題-1_100_100.jpg)
基本信息
- 項(xiàng)目名稱：
- 槐耳清膏對乳腺癌細(xì)胞抑制作用機(jī)制的研究
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡介：
- 乳腺癌已成為女性第一殺手。在我國約有半數(shù)乳腺癌患者采用傳統(tǒng)中藥作為抗癌輔助治療。但是許多中藥的抗癌機(jī)制缺乏深入研究。本研究選取激素受體陽性的MCF-7和激素受體陰性的MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞系，從細(xì)胞增殖與凋亡、浸潤與轉(zhuǎn)移兩個(gè)方面證實(shí)了槐耳對乳腺癌細(xì)胞的抑制作用，并進(jìn)一步分析了槐耳處理后細(xì)胞周期以及凋亡通路的變化。通過本研究我們闡明了槐耳抑制乳腺癌的作用機(jī)制，為臨床乳腺癌的治療提供理論基礎(chǔ)。
- 詳細(xì)介紹：
- 乳腺癌已成為全世界女性最常見的惡性腫瘤之一。在我國，其發(fā)病率有不斷上升趨勢。對于乳腺癌治療，常規(guī)治療方式包括手術(shù)、放療、化療、激素治療以及其它輔助療法。然而，這些療法不能完全防止癌癥復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。在輔助療法中，傳統(tǒng)中藥（TCM）因其在殺滅癌細(xì)胞方面的奇特作用（低強(qiáng)度、更自然）而被越來越廣泛地應(yīng)用。 近年來，生長在中國槐樹干上的槐栓菌（槐耳）被做成中成藥劑常被用于癌癥輔助治療。由中國工程院院士、著名肝癌專家湯釗猷院士所帶領(lǐng)的科研團(tuán)隊(duì)曾對其在肝癌治療中的作用進(jìn)行了較廣泛的研究（中國腫瘤 2007年16卷02期，中華外科雜志 2007年45卷09期），但是槐耳清膏在乳腺癌中的作用卻未見全面報(bào)道。 為了探究槐耳清膏對乳腺癌細(xì)胞的作用及其可能機(jī)制，我們選取了激素受體陽性的MCF-7和激素受體陰性的MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞系，從細(xì)胞增殖與凋亡、浸潤與轉(zhuǎn)移兩個(gè)方面證實(shí)了槐耳對乳腺癌細(xì)胞的抑制作用，并進(jìn)一步分析了槐耳處理后乳腺癌細(xì)胞周期以及凋亡通路的變化。我們得出了如下結(jié)論： 1.通過MTT實(shí)驗(yàn)證實(shí)了槐耳抑制MCF-7和MDA-MB-231細(xì)胞的增值具有時(shí)間和劑量依賴性； 2.通過細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)和transwell小室實(shí)驗(yàn)證實(shí)兩種細(xì)胞經(jīng)槐耳處理后遷移和侵襲能力均受到明顯抑制； 3.流式細(xì)胞學(xué)分析乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231細(xì)胞經(jīng)槐耳處理后細(xì)胞周期的變化，發(fā)現(xiàn)MCF-7細(xì)胞中發(fā)生了G0/G1期細(xì)胞周期阻滯； 4.流式細(xì)胞學(xué)PI-Annexin-V雙標(biāo)染色分析，證實(shí)了槐耳可以誘導(dǎo)乳腺癌MCF-7和 MDA-MB-231細(xì)胞發(fā)生凋亡，且凋亡可以被caspase抑制劑逆轉(zhuǎn)； 5.通過western blot技術(shù)檢測p53信號通路，證實(shí)在MCF-7細(xì)胞中，槐耳可能通過誘導(dǎo)p53的積聚和活化導(dǎo)致細(xì)胞周期阻滯； 6.Western blot技術(shù)檢測凋亡相關(guān)信號通路，發(fā)現(xiàn)經(jīng)槐耳處理后MCF-7和MDA-MB-231細(xì)胞系發(fā)生了Bcl-2下調(diào)、Bax上調(diào)及caspase-3的活化，初步證實(shí)了槐耳可能通過線粒體途徑誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞發(fā)生凋亡。 根據(jù)我們的研究發(fā)現(xiàn)，槐耳能誘導(dǎo)激素受體陽性和激素受體陰性的乳腺癌細(xì)發(fā)生凋亡，是一種有效的乳腺癌輔助治療藥物。此外，對于不能接受長期內(nèi)分泌治療的激素受體陰性的乳腺癌患者，槐耳能否作為一種有效的輔助抗癌藥物值得進(jìn)一步的臨床研究。
作品圖片
