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基本信息
- 項(xiàng)目名稱：
- 兒茶素抗萬(wàn)古霉素異質(zhì)性耐藥葡萄球菌活性研究
- 來(lái)源：
- 第十二屆“挑戰(zhàn)杯”省賽作品
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡(jiǎn)介：
- 本課題率先將獲國(guó)家專利的兒茶素用于h-VRS抗菌活性研究，證實(shí)兒茶素類對(duì)h-VRS均有一定抗菌作用，EGCG、EGC與苯唑西林聯(lián)合對(duì)h-VRS抗菌活性呈相加作用，且ECG可通過(guò)抑制h-VRS產(chǎn)生PBP2a來(lái)逆轉(zhuǎn)其對(duì)萬(wàn)古霉素的耐藥性。這些研究結(jié)論對(duì)于得到具有抗萬(wàn)古霉素耐藥性葡萄球菌致病性的有效物質(zhì)，進(jìn)而開發(fā)出用于萬(wàn)古霉素耐藥性葡萄球菌感染的新藥，增加抵御MRS感染新的防線具有重大意義。
- 詳細(xì)介紹：
- 本實(shí)驗(yàn)旨在研究?jī)翰杷仡悓?duì)異質(zhì)性耐萬(wàn)古霉素葡萄球菌（h-VRS）的體外抗菌活性；觀察兒茶素與苯唑青霉素有無(wú)協(xié)同作用；探討兒茶素沒食子酸酯（ECG）對(duì)異質(zhì)性耐萬(wàn)古霉素葡萄球菌（h-VRS）耐藥性的體外逆轉(zhuǎn)作用。采用含4μg/ml萬(wàn)古霉素腦心浸液瓊脂篩選h-VRS，菌譜分析法確證h-VRS菌株；微量肉湯稀釋法分別測(cè)定兒茶素類三種成分（ECG、EGCG、EGC）單獨(dú)對(duì)h-VRS的MIC值；微量肉湯稀釋法測(cè)定苯唑西林對(duì)h-VRS的MIC值；棋盤稀釋法觀察EGCG和EGC聯(lián)合苯唑西林對(duì)h-VRS的協(xié)調(diào)抗菌情況；青霉素結(jié)合蛋白(PBP2a)膠乳凝集試劑盒檢測(cè)ECG 對(duì)PBP2a生成的抑制效力等試驗(yàn)方法，證實(shí)兒茶素類對(duì)h-VRS均有一定抗菌作用，EGCG、EGC與苯唑西林聯(lián)合對(duì)h-VRS抗菌活性呈相加作用，且ECG可通過(guò)抑制h-VRS產(chǎn)生PBP2a來(lái)逆轉(zhuǎn)其對(duì)萬(wàn)古霉素的耐藥性。這些研究結(jié)論對(duì)于得到具有抗萬(wàn)古霉素耐藥性葡萄球菌致病性的有效物質(zhì)，進(jìn)而開發(fā)出用于萬(wàn)古霉素耐藥性葡萄球菌感染的新藥，增加抵御MRS感染新的防線具有重大意義。
作品圖片
作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 目的：研究?jī)翰杷仡悓?duì)h-VRS的體外抗菌活性，探討ECG對(duì)h-VRS耐藥性的體外逆轉(zhuǎn)作用。 基本思路：含4μg/ml萬(wàn)古霉素腦心浸液瓊脂篩選h-VRS，菌譜分析法確證h-VRS菌株；微量肉湯稀釋法測(cè)定ECG、EGCG、EGC及苯唑西林單獨(dú)對(duì)h-VRS的MIC值；棋盤稀釋法觀察EGCG和EGC聯(lián)合苯唑西林對(duì)h-VRS的協(xié)調(diào)抗菌情況；PBP2a膠乳凝集試劑盒檢測(cè)ECG對(duì)PBP2a生成的抑制效力。
