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基本信息

項(xiàng)目名稱:
毛細(xì)管電泳法測(cè)定葛根中的葛根素、大豆苷、大豆苷元和蘆丁的含量
小類:
能源化工
簡(jiǎn)介:
通過(guò)實(shí)驗(yàn),可找出超聲法提取葛根中葛根素、大豆苷、大豆苷元和蘆丁的最佳條件(包括提取溶劑、溫度、時(shí)間、功率等)以及毛細(xì)管電泳法分離測(cè)定葛根中以上成分的最佳條件(包括緩沖體系的組成、濃度、pH值、分離溫度、分離電壓、檢測(cè)波長(zhǎng)等),建立起超聲提取-毛細(xì)管電泳法分離測(cè)定葛根中有效成分的方法,并對(duì)葛根中的有效成分進(jìn)行測(cè)定。
詳細(xì)介紹:
中藥葛根為豆科植物野葛及干葛藤的干燥根,具有解肌退熱、生津止渴、透疹、升陽(yáng)止瀉、活血療瘡和解酒等功效,可用于治療外感發(fā)熱頭痛、項(xiàng)強(qiáng)、口渴、麻疹不透、熱痢、泄瀉、高血壓、高血糖等癥[1,2]。葛根中有豐富的黃酮類和異黃酮類化合物,如葛根素、大豆苷和大豆苷元等。其中,葛根素是一種被臨床證明的安全、有效的治療缺血性心臟病及腦血管微循環(huán)障礙的藥物,可用于治療冠心病、心絞痛、心肌梗死、視網(wǎng)膜動(dòng)靜脈阻塞、突發(fā)性耳聾等疾病[3];大豆苷具有抗癌、防治心血管疾病、抗病毒及保肝等作用[4-8], 可抑制S180、YAC - 1和P815細(xì)胞的DNA合成, 并對(duì)人紅白血病細(xì)胞系K562及YAC-1細(xì)胞有明顯的細(xì)胞毒作用[9]; 大豆苷元具有雌激素和抗雌激素樣作用、抗腫瘤、抗骨質(zhì)疏松、抗氧化、保護(hù)心腦血管、提高機(jī)體免疫力及影響內(nèi)分泌系統(tǒng)等多種藥理作用[10];蘆丁則具有抗炎、抗病毒、抗癌、清除自由基和維生素P樣作用,可用于糖尿病、高血壓、腦溢血的輔助治療, 是很有潛力的抗癌化合物[11]。建立簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確地測(cè)定葛根素、大豆苷、大豆苷元和蘆丁的分析方法有一定的現(xiàn)實(shí)意義。

作品專業(yè)信息

撰寫目的和基本思路

中藥葛根中有豐富的黃酮類和異黃酮類化合物,如葛根素、大豆苷和大豆苷元等,是葛根的活性成分。葛根具有抗癌、抗炎、抗病毒、抗骨質(zhì)疏松、抗氧化、提高機(jī)體免疫力及保肝等作用,是一種被臨床證明的安全、有效的治療缺血性心臟病及腦血管微循環(huán)障礙的藥物,可用于治療冠心病、心絞痛、心肌梗死、視網(wǎng)膜動(dòng)靜脈阻塞、突發(fā)性耳聾等疾病,還可用于治療外感發(fā)熱頭痛、項(xiàng)強(qiáng)、口渴、麻疹不透、等癥。

科學(xué)性、先進(jìn)性及獨(dú)特之處

毛細(xì)管電泳法由于具有快速、高效、分辨率高、分離模式多、樣品和試劑消耗量少等優(yōu)點(diǎn),被廣泛用于復(fù)雜樣品中各組分的分離分析中。用超聲提取-毛細(xì)管電泳法同時(shí)分離測(cè)定葛根中的葛根素、大豆苷、大豆苷元和蘆丁的含量目前尚未見(jiàn)報(bào)道,所建立的方法簡(jiǎn)便、快速、靈敏度高、準(zhǔn)確度好,且操作費(fèi)用低,環(huán)保,在12min內(nèi)實(shí)現(xiàn)了葛根中4種有效活性成分的分離測(cè)定。

