基本信息
- 項目名稱：
- 清咽滴丸及六種成分提取物體外抗柯薩奇病毒B3,B5作用的研究
- 小類：
- 生命科學
- 大類：
- 自然科學類學術論文
- 簡介：
- 本課題主要通過對清咽滴丸（Qingyan Diwan）及其六種成分（甘草，訶子，青黛，冰片，薄荷，人工牛黃）抗柯薩奇病毒B3和B5(Coxsackie virus B3, B5; CVB3, CVB5)的體內(nèi)外研究，探索祖國中醫(yī)藥的抗病毒療效及機理。前期細胞學試驗和血清藥理學研究表明清咽滴丸、甘草和訶子能抗CVB3、 CVB5。說明甘草和訶子是清咽滴丸抗柯薩奇病毒的主藥。
- 詳細介紹：
- 本課題旨在研究清咽滴丸及甘草、訶子、薄荷、冰片、青黛、（人工）牛黃提取物對 Vero 細胞的毒性作用，以及其抗柯薩奇病毒B3、B5(Coxsackie virus B3, B5; CVB3, CVB5)的作用和機理。擴大清咽滴丸及其六種中藥成分的應用范圍。通過對中藥的抗病毒作用進行科學研究，增加祖國中藥材的藥用景。 （1）體外細胞試驗：通過體外培養(yǎng)Vero細胞，將細胞用柯薩奇病毒B3，B5分別感染，再用各種濃度藥液接種被感染細胞，觀察藥物毒性和病毒致細胞病變效應（Cytopathic effect, CPE）,用MTT法輔助檢測細胞活性情況，檢驗藥物的毒性和各藥物的抗病毒效應。 （2）血清藥理學試驗：用血清藥理學的方法驗證有效藥物（甘草，訶子和清咽滴丸）的生物學活性。具體方法為：大鼠禁食12h，經(jīng)胃灌服適宜濃度藥液，灌藥前及灌藥后每隔20min采血一次，連續(xù)多次，將含藥血清分類編號，分別處理后配制成細胞生長液，用于治療被柯薩奇病毒感染后的Vero細胞。觀察細胞病變情況，用MTT法輔助檢測細胞活性情況，了解經(jīng)動物吸收代謝后的含甘草、訶子和清咽滴丸活性成分的血清的抗病毒效果，從而進一步了驗證三者抗柯薩奇病毒的可能性。提示有效藥物抗病毒效果符合動物藥代藥動學特點。 （3）重復上述試驗 結(jié)果，前期細胞學試驗和血清藥理學研究表明清咽滴丸、甘草和訶子能抗CVB3、 CVB5。說明甘草和訶子是清咽滴丸抗柯薩奇病毒的主藥。
作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 目的： 研究清咽滴丸及甘草、訶子、薄荷、冰片、青黛、牛黃提取物對 Vero 細胞的毒性作用，以及其抗柯薩奇病毒B3、B5的作用和機理。擴大清咽滴丸及其六種中藥成分的應用范圍。 思路： （1）體外細胞試驗 （2）血清藥理學試驗
科學性、先進性及獨特之處
- （1）本課題中所用材料——清咽滴丸、甘草、訶子、青黛、冰片、薄荷、牛黃——抗柯薩奇病毒B3、B5的療效，國內(nèi)外均無報道，本課題為首次報道。 （2）血清藥理學：該方法用于研究中藥及中成藥藥理作用在之前并沒有被廣泛使用，而且用該法來研究藥物抗病毒作用尚無報道。
應用價值和現(xiàn)實意義
- （1）增加清咽滴丸的適用范圍，為其擴大臨床應用提供了實驗依據(jù)，有利于其國際注冊與出口。 （2）增加甘草和訶子的藥理作用，輔助祖國中藥材的科學研究。 （3）為由柯薩奇病毒引起的各種疾病的治療提供新的思路，特別是小兒病毒性心肌炎，柯薩奇病毒性糖尿病，皰疹性咽峽炎等 。 （4）總之：經(jīng)濟效益較大
學術論文摘要
- 清咽滴丸（Qingyan Diwan）為新型主治咽炎的中藥合劑，其主要成分為人工牛黃、甘草、青黛、冰片、訶子、薄荷腦。具有疏風清熱，解毒利咽，消腫止痛的功效，臨床效果顯著?，F(xiàn)代藥理學研究表明，清咽滴丸有很強的抑菌殺菌作用，尤其是對白色念球菌和金黃色葡萄球菌。劉劍對清咽滴丸抗常見呼吸道病毒的實驗研究提示，清咽滴丸能在細胞水平上直接抑制 HSV-1 和 ADV11 。 柯薩奇病毒 B3、B5 已證明是無菌性腦炎、流行性胸痛、糖尿病、成人病毒性心肌炎等的主要病原體之一。隱性感染的孕婦常有胎膜早破的現(xiàn)象。孕婦顯性感染柯薩奇B3、B5可致胎兒畸形、宮內(nèi)感染、腦膜炎、新生兒心肌炎等。其中新生兒病毒性心肌炎致死率極高，是新生兒死亡的重要原因之一。1993年，曾報道沈陽某婦幼保健所發(fā)生一起新生兒醫(yī)院內(nèi)感染CVB3、CVB5，至少有8名嬰兒死于病毒性心肌炎所導致的多器官功能衰竭。目前尚無特效藥介入治療或預防。鑒于各種抗病毒西藥毒副作用較大,本文以 Vero 細胞作為體外篩選細胞模型，探討清咽滴丸及六種主要中藥成分對 CVB3,B5 的作用。