科學(xué)性、先進(jìn)性及獨(dú)特之處
- 本課題率先將獲國(guó)家專利的兒茶素用于h-VRS抗菌活性研究，證實(shí)兒茶素類對(duì)h-VRS均有一定抗菌作用，EGCG、EGC與苯唑西林聯(lián)合對(duì)h-VRS抗菌活性呈相加作用，且ECG可通過(guò)抑制h-VRS產(chǎn)生PBP2a來(lái)逆轉(zhuǎn)其對(duì)萬(wàn)古霉素的耐藥性。國(guó)內(nèi)尚未見兒茶素對(duì)抗萬(wàn)古霉素耐藥性葡萄球菌抗菌活性的報(bào)道。這些研究結(jié)論對(duì)于得到具有抗萬(wàn)古霉素耐藥性葡萄球菌致病性的有效物質(zhì)具有重大意義。
應(yīng)用價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義
- 目前，萬(wàn)古霉素是治療耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的最后一道防線，一旦最后一道防線被突破，人類的健康將會(huì)面臨巨大威脅。本研究證實(shí)兒茶素對(duì)h-VRS有抑菌作用，EGCG、EGC與苯唑西林聯(lián)合對(duì)h-VRS抗菌活性呈相加作用，且ECG可抑制h-VRS產(chǎn)生PBP2a來(lái)逆轉(zhuǎn)其對(duì)萬(wàn)古霉素的耐藥性。表明兒茶素是具有抗異質(zhì)性耐萬(wàn)古霉素葡萄球菌（h-VRS）致病性的有效物質(zhì)，可開發(fā)用于萬(wàn)古霉素耐藥性葡萄球菌感染的新藥。
學(xué)術(shù)論文摘要
- 目的：研究?jī)翰杷仡悓?duì)異質(zhì)性耐萬(wàn)古霉素葡萄球菌的體外抗菌活性，ECG對(duì)異質(zhì)性耐萬(wàn)古霉素葡萄球菌（h-VRS）耐藥性的體外逆轉(zhuǎn)作用。方法：4μg/ml萬(wàn)古霉素腦心浸液瓊脂篩選h-VRS，菌譜分析法確證h-VRS菌株。觀察ECG、EGCG、EGC單獨(dú)對(duì)h-VRS的體外抗菌活性，棋盤稀釋法觀察EGCG和EGC聯(lián)合苯唑西林對(duì)h-VRS的協(xié)調(diào)抗菌情況。青霉素結(jié)合蛋白膠乳凝集試劑盒檢測(cè)ECG 對(duì)PBP2a生成的抑制效力。結(jié)果：兒茶素類三種成分對(duì)h-VRS原代和子代株均顯示有抗菌活性，h-VRS原代菌株MIC為128-512μg/ml，子代菌株MIC值為256-512μg/ml，EGCG、EGC聯(lián)合苯唑西林對(duì)h-VRS協(xié)調(diào)作用的部分抑菌濃度指數(shù)：FIC為 0.52-0.75。ECG對(duì)h-VRS產(chǎn)生PBP2a有顯著抑制作用。結(jié)論： 兒茶素類對(duì)h-VRS均有一定抗菌作用，且h-VRS 子代菌株的敏感性明顯降低，EGCG、EGC與苯唑西林聯(lián)合對(duì)h-VRS抗菌活性呈相加作用， ECG對(duì)h-VRS.產(chǎn)生PBP2a有顯著抑制作用。關(guān)鍵詞：h-VRS；兒茶素；抗菌；兒茶素沒食子酸酯；逆轉(zhuǎn)作用 ；青霉素結(jié)合蛋白
獲獎(jiǎng)情況
- “兒茶素類對(duì)h-VRS的體外抗菌活性研究”，已被《中國(guó)抗生素》錄用，并將于2011年8月期刊登。
