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基本信息

項目名稱:
中國林蛙蛙油形成機理的內(nèi)分泌學(xué)研究
小類:
生命科學(xué)
簡介:
林蛙油作為功效奇特的中藥材收錄于《中華人民共和國藥典》(2005年版),由我國長白山地區(qū)的中國林蛙冬眠前膨大的輸卵管曬干制成。本研究使用人工飼養(yǎng)的商品蛙為實驗動物,將中國林蛙輸卵管季節(jié)性發(fā)育進程作為關(guān)注點,首次從東北林蛙輸卵管冬眠前膨大發(fā)育的特殊生理現(xiàn)象出發(fā),以生殖內(nèi)分泌角度為切入點,探究輸卵管膨大的內(nèi)在調(diào)控機理,為林蛙油的開發(fā)與利用提供科學(xué)依據(jù)。
詳細介紹:
本研究采用解剖學(xué)觀察,形態(tài)學(xué)統(tǒng)計,組織學(xué)觀察,免疫印跡,免疫組織化學(xué)等方法,確認了: 冬眠前期輸卵管的增生是細胞增殖的結(jié)果; 原癌基因c-kit所表達的受體蛋白在冬眠前期表達強烈; 結(jié)論:中國林蛙輸卵管的發(fā)育呈現(xiàn)出明顯的季節(jié)性變化,管內(nèi)小葉中的基質(zhì)細胞在冬眠前期表現(xiàn)出強烈細胞增殖的現(xiàn)象,c-kit/SCF信號系統(tǒng)在輸卵管增生過程中發(fā)揮正向調(diào)控。

作品專業(yè)信息

撰寫目的和基本思路

申報者以生殖內(nèi)分泌學(xué)角度為切入點,欲探究輸卵管膨大的內(nèi)在調(diào)控機理,為林蛙油的開發(fā)與利用提供科學(xué)依據(jù)。 申報者從林蛙油形成的源頭出發(fā),以冬眠前形成蛙油的膨大輸卵管作為實驗?zāi)P停蒙成韺W(xué)方法,闡述蛙油形成的機理。

科學(xué)性、先進性及獨特之處

本研究采用解剖學(xué)觀察,形態(tài)學(xué)統(tǒng)計,組織學(xué)觀察,免疫印跡和免疫組織化學(xué)等現(xiàn)代生命科學(xué)的經(jīng)典研究手段,首次闡述中國林蛙輸卵管冬眠前膨大發(fā)育這一特殊生理現(xiàn)象的內(nèi)在調(diào)控機理,項目研究結(jié)果可服務(wù)于林蛙不斷發(fā)展的產(chǎn)業(yè)化需求。

應(yīng)用價值和現(xiàn)實意義

此項研究是林蛙生殖內(nèi)分泌學(xué)研究的基礎(chǔ)一環(huán),研究結(jié)果可為人工科學(xué)飼養(yǎng)中國林蛙、林蛙蛙油產(chǎn)量和質(zhì)量的提高以及林蛙可持續(xù)開發(fā)和利用提供科學(xué)的參考依據(jù)。

學(xué)術(shù)論文摘要

本項研究的目的是檢測c-kit受體蛋白在中國林蛙輸卵管冬眠前的免疫活性。研究中,冬眠前期輸卵管的組織學(xué)結(jié)構(gòu)得到了詳盡的觀察。為了確定輸卵管組織是否經(jīng)歷增殖,我們使用了增殖性細胞核抗原(PCNA)作為細胞增殖的標(biāo)記。輸卵管的組織切片利用多克隆兔源c-kit受體蛋白和增殖性細胞核抗原(PCNA)的抗血清通過卵白素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物法進行免疫學(xué)定位研究。輸卵管的總蛋白經(jīng)提取后用于免疫印跡分析。c-kit受體蛋白和增殖性細胞核抗原(PCNA)的免疫活性在冬眠前的輸卵管組織中得以確認。免疫印跡的分析也表明c-kit受體蛋白和增殖性細胞核抗原(PCNA)在冬眠前的輸卵管中存在印跡條帶。以上的實驗結(jié)果表明:c-kit受體蛋白對中國林蛙輸卵管的膨大發(fā)育產(chǎn)生調(diào)控作用。 關(guān)鍵詞:c-kit受體蛋白、輸卵管、中國林蛙