應(yīng)用價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義

所建立的方法對(duì)中藥葛根的質(zhì)量控制有重要的意義,也可以將其推廣到葛根中成藥及其制劑中有效活性成分的分離測(cè)定中。

學(xué)術(shù)論文摘要

建立了高效毛細(xì)管電泳同時(shí)分離和檢測(cè)葛根中葛根素、大豆苷、大豆苷元和蘆丁含量的方法,考察了緩沖溶液pH 值、工作電壓、溫度等對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響。以30mmol.L-1硼酸-30mmol.L-1硼砂-20mmol.L-1SDS溶液(pH=8.65)為背景電解質(zhì),工作電壓19 KV, 分離溫度19℃, 檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm,上述四組分在12min內(nèi)完全分離。葛根素、大豆苷、大豆苷元和蘆丁的濃度與峰面積分別在 1. 0~1350 mg.L-1、2. 0~1400mg.L-1、0.7~1200 mg.L-1和0.8~1300 mg.L-1 范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系,檢出限分別為0.1608、0.1734、0.1452、0.2454 mg.L-1。

獲獎(jiǎng)情況

無(wú)

鑒定結(jié)果

無(wú)

參考文獻(xiàn)

1]呂元琦 ,李新民 ,袁倬斌. 毛細(xì)管膠束電動(dòng)色譜法快速測(cè)定葛根素和大豆甙元[J].化學(xué)工程師, 2005, (1):28-32. [2]羅奇志,戴開(kāi)金,馬安德, 等. 葛根芩連湯及微丸中葛根素、大豆苷元的HPCE分析[J].藥物分析雜志,2004,24(1): 11- 13. [3]孫立華,胡永明,鄒德祿, 等.高效毛細(xì)管電泳法測(cè)定葛根及其制劑腦得生片中葛根素的含量[J]. 中國(guó)藥學(xué)雜志,2000,35(10): 694- 696.

同類課題研究水平概述

國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)葛根及其制劑中有效活性成分的測(cè)定,目前多限于單一成分或2~3種成分。用高效液相色譜法測(cè)定常常需要使用有毒的甲醇或乙腈流動(dòng)相,且分析時(shí)間較長(zhǎng),滿晨等[1] 以C18 為色譜柱, 以甲醇∶水( 25∶75) 為流動(dòng)相,用高效液相色譜法在30min內(nèi)測(cè)定了葛根中葛根素的含量;何建濤等[2] 以C18 為色譜柱, 以乙腈-和0. 02 mol/L 磷酸二氫鉀為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫,在30min內(nèi)測(cè)定了心可舒片中葛根素和大豆苷元的含量;用薄層色譜法測(cè)定也需要使用有毒的甲醇等展開(kāi)劑[3];用分光光度法,只能測(cè)定單一組分的含量,且選擇性欠佳[4];毛細(xì)管電泳法由于具有快速、高效、分辨率高、分離模式多、樣品和試劑消耗量少等優(yōu)點(diǎn),被廣泛用于復(fù)雜樣品中各組分的分離分析中。孫立華等[5]用毛細(xì)管電泳法測(cè)定了葛根及其制劑腦得生片中葛根素的含量。呂元琦[6] 和羅奇志[7]等分別用毛細(xì)管膠束電動(dòng)色譜和毛細(xì)管區(qū)帶電泳法快速測(cè)定了葛根、葛根芩連片和葛根芩連湯及微丸中葛根素和大豆甙元的含量。而用毛細(xì)管電泳同時(shí)分離和檢測(cè)葛根中葛根素、大豆苷、大豆苷元和蘆丁的含量尚未見(jiàn)報(bào)道,我們建立的分離分析方法具有簡(jiǎn)便、快速、靈敏度高、準(zhǔn)確度好、操作費(fèi)用低且環(huán)保的優(yōu)點(diǎn),對(duì)葛根及其制劑的質(zhì)量評(píng)價(jià)及進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用有一定的借鑒作用。
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