獲獎情況
- 無
鑒定結(jié)果
- 該作品具有真實性、創(chuàng)新性，為申報者獨立設計及完善，結(jié)果可信。
參考文獻
- [1] 胡樹春,吳紅敏,徐英.新生兒柯薩奇病毒感染死亡病例臨床及病理分析[J].中國醫(yī)科大學學報，1994，23（5）：482-483. [2] 王亞峰，張美英,等.苦丁茶水提物體外抗柯薩奇病毒B3活性的實驗研究[J].中華中醫(yī)藥雜志,2008，23（11）：976-978. [3] 趙欣，楊毅恒.含丹參、甘草、大黃的中成藥與西藥配伍的處方分析[J] .中國藥房,2008,19(36):2878-2880. [4] 衛(wèi)文峰，張國成,等. 柴胡，黃岑，炙甘草對小鼠CVB3心肌炎治療作用的研究[J].中國當代兒科雜志,2003，5(3)：223—225. [5] 蔡小華，謝兵,等.訶子化學成分及藥理作用的研究進展[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學,2008,36(25):10938-10941. [6] 賀石林，李元建．醫(yī)學科研方法學[M]．北京：人民軍醫(yī)出版社，2003，411-420
同類課題研究水平概述
- 柯薩奇病毒B3，B5是正鏈RNA病毒，屬小RNA病毒科，腸道病毒屬，主要通過糞-口途徑傳播，也可通過呼吸道或眼部粘膜感染。柯薩奇病毒B組共有6個血清型，B組病毒感染乳鼠可產(chǎn)生局灶性炎癥，引起痙攣性麻痹，并常伴有心肌炎、腦炎和棕色脂肪壞死等。CVB3 是病毒性心肌炎的主要病原體，病毒持續(xù)感染可導致擴張型心肌病。CVB5可以引起病毒性肝炎，持續(xù)感染可誘發(fā)肝硬化、肝癌。 清咽滴丸為新型主治咽炎的中藥合劑，其主要成分為人工牛黃、甘草、青黛、冰片、訶子、薄荷腦。具有疏風清熱，解毒利咽，消腫止痛的功效，臨床效果顯著?，F(xiàn)代藥理學研究表明，清咽滴丸有很強的抑菌殺菌作用，尤其是對白色念球菌和金黃色葡萄球菌。劉劍對清咽滴丸抗常見呼吸道病毒的實驗研究提示，清咽滴丸能在細胞水平上直接抑制 HSV-1 和 ADV11 。 甘草歸脾、胃、心、肺經(jīng)，具有補脾益氣、祛痰止咳、調(diào)和諸藥的功效，同時還有調(diào)節(jié)機體免疫力、抗菌、抗病毒的作用，尤其是在治療感冒及止咳藥物中應用極為普遍。有實驗推測其原因為甘草具有腎上腺皮質(zhì)激素作用，可消炎、抗變態(tài)反應?？共《镜闹饕钚猿煞譃楦什萏鹚睾透什荻嗵?，既可直接清除病毒顆粒，又可能誘生干擾甘草中黃酮類化合物中抗菌成分較多，作用較強。其對革蘭陽性菌中的金黃色葡萄球菌和枯草桿菌的抑制作用相當于鏈霉索；對酵母菌和真菌的作用高于鏈霉素；對革蘭陰性菌中的大腸桿菌和綠膿桿菌抑制作用相當于鏈霉素 。體外實驗表明，甘草可抑制杜氏利什曼原蟲和碩大利什曼原蟲的體前鞭毛和無鞭毛的生長 訶子味苦、酸、澀，性平而微溫，主要入肺經(jīng)和大腸經(jīng)。澀腸斂肺，降火利咽，用于久瀉久痢，便血，肺虛喘咳，久嗽不止，咽痛音啞。研究發(fā)現(xiàn)，訶子體外對多種細菌和病毒有抑制作用，如痢疾桿菌、淋球菌、金葡萄、表皮葡萄球菌、腸球菌、肺炎克雷伯菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、幽門螺桿菌、白色念珠球菌和耐藥表皮菌等，以及乙肝病毒（HBV）、對阿昔洛韋耐藥的I型單純性皰疹病毒和u型單純性皰疹病毒等。 目前，尚無人系統(tǒng)的研究清咽滴丸、甘草、訶子抗柯薩奇病毒的研究，于是我們著意于此，進行了部分深入淺出的實驗，以期豐富清咽滴丸、甘草及訶子的藥理作用，為治療柯薩奇病毒導致的各種疾病提供新的治療思路。
