基本信息
- 項目名稱：
- 青天葵對內毒素致急性肺損傷大鼠肺水通道蛋白1和5表達影響
- 小類：
- 生命科學
- 大類：
- 自然科學類學術論文
- 簡介：
- 急性肺損傷的發(fā)病機制復雜，但目前尚未完全闡明。內毒素性急性肺損傷的病理特征為通透性肺水腫，此前較多認為急性肺損傷所致的肺水腫是肺毛細血管內皮細胞和肺泡上皮細胞屏障的通透性增高所致，而對肺水通道蛋白（AQPs）的作用認識不足，AQPs對肺水腫的形成和消除具有重要意義。 青天葵清熱解毒，散淤消腫，對ALI具有保護作用，在此基礎上，我們首次探討單味中藥青天葵對急性肺損傷AQPs-1和5表達的影響并闡述其作用機制。 實驗結果表明，青天葵預先給藥能減輕內毒素致大鼠急性肺損傷，其保護機理與青天葵通過促進肺AQP-1和AQP-5的蛋白表達水平上調，增加肺泡水清除率和轉運肺內液體，調節(jié)水平衡有關。
- 詳細介紹：
- ALI的發(fā)病機制與炎癥介質、蛋白表達和酶的活性有關，但目前尚未完全闡明。通透性肺水腫是內毒素性ALI的主要病理特征，此前較多認為發(fā)生通透性肺水腫主要是肺毛細血管內皮細胞和肺泡上皮細胞屏障的通透性增高所致，定位于對炎癥介質及細胞因子的研究，而對肺水通道蛋白的作用認識不足。AQPs具有增加細胞膜水通透力，快速轉運液體的功能，AQP1主要參與肺間質內液體的轉運發(fā)揮作用，AQP-5作用主要是清除肺泡腔內水份。在AQPs清除和轉運肺水的過程中，AQP-1和AQP-5起主要作用，對肺水腫的形成和消除具有重要意義。 ALI是臨床較常見的危重病，西醫(yī)主要依賴于支持性治療，缺乏常規(guī)、療效明確藥物治療，中醫(yī)藥治療ALI有一定優(yōu)勢。青天葵清熱解毒，散淤消腫，藥用價值高，在研究發(fā)現(xiàn)青天葵對ALI具有保護作用，可阻抑炎癥反應，減少肺水含量的基礎上，本研究擬通過觀察肺組織病理及肺濕/干重比值綜合評價ALI模型，在保證成功造模的前提下，采用免疫組化及PCR的方法首次探討單味中藥青天葵預先給藥對急性肺損傷肺水通道蛋白1和5表達的影響，以明確青天葵對ALI的治療作用及闡述其作用機理。 實驗結果表明，青天葵預先給藥能有效改善肺水腫狀態(tài)，減輕內毒素致急性肺損傷，其保護機理與青天葵通過促進肺AQP-1和AQP-5的蛋白表達水平上調，增加肺泡水清除率和轉運肺內液體，調節(jié)水平衡有關。
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作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 目的：通過內毒素誘導的ALI模型，觀察青天葵預先給藥對AQPs-1和5表達的影響，從調節(jié)水蛋白通道方面闡明其作用機制。 基本思路：通透性肺水腫作為ALI的病理特征，其肺水腫的程度與ALI的預后呈正相關，AQPs對肺水腫的形成和消除意義重大。青天葵對ALI有保護作用，本研究擬通過建立穩(wěn)定的ALI模型，采用免疫組化及PCR的方法探討青天葵對ALI肺水通道蛋白1和5的調節(jié)效應及其作用機制。
科學性、先進性及獨特之處
- 1.內毒素致ALI的模型穩(wěn)定，綜合評價肺病理及肺水含量能保證造模成功。 2.ALI病理機制復雜，此前研究對AQPs的作用認識不足。本課題打破常規(guī)，從調節(jié)AQPs的角度進行研究。 3.西醫(yī)缺乏治療ALI的有效藥物，中醫(yī)藥治療有優(yōu)勢。 4.單味青天葵研究ALI，可避免中藥復方制劑作用靶點分散，機制不透徹等問題。 5．青天葵的藥用價值高，文獻報道少。本研究首次探討青天葵對AQPs的調節(jié)效應。
應用價值和現(xiàn)實意義
- 中醫(yī)藥治療ALI療效明確，對其機制的研究，可為治療ALI的臨床應用提供更全面的實驗基礎；其次，篩選療效較明確的單藥，是當前研究的熱點，尋找新的、安全有效的治療ALI的藥物具有重要的經濟和社會意義。 青天葵臨床應用廣泛，目前相關文獻報道少，尤其是青天葵對ALI的治療作用及機制方面。本研究在早期發(fā)現(xiàn)其治療ALI療效確切的基礎上，探討其作用機制，有助于指導臨床用藥，充分發(fā)揮青天葵藥用價值。
