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基本信息
- 項(xiàng)目名稱：
- 同步熒光技術(shù)6-TG探針測定生物樣品中蛋白質(zhì)
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡介：
- 在最佳實(shí)驗(yàn)條件下，HSA-6-TG體系的同步熒光峰出現(xiàn)在約310nm處，而且同步熒光強(qiáng)度與HSA濃度在0.69~552.0μg?mL-1的范圍成正比。線性相關(guān)系數(shù)為0.9994。檢測限可達(dá)0.133μg?mL-1。 據(jù)其靈敏度高，光譜簡化，譜帶窄化，能避免不同的干擾影響的優(yōu)點(diǎn)，建立了以6-TG為分子探針，測定人血清、唾液和尿液等生物樣品中的蛋白質(zhì)含量的新方法。
- 詳細(xì)介紹：
- 硫鳥嘌呤是一種具有廣泛生物活性的核苷藥物中間體，具有抗癌、抗病毒活性。它對(duì)于急性淋巴白血病和其他的腫瘤都有顯著的療效。該方法在藥理學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)及化學(xué)方面都有重要意義和研究價(jià)值。 在本實(shí)驗(yàn)中，同步熒光技術(shù)用于測定人體樣品中的HSA， 掃描HSA-6-TG體系的同步熒光光譜。固定6-TG的濃度，同步熒光強(qiáng)度與人血清白蛋白的濃度呈正比。因此，這種使用6-TG為分子探針的同步熒光技術(shù)測定人體體液(血清、尿樣、唾液)中蛋白質(zhì)的方法，結(jié)果令人滿意。在最佳實(shí)驗(yàn)條件下，6-TG可以與HSA形成復(fù)合物，當(dāng)HSA濃度增加時(shí)，同步熒光強(qiáng)度也相應(yīng)增強(qiáng)。結(jié)果表明此方法簡單，快速，靈敏度高和線性范圍寬，可成功用于測定人血清、尿液和唾液樣品中的蛋白含量。
作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 撰寫的目的：因同步熒光法具眾多優(yōu)點(diǎn)。以6-TG為分子探針應(yīng)用同步熒光光譜技術(shù)來測定蛋白含量。 基本思路：在最佳實(shí)驗(yàn)條件下，6-TG可與HSA形成復(fù)合物，當(dāng)HSA濃度增加，同步熒光強(qiáng)度也相應(yīng)增強(qiáng)。結(jié)果表明此方法可成功用于測定人血清、尿液和唾液樣品中的蛋白含量
科學(xué)性、先進(jìn)性及獨(dú)特之處
- 同步掃描熒光測定具有使光譜簡化、譜帶窄化、減小光譜的重疊現(xiàn)象和減小散射光的影響的優(yōu)點(diǎn)，操作簡便、試劑不玷污器壁、靈敏度高、重現(xiàn)性好、線性范圍寬和測定結(jié)果可靠等優(yōu)點(diǎn)，可直接用于生物樣品中蛋白質(zhì)總量的測定。
應(yīng)用價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義
- 蛋白質(zhì)與營養(yǎng)代謝、細(xì)胞結(jié)構(gòu)、酶、激素、病毒、免疫、遺傳等密切相關(guān)。其定量研究更是臨床中諸如惡性腫瘤、糖尿病、腎功能衰退、肝硬化、結(jié)核病、外科手術(shù)等許多疾病診斷不可缺少的內(nèi)容。因此具有很大的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義。
學(xué)術(shù)論文摘要
- 以硫鳥嘌呤為分子探針的同步熒光技術(shù)，已經(jīng)應(yīng)用于測定體液中的人血清蛋白。在最佳實(shí)驗(yàn)條件下，HSA-6-TG體系的同步熒光峰出現(xiàn)在約310nm處，而且同步熒光強(qiáng)度與HSA濃度在0.69至552.0μg?mL-1的范圍成正比。線性相關(guān)系數(shù)為0.9994。檢測限可達(dá)0.133μg?mL-1。據(jù)此，建立了以6-TG為分子探針，測定人血清、唾液和尿液等生物樣品中的蛋白質(zhì)含量的新方法。在人體液樣品分析中，平行測定的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.55至3.31%，回收率可達(dá)96.17至105.0%。
