果顯示,所研制的CSF試劑條在用于CSF診斷時,具有快速、靈敏、特異、簡便等特點,其應用價值十分廣闊。
詳細介紹:

作品專業(yè)信息

撰寫目的和基本思路

本實驗結合指導老師的科研項目,建立一種快速、簡便的檢測豬瘟病毒(CSFV)的膠體金免疫層析法(GICA),結果顯示,所研制的CSF試劑條在用于CSF診斷時,具有快速、靈敏、特異、簡便等特點,其應用價值十分廣闊。

科學性、先進性及獨特之處

1. 采用檸檬酸鈉還原法制備膠體顆粒,用CSF抗體標記純化,并包被在玻璃纖維膜上,另外將純化的CSF抗體和羊抗鼠抗體包被在硝酸纖維膜上,組裝成CSF快速檢測條,對豬瘟病毒進行及時檢測。 2. 使用所研制CSF快速檢測條,檢測收集的70份待檢樣品,檢出豬瘟陽性病例26例,而經(jīng)病毒分離鑒定陽性病例有28例,陽性符合率達92.8%,將5份陽性豬瘟病毒稀釋后用試紙條和ELISA方法進行敏感性實驗。

應用價值和現(xiàn)實意義

1、首次研制CSF快速檢測條。 2、將純化的CSF抗體和羊抗鼠抗體包被在硝酸纖維膜上,組裝成CSF快速檢測條,對豬瘟病毒進行及時檢測。

學術論文摘要

為建立一種快速、簡便的檢測豬瘟病毒(CSFV)的膠體金免疫層析法(GICA)。采用檸檬酸鈉還原法制備膠體顆粒,用CSF抗體標記純化,并包被在玻璃纖維膜上,另外將純化的CSF抗體和羊抗鼠抗體包被在硝酸纖維膜上,組裝成CSF快速檢測條,對豬瘟病毒進行及時檢測。使用所研制CSF快速檢測條,檢測收集的70份待檢樣品,檢出豬瘟陽性病例26例,而經(jīng)病毒分離鑒定陽性病例有28例,陽性符合率達92.8%,將5份陽性豬瘟病毒稀釋后用試紙條和ELISA方法進行敏感性實驗,結果表明診斷試紙條的敏感性較高,用試制條對ND、EDS-76、TGEV、藍耳病病毒進行檢測,無交叉反應。結果顯示,所研制的CSF試劑條在用于CSF診斷時,具有快速、靈敏、特異、簡便等特點,其應用價值十分廣闊。

獲獎情況

[1]. 趙強,楊明.豬瘟膠體金快速診斷試紙條的研制.甘肅工業(yè)職業(yè)技術學院學報.2009年第12期. [2]. 楊明.豬瘟膠體金快速診斷試紙條的研制.甘肅農(nóng)業(yè)大學學報.2009年第10期

鑒定結果

參考文獻

[1] 王東勇,張松樂.免疫膠體金技術快速診斷中的應用[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志,2003,13(3):391-392. [2] 孔繁德,黃印堯,賴清金,等.斑點免疫金滲濾法檢測豬瘟抗體的研究[J].中國動物檢疫,2003,20(11):27-29. [3] 黃印堯,張長弓,方 瑩,等.用于檢測豬瘟抗體的免疫金標試紙條的研制與應用研究[J].福建畜牧獸醫(yī),2002,1(24):3-4. [4] 沈關心,周汝麟.現(xiàn)代免疫學試驗技術[M].武漢:湖北科技出版社,2002:132-135. [5] 侯惠仁,吳馮波,陳 鍵,等.AFP免疫層析測試條的研制[J].同位素,2000,13(3):142-146. [6] 吳馮波,侯惠仁,賀佑豐,等.免疫層析分析進展[J].中華醫(yī)學檢驗雜志,1998,21(2):122. [7] 張長弓,金顏輝,黃印堯,等.口蹄疫抗體免疫金標快速檢測試紙法的建立[J].福建畜牧獸醫(yī),2004,26(1):4-5. [8] 姜先榮,楊杰.膠體金標記蛋白及應用[J].安徽教育學院學報,1998,2:60-61. [9] 馬麗麗,王玉金,楊書豪,等.快速乙肝表面抗原膠體金免疫層析測定法的建立及應用[J].標記免疫分析與臨床,1997,4(4):225-227.

同類課題研究水平概述

豬瘟是由豬瘟病毒(CSFV)引起的豬的一種最嚴重的傳染病,不同品種和年齡的豬均發(fā)生。豬瘟每年給養(yǎng)豬業(yè)造成的經(jīng)濟損失相當嚴重。我國在上世紀80年以后,隨著規(guī)?;?、集約化養(yǎng)豬業(yè)的迅速發(fā)展,大量生豬及其產(chǎn)品流通,隱性感染豬在全國范圍內(nèi)頻繁流動,使得CSF在我國呈現(xiàn)出區(qū)域性、散發(fā)性流行,疫情始終不斷。而且在許多地方出現(xiàn)了所謂“非典型CSF”和豬瘟病毒(CSFV)的持續(xù)感染、垂直感染,給養(yǎng)豬業(yè)造成極大的危害。 目前常規(guī)的方法ELISA、PCR、熒光法等,往往需要必要的儀器設備和試劑,費時費力,基層獸醫(yī)部門往往不具備工作條件和技術力量。膠體金快速免疫層析技術是上世紀90年代國外興起的一種快速診斷技術。國內(nèi)近年來在醫(yī)學上研究成功了許多診斷試劑盒或紙條,而動物醫(yī)學方面研究出的產(chǎn)品較少,應用于臨床的更少。為此,我們開展了利用膠體金快速免疫層析技術研制一種快速、準確診斷CSF試紙條。 本研究采用膠體金快速免疫層析技術所研制的豬瘟(抗原)快速診斷試劑條具有靈敏性高、特異性強、重復性好、操作簡便快速,達到了研制的要求,是一項目市場前景好的產(chǎn)品,值得推廣。
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