基本信息
- 項目名稱：
- 乳蛋白中抗氧化肽獲取的新方法
- 小類：
- 生命科學
- 大類：
- 自然科學類學術(shù)論文
- 簡介：
- 本研究利用木瓜蛋白酶對酪蛋白水解并對所得到的水解物進行類蛋白反應修飾，制備高活性抗氧化肽。通過對所得到的水解物進行類蛋白反應酶法修飾，利用響應面分析法對類蛋白反應條件進行優(yōu)化。
- 詳細介紹：
- 本研究利用木瓜蛋白酶對酪蛋白水解并對所得到的水解物進行類蛋白反應修飾，制備高活性抗氧化肽。通過對所得到的水解物進行類蛋白反應酶法修飾，利用響應面分析法對類蛋白反應條件進行優(yōu)化。本研究的具體結(jié)果如下： （1）利用木瓜蛋白酶對酪蛋白進行水解，以水解度和抗氧化活性為指標，研究了不同水解反應時間(1h-5h)所得到的水解產(chǎn)物對抗氧化活性的影響，并進行了水解條件的優(yōu)化，得到獲得抗氧化活性較好的酪蛋白水解物的條件為：酶添加量為500 U/g酪蛋白、溫度45℃、酪蛋白濃度5%、反應時間2 h，其水解度（DH）為10%。 （2）采用木瓜蛋白酶進行類蛋白反應，對類蛋白反應酶法修飾前后的產(chǎn)物進行研究。研究了類蛋白反應中底物濃度、反應溫度和時間等反應條件對游離氨基含量的影響。利用響應面分析法對酪蛋白水解物的類蛋白反應修飾條件進行選擇與優(yōu)化，以其游離氨基含量變化為響應值，可以得出了游離氨基減少量（Y）與底物濃度（X1）、反應溫度（X2）和時間（X3）等因素關系的二次回歸方程，優(yōu)化的修飾條件組合為類蛋白反應修飾適宜條件是為：酶添加量為500 U?g-1水解物，溫度30℃，底物濃度50%，反應時間5.6 h。 （3）由于在響應面的實驗設計中，中心點的條件與通過計算得到的最適宜的類蛋白反應條件幾乎是一致的。 （4）本研究中，修飾產(chǎn)物對DPPH的清除能力表現(xiàn)他們在濃度為100 g/mL時的IC50 值從215 g/mL到266 g/mL.而他們對ABTS?+的清除能力則表現(xiàn)為當他們濃度為100 g/mL時，TEAC 值從15 μmol/g 酪蛋白 到 17 μmol/g 酪蛋白以及他們的 IC50 值從 471 g/mL到539 g/mL。
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作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 利用酶修飾手段，改善乳中酪蛋白產(chǎn)物的抗氧化活性；采用水解和其逆反應（類蛋白反應）進行研究。
科學性、先進性及獨特之處
- 國內(nèi)外對酪蛋白水解以及其抗氧化肽的相關研究，目前多考慮各種水解條件的選擇，以求制備高活性的抗氧化肽。本研究所采用的兩步方法抗氧化肽制備技術(shù)與其相比，新穎性在于進一步利用類蛋白反應來提高酪蛋白水解物的抗氧化活性，這一處理手段在文獻中尚未發(fā)現(xiàn)。
應用價值和現(xiàn)實意義
- 抗氧化與衰老是人們一直關注的熱點，提供一種能大大提高酪蛋白產(chǎn)物的抗氧化活性的技術(shù)手段是很急需的，作品為進一步生產(chǎn)其他抗氧化產(chǎn)品或其他生物活性的產(chǎn)品提供有力的依據(jù)。
學術(shù)論文摘要
- 采用木瓜蛋白酶對酪蛋白進行水解，得到抗氧化活性較好的酪蛋白水解物，并以水解物為底物在木瓜蛋白酶作用下進行類蛋白反應制備高活性酪蛋白抗氧化肽。酪蛋白水解時酶添加量為500 U/g酪蛋白、溫度45℃、底物濃度5%、反應時間2 h。利用響應面分析法得到類蛋白反應的最優(yōu)條件為：酶添加量為500 U/g水解物、溫度30℃，底物濃度50%、作用時間5.5 h。毛細管電泳結(jié)果確認，類蛋白反應后抗氧化肽的組成情況發(fā)生變化?？寡趸钚苑治龇椒ㄟM行評價結(jié)果表明，所制備出的抗氧化肽對兩種自由基的清除能力顯著提高，表明抗氧化活性與類蛋白反應有關。
獲獎情況
- 吳丹，趙新淮，李鐵晶.酪蛋白水解物的酶法修飾優(yōu)化與抗氧化活性改善.農(nóng)業(yè)機械學報（EI）．發(fā)表于2009年11期 吳丹，趙新淮.高抗氧化活性的酪蛋白水解物的新法制備.食品科學.已接受 發(fā)明專利《高活性酪蛋白抗氧化肽的兩步法制備技術(shù)》，申請?zhí)枺?00910071495.6
鑒定結(jié)果
參考文獻
- 1.酶水解技術(shù) 2.酶修飾（類蛋白反應技術(shù)） 3.毛細管電泳技術(shù) 4.光譜技術(shù) 5.自由基清除 6.游離氨基酸測定 7.凍干技術(shù)
同類課題研究水平概述
- 本研究采用兩步法制備高活性抗氧化肽。利用類蛋白反應并篩選出適宜的反應條件，對酪蛋白水解后得到的產(chǎn)物——抗氧化肽進行進一步修飾，提高酪蛋白水解物的抗氧化活性，并且利用毛細管電泳技術(shù)對類蛋白反應產(chǎn)物進行表征。 與已發(fā)表的類似論文或相關內(nèi)容論文的區(qū)別：國內(nèi)外對酪蛋白水解的相關研究，以及對酪蛋白抗氧化肽的研究，目前多考慮蛋白酶、溫度、時間、pH、濃度等各種水解條件的選擇，以求制備高活性的抗氧化肽。本研究所采用的兩步方法抗氧化肽制備技術(shù)與其相比，新穎性在于進一步利用類蛋白反應來提高酪蛋白水解物的抗氧化活性，這一處理手段在文獻中尚未發(fā)現(xiàn)。同時，利用毛細管電泳對類蛋白反應產(chǎn)物的分析，也未見國內(nèi)外的研究報道。