作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 一、撰寫目的：作品旨在研究槐耳清膏對乳腺癌細(xì)胞的抑制作用，并探究其可能的作用機(jī)制。 二、基本思路：在我國許多乳腺癌患者采用傳統(tǒng)中藥作為抗癌輔助治療，槐耳便是其中之一。本研究選取兩株乳腺癌細(xì)胞系，從細(xì)胞增殖與凋亡、浸潤與轉(zhuǎn)移兩個(gè)方面證實(shí)了槐耳對乳腺癌細(xì)胞的抑制作用，并進(jìn)一步分析了槐耳對細(xì)胞周期以及凋亡通路的影響。通過本研究，我們闡明了槐耳抑制乳腺癌的作用機(jī)制，為臨床乳腺癌的治療提供理論基礎(chǔ)。
科學(xué)性、先進(jìn)性及獨(dú)特之處
- 第一、本作品設(shè)計(jì)思路嚴(yán)密，從現(xiàn)象的證實(shí)到本質(zhì)的揭示，充分體現(xiàn)了作品的科學(xué)性和邏輯性； 第二、本作品探究槐耳水提物對乳腺癌細(xì)胞抑制作用及具體作用機(jī)制時(shí)，各種實(shí)驗(yàn)方法相互證實(shí)，保證了本研究實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性； 第三、本作品發(fā)現(xiàn)槐耳能誘導(dǎo)雌激素受體陽性和雌激素受體陰性乳腺癌細(xì)胞系中的細(xì)胞凋亡，證實(shí)了槐耳對雌激素受體陽性和陰性的患者均為一種有效的乳腺癌治療輔助藥劑，具有很好的應(yīng)用價(jià)值。
應(yīng)用價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義
- 第一、槐耳作為乳腺癌的一種輔助治療藥物，不僅適用于可手術(shù)的早中期乳腺癌患者，對于處于腫瘤晚期及三陰性患者來說，也是一種很好的治療選擇。 第二、本作品對祖國的傳統(tǒng)中藥進(jìn)行研究，率先在國際上報(bào)道了槐耳清膏對乳腺癌的抑制作用，并探究了其作用機(jī)制，對祖國傳統(tǒng)中藥的發(fā)展起了積極的推動作用。
學(xué)術(shù)論文摘要
- 近來，生長在國槐上的槐栓菌（槐耳）在國內(nèi)常被用于癌癥輔助治療；然而槐耳對乳腺癌細(xì)胞的作用人們卻知之甚少。本研究旨在研究槐耳對乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231細(xì)胞的抑制作用，并探究其可能的作用機(jī)制。 我們分別采用MTT、侵襲性測定以及體外劃痕實(shí)驗(yàn)測定細(xì)胞增殖能力和侵襲能力。通過流式細(xì)胞儀對細(xì)胞周期以及細(xì)胞凋亡進(jìn)行分析，采用蛋白質(zhì)印記實(shí)驗(yàn)檢測凋亡通路。 我們的研究發(fā)現(xiàn)：(1)槐耳能明顯抑制MCF-7和MDA-MB-231細(xì)胞增殖；(2)細(xì)胞侵襲和遷移能力也因加入槐耳而受到抑制；(3)槐耳只能在MCF-7細(xì)胞中誘導(dǎo)G0/G1周期阻滯和p53積聚及活化；(4)PI-Annexin-V染色測定和蛋白質(zhì)印跡實(shí)驗(yàn)證實(shí)槐耳通過caspase途徑介導(dǎo)細(xì)胞凋亡，且加入Caspase抑制劑后可以明顯降低由槐耳誘導(dǎo)的乳腺癌細(xì)胞凋亡的現(xiàn)象也證實(shí)了這一點(diǎn)；(5)羅丹明123染色發(fā)現(xiàn)槐耳處理后兩種細(xì)胞線粒體膜電位降低，蛋白質(zhì)印記實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)Bcl-2下調(diào)以及Bax上調(diào)，說明槐耳可能通過線粒體途徑誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞凋亡。 據(jù)我們的研究發(fā)現(xiàn)，槐耳能誘導(dǎo)激素受體陽性的MCF-7和激素受體陰性的MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞發(fā)生凋亡，在今后的臨床治療中有著廣闊的應(yīng)用前景。
獲獎情況
- 論文發(fā)表在2010年第11期的Cancer Science上( SCI收錄，IF=3.771)： Huaier aqueous extract inhibits proliferation of breast cancer cells by inducing apoptosis. Cancer Sci. 101, 2375-2383.