獲獎情況

論文投稿 論文已投稿到SCI源雜志《獸醫(yī)科學(xué)雜志》(The Journal of Veterinary Medical Science),并已接收發(fā)表,修改完畢即可正式發(fā)表。 學(xué)會發(fā)表 前期研究部分成果已成功發(fā)表在第44屆生殖生物學(xué)年會(美國,波特蘭,2011),雜志影響因子為3.469。 競賽獲獎 2011年第七屆北京林業(yè)大學(xué)“梁希杯”課外學(xué)術(shù)論文大賽一等獎 2010-2011年度第六屆首都六大高校生命科學(xué)論壇最佳創(chuàng)意獎

鑒定結(jié)果

此項研究從生殖內(nèi)分泌學(xué)角度揭示林蛙輸卵管異常發(fā)育形成蛙油這一特殊生理學(xué)現(xiàn)象的本質(zhì),項目研究運用了現(xiàn)代生物學(xué)技術(shù)手段,取得的結(jié)果真實可靠,部分結(jié)果投稿于SCI源雜志。

參考文獻

[1] 張穎才, 哈什蟆油[J]. 中藥通報, 1956. 2(5):205~207. [2] 陳國富,王立中等, 林蛙的開發(fā)利用價值. 特種經(jīng)濟動植物, 1999. 3:11. [3] 李東風(fēng),陳偉庭, 中國林蛙研究進展. 遼寧師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版), 2005. 28(1):92~93. [4] Daniel J. Bernard, S.C.C., and Teresa K. Woodruff, Mechanisms of Inhibin Signal Transduction. Recent Prog. Horm. Res., 2001. 56(417). [5] Sporn & AB Roberts. Heidelberg, S.-V.M.J., How cells read TGF-beta signals. Nature Reviews. Molecular and Cellular Biology, 2000 1: p. 169–178. [6] Hoggard, N., et al., Inhibin beta B expression in murine adipose tissue and its regulation by leptin, insulin and dexamethasone. J Mol Endocrinol, 2009. 43(4): p.171-7. [7] Kajsa Sjo¨holm , J.P., Theodore C. Lystig , Eva Jennische ,Teresa K. Woodruff , Bjo¨rn Carlsson , Lena M.S. Carlsson The expression of inhibin beta B is high in human adipocytes, reduced by weight loss, and correlates to factors implicated in metabolic disease. Biochemical and Biophysical Research Communications, 2006. 344 p. 1308–1314.

同類課題研究水平概述

中國林蛙的輸卵管呈現(xiàn)出季節(jié)性發(fā)育變化的特征:相對于其他時期,在9、10月份的冬眠前期,輸卵管經(jīng)歷了極其繁盛的膨大發(fā)育進程。然而,這種季節(jié)性發(fā)育在解剖學(xué)乃至生理學(xué)上的研究數(shù)據(jù)仍不夠深入,因此,從生殖生理學(xué)角度出發(fā),對中國林蛙輸卵管發(fā)育季節(jié)性變化的確認成為了本項研究的出發(fā)點。 冬眠是溫帶動物在與食物獲得局限性相偶聯(lián)的氣候惡劣時期所采取的一種主要生存策略。冬眠期,攝食和排泄隨代謝和體溫的下降而停止,為了保證在無攝食條件下繼續(xù)存活,能量必須在極短的冬眠前期以脂肪形式儲存在體內(nèi),導(dǎo)致了冬眠前的脂肪化。 中國林蛙是在生殖系統(tǒng)中表現(xiàn)出冬眠前的脂肪化——輸卵管脂肪化——也即林蛙在冬眠前期一個極短的時期內(nèi)將脂肪迅速儲存在生殖系統(tǒng)的輸卵管內(nèi)。另一方面,冬眠前輸卵管中高度形態(tài)建成的細胞來自于大量可形態(tài)發(fā)生細胞的分化,而細胞在此之前的增殖成為細胞形態(tài)發(fā)生的前提,也是輸卵管成熟發(fā)育始動階段的關(guān)鍵進程。因此,由于對中國林蛙輸卵管在冬眠前的脂肪態(tài)分化與在此之前的細胞增殖從生殖內(nèi)分泌學(xué)角度的確認仍是空白,所以這也成為本項研究進一步深入考慮的問題。 對于中國林蛙輸卵管冬眠前期膨大的生理學(xué)研究所做甚少,然而,其巨大的經(jīng)濟價值和特殊的生理現(xiàn)象,使中國林蛙成為一個極具科學(xué)研究價值的野生兩棲動物的生殖生理模型。因此,本項研究以林蛙輸卵管發(fā)育的季節(jié)性進程為核心,探究不同生理因子對發(fā)育進程各個階段的調(diào)控影響。
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