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基本信息
- 項(xiàng)目名稱：
- 長爪沙鼠Willis環(huán)變異篩選的實(shí)驗(yàn)研究
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡介：
- 近40年來，國內(nèi)外均有論著報(bào)道長爪沙鼠無后交通動(dòng)脈，雙側(cè)頸總動(dòng)脈阻斷肯定造成大腦完全性缺血。為了觀察長爪沙鼠腦底動(dòng)脈Willis環(huán)的缺失程度，我們用橡膠血管鑄型劑對80只長爪沙鼠進(jìn)行了血管鑄型，發(fā)現(xiàn)18.75％的長爪沙鼠的Willis環(huán)發(fā)生變異，不同程度的具有后交通動(dòng)脈，結(jié)果有異于以上肯定。 為了對長爪沙鼠腦底動(dòng)脈Willis環(huán)變異進(jìn)行篩選，以保證用沙鼠作為大腦缺血模型是實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。選用長爪沙鼠８０只，采用Kirino法建立腦缺血模型，激光多普勒監(jiān)測腦血流，找出缺血時(shí)血流量異常的，應(yīng)用單寧酸-氯化鐵媒染法構(gòu)筑其椎基底動(dòng)脈供血區(qū)的微血管。結(jié)果顯示，雙側(cè)頸總動(dòng)脈被夾閉后，多數(shù)長爪沙鼠腦組織血流量迅速下降，大腦完全缺血；單寧酸-氯化鐵媒染法構(gòu)筑時(shí)，僅小腦血管顯色。13只沙鼠腦缺血30min時(shí)，腦血流量仍達(dá)基礎(chǔ)血流值的1－10％；小腦全部和大腦的部分區(qū)域的血管顯色，腦皮質(zhì)和海馬均由微血管顯色，證實(shí)存在后交通動(dòng)脈。激光多普勒證實(shí)單寧酸-氯化鐵媒染法能夠篩選出Willis環(huán)變異的沙鼠。因此，在整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，通過單寧酸-氯化鐵媒染法對所有沙鼠進(jìn)行篩選，剔除Willis環(huán)變異的沙鼠，不足的部分進(jìn)行補(bǔ)遺，再進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)，這樣可以保證研究結(jié)果更科學(xué)、真實(shí)、可靠
- 詳細(xì)介紹：
- 自1966年Levine發(fā)現(xiàn)長爪沙鼠缺乏完整的Willis環(huán)以來，國內(nèi)外均有報(bào)道長爪沙土鼠獨(dú)特的解剖學(xué)特征：頸內(nèi)動(dòng)脈系統(tǒng)和椎基底動(dòng)脈系統(tǒng)之間無后交通動(dòng)脈，不構(gòu)成完整的Willis環(huán)，雙側(cè)頸總動(dòng)脈阻斷后，肯定造成大腦完全性缺血，國內(nèi)外廣泛應(yīng)用此模型研究腦缺血損傷機(jī)制或藥物評價(jià)。但近年來有實(shí)驗(yàn)結(jié)果不甚理想，推測部分沙鼠Willis環(huán)有變異的可能。為了解長爪沙鼠后交通動(dòng)脈缺失情況，我們用橡膠血管鑄型劑觀察了其大腦血管構(gòu)筑，發(fā)現(xiàn)18.75%存在后交通動(dòng)脈。因此，為保證用沙鼠作為大腦完全性缺血模型時(shí)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的的準(zhǔn)確性和可靠性，必須重視沙鼠Willis環(huán)解剖結(jié)構(gòu)上的變異。 為進(jìn)一步驗(yàn)證Willis環(huán)的變異，我們還應(yīng)用單寧酸-氯化鐵媒染法對Willis環(huán)結(jié)構(gòu)變異進(jìn)行了篩選。結(jié)果發(fā)現(xiàn)80只沙鼠雙側(cè)頸總動(dòng)脈被夾閉后，有67只腦組織血流量迅速下降，血量接近于0，提示大腦缺血造模成功。有13只沙鼠夾閉頸總動(dòng)脈30min時(shí)，大腦組織血流量仍然大于基礎(chǔ)血流值的1％。對椎基底動(dòng)脈供血區(qū)進(jìn)行血管構(gòu)筑后，造模成功的僅有小腦的血管顯色，失敗者小腦全部、大腦部分區(qū)域的血管顯色。振蕩切片后，大腦皮質(zhì)和海馬均有微血管顯示，證實(shí)有后交通動(dòng)脈存在。本研究提示，應(yīng)用沙鼠做大腦完全性缺血模型時(shí)，應(yīng)用單寧酸-氯化鐵法觀察大腦微血管構(gòu)筑，以剔除Willis環(huán)存在變異的沙鼠，可使研究結(jié)果更科學(xué)、可靠。
作品圖片
作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 目的：通過觀察長爪沙鼠腦底動(dòng)脈Willis環(huán)解剖結(jié)構(gòu)，對其變異進(jìn)行篩選，以保證其作為大腦缺血模型時(shí)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。 基本思路：建立長爪沙鼠大腦缺血模型，應(yīng)用激光多普勒技術(shù)觀察夾閉雙側(cè)頸總動(dòng)脈后，腦組織是否存在血流，再用單寧酸-氯化鐵媒染血管法對比。將Willis環(huán)變異的沙鼠篩選出來，以保證應(yīng)用其作為大腦缺血模型時(shí)實(shí)驗(yàn)的可靠性。
科學(xué)性、先進(jìn)性及獨(dú)特之處