獲獎(jiǎng)情況
- 無
鑒定結(jié)果
- 本作品建立了6-TG為分子熒光探針同步熒光技術(shù)測定蛋白質(zhì)的新方法。該方法具有操作簡便、靈敏度高、測定結(jié)果可靠等優(yōu)點(diǎn)，可直接用于生物樣品(血清、尿樣、唾液)中蛋白質(zhì)總量的測定。該方法技術(shù)居國內(nèi)領(lǐng)先水平。
參考文獻(xiàn)
- 同步熒光技術(shù) R.P. Jia, L.J. Dong, Q.F. Li, X.G. Chen, Z.D. Hu, A highly sensitive assay for protein with dibromochloro-arsenazo-Al3+ using resonance light scattering technique and its application, Talanta 57 (2002) 693-700. O.H. Lowry, N.J. Rosebrough, A.L. Farr, R.J. Ranjall, J. Biol. Chem. 193 (1951) 265. M.M. Bradford, Anal. Biochem. 72 (1976) 248. F.L. Rodkey, Clin. Chem. 11 (1965) 478. Q.G. Liao, Y.F. Li, C.Z. Huang, Talanta. 71 (2007) 567–572.
同類課題研究水平概述
- 蛋白質(zhì)化學(xué)是生命科學(xué)研究的前沿領(lǐng)域。蛋白質(zhì)與營養(yǎng)代謝、細(xì)胞結(jié)構(gòu)、酶、激素、病毒、免疫、物質(zhì)運(yùn)載、遺傳等密切相關(guān)。研究蛋白質(zhì)與小分子作用的形式及機(jī)理，利用小分子探針定量分析蛋白質(zhì)是生物化學(xué)和其它生物學(xué)科、食品檢驗(yàn)、診斷疾病、臨床醫(yī)學(xué)、藥物化學(xué)等領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)之一。血清白蛋白是動(dòng)物和人體血漿中最重要的載體蛋白，是血漿中最重要的蛋白質(zhì)，其定量研究更是臨床中諸如惡性腫瘤、糖尿病、腎功能衰退、肝硬化、結(jié)核病、外科手術(shù)等許多疾病診斷不可缺少的內(nèi)容。因此開展其分析測定方法及其臨床方面的研究，有著非常重要的現(xiàn)實(shí)和發(fā)展意義。目前測定蛋白質(zhì)含量的方法有多種，常用的經(jīng)典方法有Lowery法、Bradford法、溴酚藍(lán)法、溴甲酚綠法等，但這些方法或靈敏度較低、或線性范圍窄、或存在較強(qiáng)的吸附作用；近來又建立了一些測定蛋白質(zhì)的新方法如分光光度法、熒光光度法、共振光散射法、化學(xué)發(fā)光法和電化學(xué)法。其中熒光光度法，由于具有簡單、快速、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)而備受關(guān)注。同步掃描熒光測定具有使光譜簡化、譜帶窄化、減小光譜的重疊現(xiàn)象和減小散射光的影響的優(yōu)點(diǎn)，已成功應(yīng)用與多組分的同時(shí)測定和生物分子的分析研究中。本作品建立了6-TG為分子熒光探針同步熒光技術(shù)測定蛋白質(zhì)的新方法。該方法具有操作簡便、試劑不玷污器壁、靈敏度高、重現(xiàn)性好、線性范圍寬和測定結(jié)果可靠等優(yōu)點(diǎn)，可直接用于生物樣品(血清、尿樣、唾液)中蛋白質(zhì)總量的測定。該方法技術(shù)居國內(nèi)領(lǐng)先水平。
