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基本信息
- 項目名稱：
- 中國林蛙蛙油形成機理的內(nèi)分泌學(xué)研究
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡介：
- 林蛙油作為功效奇特的中藥材收錄于《中華人民共和國藥典》（2005年版），由我國長白山地區(qū)的中國林蛙冬眠前膨大的輸卵管曬干制成。本研究使用人工飼養(yǎng)的商品蛙為實驗動物，將中國林蛙輸卵管季節(jié)性發(fā)育進程作為關(guān)注點，首次從東北林蛙輸卵管冬眠前膨大發(fā)育的特殊生理現(xiàn)象出發(fā)，以生殖內(nèi)分泌角度為切入點，探究輸卵管膨大的內(nèi)在調(diào)控機理，為林蛙油的開發(fā)與利用提供科學(xué)依據(jù)。
- 詳細介紹：
- 本研究采用解剖學(xué)觀察，形態(tài)學(xué)統(tǒng)計，組織學(xué)觀察，免疫印跡，免疫組織化學(xué)等方法，確認了： 冬眠前期輸卵管的增生是細胞增殖的結(jié)果； 原癌基因c-kit所表達的受體蛋白在冬眠前期表達強烈； 結(jié)論：中國林蛙輸卵管的發(fā)育呈現(xiàn)出明顯的季節(jié)性變化，管內(nèi)小葉中的基質(zhì)細胞在冬眠前期表現(xiàn)出強烈細胞增殖的現(xiàn)象，c-kit/SCF信號系統(tǒng)在輸卵管增生過程中發(fā)揮正向調(diào)控。
作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 申報者以生殖內(nèi)分泌學(xué)角度為切入點，欲探究輸卵管膨大的內(nèi)在調(diào)控機理，為林蛙油的開發(fā)與利用提供科學(xué)依據(jù)。 申報者從林蛙油形成的源頭出發(fā)，以冬眠前形成蛙油的膨大輸卵管作為實驗?zāi)Ｐ?，利用生殖生理學(xué)方法，闡述蛙油形成的機理。
科學(xué)性、先進性及獨特之處
- 本研究采用解剖學(xué)觀察，形態(tài)學(xué)統(tǒng)計，組織學(xué)觀察，免疫印跡和免疫組織化學(xué)等現(xiàn)代生命科學(xué)的經(jīng)典研究手段，首次闡述中國林蛙輸卵管冬眠前膨大發(fā)育這一特殊生理現(xiàn)象的內(nèi)在調(diào)控機理，項目研究結(jié)果可服務(wù)于林蛙不斷發(fā)展的產(chǎn)業(yè)化需求。
應(yīng)用價值和現(xiàn)實意義
- 此項研究是林蛙生殖內(nèi)分泌學(xué)研究的基礎(chǔ)一環(huán)，研究結(jié)果可為人工科學(xué)飼養(yǎng)中國林蛙、林蛙蛙油產(chǎn)量和質(zhì)量的提高以及林蛙可持續(xù)開發(fā)和利用提供科學(xué)的參考依據(jù)。
學(xué)術(shù)論文摘要
- 本項研究的目的是檢測c-kit受體蛋白在中國林蛙輸卵管冬眠前的免疫活性。研究中，冬眠前期輸卵管的組織學(xué)結(jié)構(gòu)得到了詳盡的觀察。為了確定輸卵管組織是否經(jīng)歷增殖，我們使用了增殖性細胞核抗原(PCNA)作為細胞增殖的標(biāo)記。輸卵管的組織切片利用多克隆兔源c-kit受體蛋白和增殖性細胞核抗原(PCNA)的抗血清通過卵白素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物法進行免疫學(xué)定位研究。輸卵管的總蛋白經(jīng)提取后用于免疫印跡分析。c-kit受體蛋白和增殖性細胞核抗原(PCNA)的免疫活性在冬眠前的輸卵管組織中得以確認。免疫印跡的分析也表明c-kit受體蛋白和增殖性細胞核抗原(PCNA)在冬眠前的輸卵管中存在印跡條帶。以上的實驗結(jié)果表明：c-kit受體蛋白對中國林蛙輸卵管的膨大發(fā)育產(chǎn)生調(diào)控作用。 關(guān)鍵詞：c-kit受體蛋白、輸卵管、中國林蛙
獲獎情況
- 論文投稿 論文已投稿到SCI源雜志《獸醫(yī)科學(xué)雜志》（The Journal of Veterinary Medical Science）,并已接收發(fā)表，修改完畢即可正式發(fā)表。 學(xué)會發(fā)表 前期研究部分成果已成功發(fā)表在第44屆生殖生物學(xué)年會（美國，波特蘭，2011），雜志影響因子為3.469。 競賽獲獎 2011年第七屆北京林業(yè)大學(xué)“梁希杯”課外學(xué)術(shù)論文大賽一等獎 2010-2011年度第六屆首都六大高校生命科學(xué)論壇最佳創(chuàng)意獎