鑒定結(jié)果
- 無
參考文獻(xiàn)
- 1.Guo Y, Cheng P, Chen Y et al. Studies on the Constituents of Polysaccharide from the Hyphae of Trametes Robiniophila(II) J Chin Pharm U 1992; 23: 155–7. 2.Guo Y, Cheng P, Chen Y et al. Isolation and analysis of the polysaccharide of Huaier mycelium. Chin J Biochem Pharm 1993; 63: 56–9. 3.Campbell MJ, Hamilton B, Shoemaker M, Tagliaferri M, Cohen I, Tripathy D. Antiproliferative activity of Chinese medicinal herbs on breast cancer cells in vitro. Anticancer Res 2002; 22: 3843–52. 4.Powell CB, Fung P, Jackson J et al. Aqueous extract of herba Scutellaria barbatae, a chinese herb used for ovarian cancer, induces apoptosis of ovarian cancer cell lines. Gynecol Oncol 2003; 91: 332–40. 5.Nizamutdinova IT, Lee GW, Son KH et al. Tanshinone I effectively induces apoptosis in estrogen receptor-positive (MCF-7) and estrogen receptor-negative (MDA-MB-231) breast cancer cells. Int J Oncol 2008; 33:485–91.
同類課題研究水平概述
- 槐耳是中國的一種藥用真菌，中藥名稱槐栓菌，入藥歷史約有1600年；但直到近幾十年，槐耳的抗腫瘤性能才被發(fā)現(xiàn)和利用。近年來，由中國工程院院士、著名肝癌專家湯釗猷院士所帶領(lǐng)的科研團(tuán)隊(duì)曾對其在肝癌治療中的作用進(jìn)行了較廣泛的研究（中國腫瘤 2007年16卷02期，中華外科雜志 2007年45卷09期），發(fā)現(xiàn)槐耳既具有抑制腫瘤細(xì)胞生長，又具有生物治療及免疫治療等多項(xiàng)功效，在腫瘤的綜合治療及單獨(dú)治療中都表現(xiàn)出良好的療效，這是在抗腫瘤藥物中比較罕見及獨(dú)特的理想藥物。雖然其在抗腫瘤的基礎(chǔ)研究和臨床應(yīng)用上已取得一定進(jìn)展，但其抗腫瘤的細(xì)胞分子生物學(xué)基礎(chǔ)尚不甚清楚，深入研究其作用機(jī)制將為其臨床推廣和合理應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)提供依據(jù)。 目前國內(nèi)有關(guān)于槐耳的作用機(jī)制的研究涉及到以下幾個(gè)方面：促進(jìn)巨噬細(xì)胞功能、誘導(dǎo)細(xì)胞因子、促進(jìn)細(xì)胞免疫功能、提高體液免疫作用、抑制腫瘤血管生成、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、逆轉(zhuǎn)耐藥細(xì)胞株等。國外文獻(xiàn)尚未見相關(guān)報(bào)道。大量臨床實(shí)踐及細(xì)胞實(shí)驗(yàn)已證明槐耳浸膏能抑制多種腫瘤細(xì)胞的增殖，并且誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡是其發(fā)揮這一作用的途徑之一。周進(jìn)等采用不同濃度的槐耳浸膏與人胰腺癌細(xì)胞Panc-1共同培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)槐耳浸膏能明顯抑制Panc-1的生長，細(xì)胞周期阻滯主要在G1期?；倍嘣跐舛葹?mg/ml、作用時(shí)間36h時(shí)達(dá)到凋亡高峰，凋亡率達(dá)15-20%。細(xì)胞免疫組化進(jìn)一步證實(shí)槐耳浸膏能上調(diào)凋亡基因Caspase-3的表達(dá)。程若川等將不同濃度的槐耳浸膏與人直腸癌HR8348 細(xì)胞共同培養(yǎng)36h，結(jié)果顯示細(xì)胞凋亡指數(shù)隨槐耳浸膏濃度的增加而增加 當(dāng)濃度為4mg/ml時(shí)達(dá)到最大。另外有作者分別觀察了槐耳浸膏誘導(dǎo)人肺腺癌細(xì)胞A549食管癌細(xì)胞、Motl-4細(xì)胞的凋亡作用，證明槐耳浸膏對這些腫瘤細(xì)胞均有明顯誘導(dǎo)凋亡的作用。鑒于槐耳在癌癥治療中的巨大潛力，研究其對乳腺癌細(xì)胞的作用及作用機(jī)制故而顯得十分有意義。但是目前在乳腺癌中尚未見到相關(guān)的系統(tǒng)、全面的機(jī)制研究報(bào)道，而本研究的進(jìn)行不僅對槐耳抑制乳腺癌細(xì)胞這一現(xiàn)象加以證實(shí)，并且運(yùn)用transwell、劃痕實(shí)驗(yàn)、流式細(xì)胞術(shù)、蛋白質(zhì)印記技術(shù)深入探究了其抑制乳腺癌細(xì)胞增殖的具體機(jī)制，這些作用機(jī)制的闡述將有利于槐耳的理論研究和應(yīng)用推廣。