鑒定結(jié)果
- 情況屬實(shí)
參考文獻(xiàn)
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同類課題研究水平概述
- 近年來(lái)，隨著廣譜抗菌藥物的大量使用，耐甲氧西林葡萄球菌呈迅速上升趨勢(shì)，現(xiàn)臨床已經(jīng)把萬(wàn)古霉素當(dāng)做治療MRS嚴(yán)重全身感染的首選藥物和經(jīng)驗(yàn)用藥，但在用藥中，臨床某些MRS菌株由于繼續(xù)突變或基因轉(zhuǎn)移從而出現(xiàn)異質(zhì)性耐萬(wàn)古霉素葡萄球菌和萬(wàn)古霉素中介或耐藥葡萄球菌，從而導(dǎo)致臨床治療葡萄球菌感染的失敗。目前在我國(guó)尚沒有檢出萬(wàn)古霉素中介或耐藥葡萄球菌，但已檢出h-VRS，且占一定的比例。 自第一株h-VRSA的發(fā)現(xiàn)以來(lái)，許多學(xué)者開始對(duì)h-VRSA進(jìn)行了研究，其中包括對(duì)其檢測(cè)方法、耐藥機(jī)制、生物學(xué)特性、致病性的研究，但是至今為止有關(guān)萬(wàn)古霉素異質(zhì)性耐藥金葡菌產(chǎn)生的確切機(jī)制尚不清楚，一直未見天然活性單體用于h-VRSA的抗菌活性研究。在研究領(lǐng)域，葡萄球菌對(duì)萬(wàn)古霉素的耐藥性監(jiān)測(cè)和有效治療方法的研究，越來(lái)越受到醫(yī)學(xué)工作者的重視。目前，鮮有兒茶素類對(duì)h-VRS菌株抗菌活性的研究報(bào)道。 h-VRS是造成臨床萬(wàn)古霉素治療感染失敗的重要原因之一， h-VRS檢測(cè)的方法主要有K-B法、瓊脂及肉湯稀釋法、菌譜分析法、萬(wàn)古霉素聯(lián)合β-內(nèi)酰胺類抗生素快速篩選法、E-試驗(yàn)法。目前，菌譜分析法仍然是檢測(cè)h-VRS的參考方法。 中醫(yī)認(rèn)為，綠茶性苦寒，具清熱解毒、去火降暑、利尿消炎、消毒殺菌和止渴生津之功效。其主要成分為茶多酚、茶多糖、茶色素、茶皂素和咖啡因。茶多酚主要由兒茶素類、黃酮類、花色素類、酚酸類等4類物質(zhì)組成。兒茶素類主要包括兒茶素、表兒茶素沒食子酸酯、表沒食子兒茶素沒食子酸酯、表沒食子兒茶素。國(guó)內(nèi)外有文獻(xiàn)報(bào)道，兒茶素中3個(gè)成分與β-內(nèi)酰胺類抗生素對(duì)MRSA有協(xié)同抗菌作用分別為ECG、EGCG和聚兒茶素酯A。 金葡菌有5種青霉素結(jié)合蛋白（PBPs），其中PBP2和PBP4與萬(wàn)古霉素耐藥相關(guān)，Moreira等發(fā)現(xiàn)，體外誘導(dǎo)的VRSA的PBP2產(chǎn)量增加，并且與萬(wàn)古霉素MIC增加呈正相關(guān)。國(guó)內(nèi)最新研究認(rèn)為，VRSA對(duì)萬(wàn)古霉素產(chǎn)生耐藥可能是因?yàn)镻BP2含量增多或PBP4含量減少甚至丟失引起外膜的通透性下降，萬(wàn)古霉素難以透過(guò)細(xì)胞壁發(fā)揮效應(yīng)作用，因而產(chǎn)生耐藥。研究表明，綠茶提取物ECG、EGC、EGCG具有抑制VISA生長(zhǎng)的作用，其中，具有抑制PBP2a的活性的主要成分是ECG+EGCG，未見ECG對(duì)h-VRS抗藥性逆轉(zhuǎn)作用方面的報(bào)道。