鑒定結(jié)果
- 此項研究從生殖內(nèi)分泌學(xué)角度揭示林蛙輸卵管異常發(fā)育形成蛙油這一特殊生理學(xué)現(xiàn)象的本質(zhì)，項目研究運用了現(xiàn)代生物學(xué)技術(shù)手段，取得的結(jié)果真實可靠，部分結(jié)果投稿于SCI源雜志。
參考文獻
- [1] 張穎才, 哈什蟆油[J]. 中藥通報, 1956. 2（5）：205～207. [2] 陳國富，王立中等, 林蛙的開發(fā)利用價值. 特種經(jīng)濟動植物, 1999. 3：11. [3] 李東風(fēng)，陳偉庭, 中國林蛙研究進展. 遼寧師范大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版）, 2005. 28（1）：92～93. [4] Daniel J. Bernard, S.C.C., and Teresa K. Woodruff, Mechanisms of Inhibin Signal Transduction. Recent Prog. Horm. Res., 2001. 56(417). [5] Sporn & AB Roberts. Heidelberg, S.-V.M.J., How cells read TGF-beta signals. Nature Reviews. Molecular and Cellular Biology, 2000 1: p. 169–178. [6] Hoggard, N., et al., Inhibin beta B expression in murine adipose tissue and its regulation by leptin, insulin and dexamethasone. J Mol Endocrinol, 2009. 43(4): p.171-7. [7] Kajsa Sjo¨holm , J.P., Theodore C. Lystig , Eva Jennische ,Teresa K. Woodruff , Bjo¨rn Carlsson , Lena M.S. Carlsson The expression of inhibin beta B is high in human adipocytes, reduced by weight loss, and correlates to factors implicated in metabolic disease. Biochemical and Biophysical Research Communications, 2006. 344 p. 1308–1314.
同類課題研究水平概述
- 中國林蛙的輸卵管呈現(xiàn)出季節(jié)性發(fā)育變化的特征：相對于其他時期，在9、10月份的冬眠前期，輸卵管經(jīng)歷了極其繁盛的膨大發(fā)育進程。然而，這種季節(jié)性發(fā)育在解剖學(xué)乃至生理學(xué)上的研究數(shù)據(jù)仍不夠深入，因此，從生殖生理學(xué)角度出發(fā)，對中國林蛙輸卵管發(fā)育季節(jié)性變化的確認成為了本項研究的出發(fā)點。 冬眠是溫帶動物在與食物獲得局限性相偶聯(lián)的氣候惡劣時期所采取的一種主要生存策略。冬眠期，攝食和排泄隨代謝和體溫的下降而停止，為了保證在無攝食條件下繼續(xù)存活，能量必須在極短的冬眠前期以脂肪形式儲存在體內(nèi)，導(dǎo)致了冬眠前的脂肪化。 中國林蛙是在生殖系統(tǒng)中表現(xiàn)出冬眠前的脂肪化——輸卵管脂肪化——也即林蛙在冬眠前期一個極短的時期內(nèi)將脂肪迅速儲存在生殖系統(tǒng)的輸卵管內(nèi)。另一方面，冬眠前輸卵管中高度形態(tài)建成的細胞來自于大量可形態(tài)發(fā)生細胞的分化，而細胞在此之前的增殖成為細胞形態(tài)發(fā)生的前提，也是輸卵管成熟發(fā)育始動階段的關(guān)鍵進程。因此，由于對中國林蛙輸卵管在冬眠前的脂肪態(tài)分化與在此之前的細胞增殖從生殖內(nèi)分泌學(xué)角度的確認仍是空白，所以這也成為本項研究進一步深入考慮的問題。 對于中國林蛙輸卵管冬眠前期膨大的生理學(xué)研究所做甚少，然而，其巨大的經(jīng)濟價值和特殊的生理現(xiàn)象，使中國林蛙成為一個極具科學(xué)研究價值的野生兩棲動物的生殖生理模型。因此，本項研究以林蛙輸卵管發(fā)育的季節(jié)性進程為核心，探究不同生理因子對發(fā)育進程各個階段的調(diào)控影響。