- 科學(xué)性：為長爪沙鼠大腦缺血模型可靠性提供依據(jù)。 先進(jìn)性：通過微血管構(gòu)筑從解剖學(xué)上分析長爪沙鼠的Willis環(huán)類型、變異方式；以激光多普勒與單寧酸-氯化鐵媒染法對比，指出有后交通動(dòng)脈的沙鼠夾閉雙側(cè)頸總動(dòng)脈后腦組織仍有血流，僅無后交通動(dòng)脈的沙鼠才能成功建立大腦缺血模型。 效益性：為篩選出腦底動(dòng)脈Willis環(huán)變異的沙鼠提供方法，為育出適于建立大腦缺血模型的沙鼠提供科學(xué)依據(jù)。
應(yīng)用價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義
- 1．Willis環(huán)變異會(huì)導(dǎo)致大腦缺血模型不全缺血，造成實(shí)驗(yàn)結(jié)果誤差，得出錯(cuò)誤結(jié)論。篩除Willis環(huán)變異的長爪沙鼠，可保證其作為腦缺血模型時(shí)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。 2．用單寧酸-氯化鐵媒染法既能顯示W(wǎng)illis環(huán)變異，又不影響后續(xù)各種實(shí)驗(yàn)（如免疫組織化學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)等）檢測。 3. 可節(jié)省人力、物力。
學(xué)術(shù)論文摘要
- 目的：通過觀察長爪沙鼠腦底動(dòng)脈Willis環(huán)解剖結(jié)構(gòu)，篩選并剔除Willis環(huán)變異的沙鼠，以保證其作為大腦缺血模型時(shí)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。 方法：夾閉長爪沙鼠雙側(cè)頸總動(dòng)脈，建立大腦缺血模型，用激光多普勒監(jiān)測大腦組織血流，找出仍有血流量存在的沙鼠，應(yīng)用單寧酸-氯化鐵媒染法觀察大腦Willis環(huán)是否有變異，經(jīng)切片證實(shí)存在交通支及其分支的供血區(qū)仍有血流通暢的微血管。 結(jié)果：夾閉雙側(cè)頸總動(dòng)脈后，多數(shù)長爪沙鼠腦組織血流量迅速下降，大腦完全性缺血。單寧酸-氯化鐵媒染時(shí)， Willis環(huán)未見后交通支或其它分支，大腦血管幾乎不顯色；有13只沙鼠在缺血30min時(shí)，缺血區(qū)血流量仍達(dá)1-10％，Willis環(huán)可見不同類型的變異，部分區(qū)域大腦皮質(zhì)血管顯色，有的海馬區(qū)血管也有顯色。證實(shí)存在后交通動(dòng)脈或其它分支。 結(jié)論：單寧酸-氯化鐵媒染顯示大腦微血管構(gòu)筑，能夠有效篩選出存在Willis環(huán)變異的長爪沙鼠。從而保證其作為大腦缺血模型時(shí)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
獲獎(jiǎng)情況
- 1.挑戰(zhàn)杯2009xx省大學(xué)生課外學(xué)術(shù)科技作品競賽 特等獎(jiǎng)（證書未發(fā)）。 2.xxx，xxx，xxx長爪沙鼠Willis環(huán)解剖學(xué)觀察.承德醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2008, 25(4):445-446. 3.xxx,xxx,xxx,xxx,xx,xxx.長爪沙鼠Willis環(huán)變異篩選及應(yīng)用. 投往2009年8月在山東煙臺(tái)召開的中國解剖學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)會(huì)；解剖科學(xué)進(jìn)展,已錄用,待發(fā)表。
鑒定結(jié)果
- 本作品應(yīng)用激光多普勒技術(shù)和單寧酸-氯化鐵媒染法，篩選出Willis環(huán)變異的長爪沙鼠。為其作為大腦缺血模型時(shí)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性提供科學(xué)依據(jù)，節(jié)省人力、物力資源。
參考文獻(xiàn)
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同類課題研究水平概述
- 近40年來，國內(nèi)外均有論著報(bào)道長爪沙鼠具有獨(dú)特的解剖學(xué)特征，沒有聯(lián)系頸內(nèi)動(dòng)脈系統(tǒng)和椎基底動(dòng)脈系統(tǒng)的后交通動(dòng)脈，不能構(gòu)成完整的腦底動(dòng)脈Willis環(huán)。故雙側(cè)頸總動(dòng)脈阻斷肯定造成大腦完全性缺血。 腦缺血?jiǎng)游锬Ｐ褪茄芯磕X血管病損傷機(jī)理和防治不可缺少的工具，制作接近人類缺血性腦卒中的理想動(dòng)物模型一直是人們普遍關(guān)注的問題。由于長爪沙鼠具有獨(dú)特的腦血管遺傳特征，沒有后交通動(dòng)脈，前交通支約有1/3缺乏或纖細(xì)，不易把血液從基底動(dòng)脈運(yùn)送到大腦，當(dāng)阻斷雙側(cè)頸總動(dòng)脈時(shí)，可造成雙側(cè)大腦半球的完全性缺血。因此，用簡單的結(jié)扎雙側(cè)頸總動(dòng)脈即可獲得比大鼠、小鼠更加典型的接近人類急性腦缺血?jiǎng)游锬Ｐ停粐鴥?nèi)外廣泛應(yīng)用。但近年來發(fā)現(xiàn)部分沙鼠存在后交通支完整和部分完整型的變異現(xiàn)象。為了保證研究的科學(xué)性、可靠性，國內(nèi)、外有的學(xué)者對此進(jìn)行了研究，試圖找出前后交通支缺失和腦缺血之間的關(guān)聯(lián)，但至今尚無有效的方法剔除存在變異的長爪沙鼠。
