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基本信息
- 項(xiàng)目名稱：
- 菲律賓蛤仔糖蛋白提取及體外抗腫瘤活性研究
- 來(lái)源：
- 第十二屆“挑戰(zhàn)杯”省賽作品
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡(jiǎn)介：
- 以菲律賓蛤仔肉為研究對(duì)象，提取某糖蛋白，將該糖蛋白作用于前列腺癌細(xì)胞DU-145進(jìn)行體外藥物敏感性實(shí)驗(yàn), 結(jié)果表明菲律賓蛤仔具有潛在的抗腫瘤作用。
- 詳細(xì)介紹：
- 以菲律賓蛤仔肉為研究對(duì)象，水提醇沉，Sevag法除蛋白，DEAE-Sepharose FF陰離子交換層析柱分離純化，Sephadex G-25凝膠柱除鹽，得到1種白色組分，紅外顯示該組分具有糖蛋白的一般吸收特征。將該糖蛋白作用于前列腺癌細(xì)胞DU-145進(jìn)行體外藥物敏感性實(shí)驗(yàn), 結(jié)果顯示, 0.1 mol/L 氯化鈉溶液的洗脫峰組分對(duì)DU-145細(xì)胞具有明顯增殖抑制作用, 最適作用濃度約為25 mg/mL，表明菲律賓蛤仔具有潛在的抗腫瘤作用。
作品專業(yè)信息
撰寫(xiě)目的和基本思路
- 目的：通過(guò)對(duì)菲律賓蛤仔提取物糖蛋白對(duì)前列腺癌細(xì)胞DU-145進(jìn)行體外藥物敏感性實(shí)驗(yàn)，研究菲律賓蛤仔的潛在的抗腫瘤作用。 基本思路：先從菲律賓蛤仔中提取糖蛋白，再通過(guò)離子交換層析柱，進(jìn)行階段洗脫，用紫外檢測(cè)蛋白峰，同時(shí)檢測(cè)糖峰，收集峰值洗脫液，用Sephadex G-25凝膠柱除鹽，冷凍干燥。再考察純化后的電泳行為。采用苯酚-硫酸法、紫外和紅外光譜對(duì)糖蛋白理化性質(zhì)分析，最后進(jìn)行活性測(cè)定。
科學(xué)性、先進(jìn)性及獨(dú)特之處
- 科學(xué)性、先進(jìn)性：近年來(lái)，隨著海洋藥物的深入研究發(fā)現(xiàn)了海洋軟體動(dòng)物體內(nèi)常存在著許多具有藥用價(jià)值的特殊生理活性物質(zhì)。該實(shí)驗(yàn)正是選擇這種充滿研究潛力的材料極具科學(xué)性和先進(jìn)性。 獨(dú)特之處：該實(shí)驗(yàn)并非采用一般實(shí)驗(yàn)室常用的透析方法來(lái)脫鹽，而是選擇凝膠過(guò)濾層析，該方法可通過(guò)紫外和電導(dǎo)檢測(cè)器監(jiān)控整個(gè)層析過(guò)程、產(chǎn)品的純度和回收率,又可連續(xù)自動(dòng)進(jìn)樣和收集樣品,自動(dòng)化程度高,容易放大，操作簡(jiǎn)便易行,脫鹽效果可靠。
應(yīng)用價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義
- 目前我國(guó)腫瘤的發(fā)病率及死亡率僅次于心血管疾病，越來(lái)越受到醫(yī)學(xué)界的重視。最新研究表明，菲律賓蛤仔提取物具有抗腫瘤、改善癥狀、延長(zhǎng)病人生命、提高免疫力、抗動(dòng)脈粥樣硬化等作用。PCa在男性泌尿、生殖系統(tǒng)惡性腫瘤中發(fā)病率躍居第三位。由于PCa癌癥患者長(zhǎng)期化療損害重要臟器，且會(huì)產(chǎn)生腫瘤耐藥性，影響化療效果，在預(yù)防和治療上還沒(méi)有更好的方法和手段。因此，目前關(guān)于抗前列腺癌藥物制劑的開(kāi)發(fā)和應(yīng)用成為了研究熱點(diǎn)。
學(xué)術(shù)論文摘要
