基本信息
- 項目名稱：
- 對位紅抗原的合成與多克隆抗體的制備及其在食品殘留中的檢測
- 小類：
- 生命科學
- 大類：
- 自然科學類學術(shù)論文
- 簡介：
- 現(xiàn)今社會食品安全是大家十分關(guān)注的，一些不法商販為了獲得利益濫用對位紅染色劑非法添加到食物之中。而這些對位紅物質(zhì)對人身體又十分巨大的危害，并且具有致癌作用。所以食品中對位紅的檢測是十分必要和緊迫的。
- 詳細介紹：
- 通過抗原合成、動物免疫、獲得具有高特異性的多克隆抗體，通過對抗體的特異性分析，為研制出對位紅試劑盒打好基礎(chǔ)。對于食品中對位紅的有效檢測和監(jiān)督管理，提升食品質(zhì)量安全，保障國民身體健康，維護社會穩(wěn)定。為我國食品安全，提供簡易，有效，低耗，低成本的檢測方法。
作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 對位紅屬于人工合成的偶氮類染料，其具有較強毒性的致癌物，因此應盡可能避免攝入這種物質(zhì)。雖然國家已明令禁止在食品中添加對位紅。但某些不法分子仍然使用這種致癌染色物添加到食品中謀取利益。因此，為了保證食品安全，建立快速方便的檢測對位紅免疫方法極為重要。
科學性、先進性及獨特之處
- 本研究采用混合酸酐法將對位紅與牛血清白蛋白偶聯(lián)制備免疫原，用合成的免疫原免疫新西蘭大白兔，制備出針對對位紅的多克隆抗體，并對其特性進行分析，進一步建立免疫分析法檢測食品中對位紅殘留。
應用價值和現(xiàn)實意義
- 由于對位紅具有致癌性，我國禁止將對位紅作為食品添加劑用于食品生產(chǎn)。但某些不法分子將其添加到食品中，提高食品感官度。因此，建立快速方便的檢測對位紅免疫方法極為重要。
學術(shù)論文摘要
- 對位紅屬于人工合成的偶氮類染料，結(jié)構(gòu)與蘇丹類色素類似，具有致癌致突變等作用，但因其具有顏色鮮亮，不易褪色等特點，不法分子將其添加到食品中，提高食品感官度，危害消費者健康。因此，建立快速的檢測對位紅免疫方法極為重要。本研究采用混合酸酐法將對位紅半抗原與陽離子化牛血清蛋白(cBSA)偶聯(lián)合成完全抗原，通過紫外分析偶聯(lián)物，完全抗原免疫動物，制備出抗對位紅多克隆抗體，通過間接競爭ELISA法對抗體特性分析，并建立對位紅酶聯(lián)免疫分析條件。結(jié)果完全抗原對位紅與蛋白偶聯(lián)比分別為14:1，對位紅多克隆抗體效價達到1×106，對位紅抗體與蘇丹紅I 的交叉反應率為97.8%，與其它蘇丹紅類染料的交叉反應率都低，應用抗體檢測對位紅在0.1ng/mL~1000ng/mL線性范圍最低檢測限為7.43 ng/mL。建立的間接競爭ELISA法檢測對位紅條件包被時間為2h，封閉時間1h，一抗競爭時間是45min，二抗反應時間為45min，底物作用時間為15min；四種樣品中對位紅平均回收率為102.65%。結(jié)果表明制備的抗對位紅多抗特異性強，免疫分析準確度和精密度均比較高，可用于檢測食品中的對位紅殘留。
獲獎情況
- 論文《對位紅抗原合成和多克隆抗體制備》已經(jīng)投在《中國農(nóng)學通報》
鑒定結(jié)果
- 無
參考文獻
- 葛寶坤,陳其勇,趙孔祥,高健會,王云鳳,劉旸,高效液相色譜法測定蛋黃中蘇丹I～IV及對位紅,中國國境衛(wèi)生檢疫雜志,2007,30(3) 劉國艷，柴春彥，葛宇，孫耀輝,食品中對位紅等禁用偶氮染料檢測方法研究進展,食品科學,2007,28(11)
同類課題研究水平概述
- 國外實驗室偶氮染料的檢測，則常采用液相、氣相色譜法或與質(zhì)譜聯(lián)用進行定性、定量；這些方法具有檢測精度高、靈敏、準確、穩(wěn)定等一系列優(yōu)點，但設備及檢測費用昂貴、操作復雜、分析時間長，不能實現(xiàn)現(xiàn)場檢測，限制了其推廣和應用，也給對位紅和甲苯胺紅的快速檢測和監(jiān)管帶來困難。國內(nèi)仍未有針對對位紅的檢測方法標準，對偶氮染料日常檢測主要參考蘇丹紅的方法標準（GB/T19681—2005），采用溶劑萃取，液相色譜測定。目前國內(nèi)檢測機構(gòu)用來檢測對位紅的方法主要是儀器法，如高效液相色譜法（HPLC），液相色譜法（LC），液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（LC-MS/MS），氣相色譜法等儀器方法，另外免疫測定法，電化學法，毛細管電泳法，層析技術(shù)等方法也逐漸應用于對位紅和蘇丹紅類色素的檢測中。