學術論文摘要
- 目的:通過觀察青天葵預先給藥對內毒素致急性肺損傷(ALI)大鼠肺水通道蛋白-1和5(AQP-1、AQP-5)表達的影響，探討其保護作用機制。方法：SD大鼠24只隨機分為正常組（A組）、青天葵預保護組（B組）、內毒素模型組（C組），每組各8只。采用舌底靜脈注射內毒素（5mg/kg），復制急性肺損傷模型，青天葵組預先給藥處理，造模8h后HE染色觀察肺組織病理學的改變，檢測肺濕／干重比(W／D)觀察肺臟水通透性的變化，免疫組化法及RT-PCR法分析肺組織AQP-1、AQP-5表達的變化。結果：與內毒素模型組相比，青天葵預保護組及正常組肺濕／干重比值明顯降低(P<0.05)，青天葵預保護組的肺水腫病理改變明顯減輕，青天葵預保護組AQP-1、AQP-5的蛋白表達水平升高(P<0.05)。結論：青天葵預先給藥可能通過促進ALI大鼠肺AQP-1和AQP-5的表達上調，增加清除和轉運肺水，改善水液代謝，減輕肺水腫狀態(tài)，從而有效保護急性肺損傷。
獲獎情況
- 無
鑒定結果
- 無
參考文獻
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同類課題研究水平概述
- ALI是臨床危重病癥，內毒素是常見致病因素，肺毛細血管內皮細胞損傷和細胞屏障破壞導致通透性肺水腫是其主要的病理特征。 水通道蛋白是與水通透性有關的細胞膜轉運蛋白，它的發(fā)現(xiàn)揭示了水跨膜轉運調節(jié)的機制，擴展了人們對水平衡調節(jié)的認識。 目前在肺臟表達定位比較明確的是AQP-1、3、4、5。肺水轉運，AQP-1和5起主要作用。例如李波等利用內毒素誘導小鼠ALI，采用PCR、免疫組化和Western印跡法觀察，認為AQP-1和5在調節(jié)肺內液體平衡中起到明顯作用，而AQP-3和4不參與肺水腫的形成。AQPs在ALI中作用的研究目前主要集中在AQP-1和5。 肺水腫以肺泡和肺間質內液體積聚為特點，發(fā)生時必然伴有水液的清除跟轉運紊亂，水通道蛋白調節(jié)功能的改變。例如Towne J E發(fā)現(xiàn)ALI時，AQP-1和5的表達下降減少了肺水腫時機體清除過多水腫液的能力，從而加重肺泡和間質水腫。 AQPs可選擇性地通透水分子，介導水分子跨膜轉運，調節(jié)肺水平衡。發(fā)生ALI時，AQPs表達或功能的下降，導致水液代謝平衡失調，產生肺水腫。 ALI的病死率高。目前，西醫(yī)主要是依賴于支持性治療；由于ALI急性起病，病情進展迅速的特點，藥物研究集中于對ALI的預防及早期治療，糖皮質激素、白三烯制劑等也有一定的治療作用，但均存在局限性，療效不滿意的現(xiàn)象。目前西醫(yī)尚缺乏治療ALI常規(guī)的、療效明確藥物。 中醫(yī)認為ALI的病機關鍵在于邪毒內侵，傷及內臟，氣血運行受阻，氣機逆亂，脈絡瘀滯，治宜清熱解毒、活血化瘀、通里攻下為主。研究表明，大黃通過抑制細胞因子的產生和釋放，減輕ALI的炎癥反應；大承氣湯、血必凈等中藥復方在ALI的防治研究中也取得了一定的成果。 但由于ALI病理機制的復雜性，此前多認為ALI發(fā)生通透性肺水腫主要是由于血管內皮細胞受損所致，上述的西藥及中醫(yī)藥研究集中在觀察藥物對炎癥反應的阻抑效應，而對肺水通道蛋白在ALI過程中所發(fā)揮的調節(jié)水平衡的作用不夠重視，從肺水通道蛋白的調節(jié)作用進行相關藥理實驗的研究報道較少。 青天葵清熱解毒，散淤消腫，在立足于早期發(fā)現(xiàn)青天葵對ALI有保護作用的前提下，采用免疫組化及PCR的方法觀察單藥青天葵對ALI肺水通道蛋白1和5表達的調節(jié)效應，闡述其治療作用及其機理，有助于為臨床治療ALI提供新途徑，充分發(fā)揮青天葵的藥用價值。