- 以菲律賓蛤仔肉為研究對(duì)象，水提醇沉，Sevag法除蛋白，DEAE-Sepharose FF陰離子交換層析柱分離純化，Sephadex G-25凝膠柱除鹽，得到1種白色組分，紅外顯示該組分具有糖蛋白的一般吸收特征。將該糖蛋白作用于前列腺癌細(xì)胞DU-145進(jìn)行體外藥物敏感性實(shí)驗(yàn), 結(jié)果顯示, 0.1 mol/L 氯化鈉溶液的洗脫峰組分對(duì)DU-145細(xì)胞具有明顯增殖抑制作用, 最適作用濃度約為25 mg/mL，表明菲律賓蛤仔具有潛在的抗腫瘤作用。
獲獎(jiǎng)情況
- 還未發(fā)表
鑒定結(jié)果
- 無(wú)
參考文獻(xiàn)
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同類課題研究水平概述
- 近年來(lái)，隨著海洋藥物的深入研究發(fā)現(xiàn)了許多結(jié)構(gòu)新穎、生理活性特殊的物質(zhì)。特別是海洋軟體動(dòng)物，因其特殊的生活環(huán)境和代謝方式體內(nèi)常存在著許多具有藥用價(jià)值的特殊生理活性物質(zhì)。美國(guó)的Luesch等人自海洋藻青菌 Symploca sp.和海兔Dolabella auricularia中分離得到了抗腫VP642，具有很強(qiáng)的抗腫瘤活性。從海洋微生物 L .majuscula中分離得到的生物活性多肽已被證明具有HIV-1整合酶的酶抑制劑功能。此外，從日本的蒂殼海綿屬海綿動(dòng)物中分離到的雜環(huán)多肽，對(duì)鼠白血病細(xì)胞具有強(qiáng)細(xì)胞毒性。海洋生物抗腫瘤多肽還具有活性高、穩(wěn)定性好等特點(diǎn)。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，約10%的海洋動(dòng)物提取的化合物具有抗腫瘤活性，3.5%的海洋植物提取物具有抗腫瘤和細(xì)胞毒性。 目前雖然已經(jīng)證明多糖在體內(nèi)和體外均可以顯著促進(jìn)細(xì)胞免疫和體液免疫以及明顯抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移,但是一些關(guān)鍵問(wèn)題如多糖為何會(huì)選擇性抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)而不影響正常細(xì)胞生長(zhǎng)及其抗腫瘤機(jī)制等仍未完全研究清楚。此外 ,如何解決多糖類藥物血液清除速度快、 口服給藥利用度差的問(wèn)題 ,以及建立合理、公認(rèn)的評(píng)價(jià)模型來(lái)證明多糖類藥物的安全性和有效性 ,這些都是今后的研究方向。因此 ,今后的工作不應(yīng)該局限于資源的挖掘和粗提物的生理活性實(shí)驗(yàn)方面 ,而應(yīng)該在以往研究較少、 挑戰(zhàn)性較強(qiáng)的糖組學(xué)構(gòu)效關(guān)系等方面有所突破 ,為日后糖庫(kù)的建立及糖芯片的研發(fā)提供堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。 最新研究表明，菲律賓蛤仔提取物具有抗腫瘤、改善癥狀、延長(zhǎng)病人生命、提高免疫力、抗動(dòng)脈粥樣硬化等作用。糖蛋白廣泛存在于生物體內(nèi)，是蛋白質(zhì)和糖類的共價(jià)復(fù)合物，具有很多重要功能。它既是激素、凝集素、酶、毒素、病毒和細(xì)菌等的識(shí)別點(diǎn)，也是細(xì)胞表面抗原、糖分化抗原和癌發(fā)育抗原，在細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程中具有十分重要的作用，目前從生物體內(nèi)提取糖蛋白并測(cè)定其抗腫瘤活性的文獻(xiàn)已有大量報(bào)道。本研究經(jīng)離子交換和凝膠層析等方法分離純化出具有較強(qiáng)活性的糖蛋白，并對(duì)其化學(xué)結(jié)構(gòu)及體外對(duì)人腫瘤細(xì)胞的增殖抑制活性進(jìn)行了初步研究。
