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基本信息
- 項目名稱：
- 贛南臍橙衰退病快速檢測技術(shù)研發(fā)及發(fā)生率調(diào)查研究
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡介：
- 本項目研制和優(yōu)化針對贛南臍橙衰退病具有專一性、實用性的快速檢測技術(shù)體系，運用研制的快速檢測技術(shù)調(diào)查贛南臍橙衰退病的發(fā)生情況。并能在病害發(fā)生早期有效的檢測出病害的存在和發(fā)生發(fā)展情況，為生產(chǎn)上危險性病害的早期預(yù)防提供了有效的檢測手段，具有重要的生產(chǎn)實際意義
- 詳細介紹：
- 贛南已經(jīng)成為世界上最大的臍橙主產(chǎn)區(qū)，在生產(chǎn)中存在危險性病害的威脅，特別是衰退病，嚴重的制約著產(chǎn)業(yè)的進一步發(fā)展，甚至帶來毀滅性的危害。本項目研制和優(yōu)化針對贛南臍橙衰退病具有專一性、實用性的直接組織點免疫法（DTBIA）和反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)(RT-PCR)的快速檢測技術(shù)體系，運用研制的快速檢測技術(shù)調(diào)查贛南臍橙衰退病的發(fā)生情況及感染率調(diào)查。進一步運用限制性片段長度多態(tài)性（RFLP）技術(shù)對贛南臍橙上感染的柑橘衰退病毒（CTV）株系進行了組群分析。為病害的深入研究、早期檢測和防控技術(shù)的制定奠定基礎(chǔ)。
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作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 目前江西贛南是世界上最大的臍橙集中產(chǎn)區(qū)，生產(chǎn)中存在著衰退病的嚴重威脅，造成巨大的經(jīng)濟損失，制約著產(chǎn)業(yè)的進一步發(fā)展。本研究以贛南臍橙高效安全生產(chǎn)為目標(biāo)，研制和優(yōu)化針對贛南臍橙衰退病具有專一性、實用性的快速檢測技術(shù)體系，運用研制的快速檢測技術(shù)調(diào)查贛南臍橙衰退病的發(fā)生情況，為病害的深入研究和防控技術(shù)的制定奠定基礎(chǔ)。
科學(xué)性、先進性及獨特之處
- 科學(xué)性：本研究優(yōu)化血清學(xué)快速檢測方法，使其經(jīng)濟、簡單易行，適合贛南臍橙產(chǎn)區(qū)衰退病的快速檢測，設(shè)計臍橙衰退病的特異性、專一性引物；優(yōu)化PCR擴增參數(shù)，獲得最佳的擴增條件和最好的檢測靈敏度，各方面的研究均具有相關(guān)的科學(xué)依據(jù)。 先進性：建立的針對贛南臍橙產(chǎn)區(qū)衰退病的快速檢測技術(shù)達到國內(nèi)先進水平；系統(tǒng)調(diào)查贛南臍橙產(chǎn)業(yè)上衰退病的發(fā)生情況和危害程度等研究成果屬國內(nèi)領(lǐng)先水平。
應(yīng)用價值和現(xiàn)實意義
- 贛南臍橙是贛南農(nóng)民脫貧致富的重要支柱產(chǎn)業(yè)。實際生產(chǎn)中存在危險性病害的威脅，特別是衰退病，嚴重的制約著產(chǎn)業(yè)的進一步發(fā)展。本項目以贛南臍橙高效安全生產(chǎn)為目標(biāo)，重點解決贛南臍橙衰退病的血清學(xué)和PCR快速檢測技術(shù)，通過研制的快速檢測技術(shù)對田間病害發(fā)生危害情況進行調(diào)查研究，掌握贛南臍橙衰退病發(fā)生的情況及危害程度，制定科學(xué)有據(jù)的防控措施，提升臍橙衰退病的防控水平，確保臍橙產(chǎn)業(yè)安全健康發(fā)展具有重要的戰(zhàn)略意義。
學(xué)術(shù)論文摘要
- 江西贛南是我國臍橙最適宜生長區(qū)域之一，目前已成為世界上最大的臍橙集中產(chǎn)區(qū)。本研究建立了贛南臍橙衰退病毒的直接組織點免疫法（DTBIA）和反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)(RT-PCR)的快速檢測技術(shù)。通過對贛南臍橙14個主產(chǎn)區(qū)柑橘果園進行調(diào)查和樣品采集，運用建立的DTBIA和RT-PCR技術(shù)對臍橙衰退病毒檢測，結(jié)果表明贛南臍橙主產(chǎn)區(qū)衰退病危害嚴重，并且檢測出試驗中收集到的1498份柑橘樣品中有673份樣品攜帶衰退病毒，感染率達44.9%，表明所檢測的各個產(chǎn)區(qū)均有衰退病發(fā)生。進一步運用限制性片段長度多態(tài)性（RFLP）技術(shù)對贛南臍橙上感染的CTV株系進行了組群分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)感染贛南臍橙的CTV株系主要為1、3組群的CTV強毒株系。為確保贛南臍橙產(chǎn)業(yè)安全健康發(fā)展，在生產(chǎn)上應(yīng)加大衰退病的檢測和防控力度。
獲獎情況
- 無
鑒定結(jié)果
- 無
參考文獻
- [1] Zhou C Y. Studies on the mechanism of mild strain cross protection against Citrus tristeza virus[D]. Sydney: The University of Sydney, 2001:1-5. [2] Gillings M R, Broadbent P, Indsto J, Lee R F. Characterization of isolates and strains of Citrus tristeza closterovirus using restriction analysis of the coat protein gene amplified by the polymerase chain reaction[J]. Journal of Virological Methods, 1993,44:305-317. [3] Garnesy S M, Permar T A, Camber M, Henderson C T. Direct tissue blot immunoassay (DTBIA) for diction of Citrus tristeza virus (CTV) [A]. In: In: Moreno P, da Graca J V, Timmer L W. Proceeding 12th conference of the international organization of citrus virus[C]. Riverside:IOCV, 1993,39-50. [4] 周常勇, Hailstones D L, Connor R, Barkley P, Bowyer J. 一種微量、快速抽提柑橘衰退病毒(CTV)核酸應(yīng)用于RT-PCR擴增的方法[J].福建農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報, 2001,30(增):200.
同類課題研究水平概述
- 柑橘衰退?。–itrus tristeza virus，CTV）又稱速衰病，是世界性的柑橘病毒病害，廣泛分布于世界各柑橘產(chǎn)地，對全世界的柑橘產(chǎn)業(yè)造成了嚴重威脅。危害輕者可引起樹勢衰退，產(chǎn)量下降，品質(zhì)變劣;重者可引起柑橘樹死亡，對柑橘高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)生產(chǎn)構(gòu)成嚴重障礙。國內(nèi)外學(xué)者應(yīng)用生物學(xué)、血清學(xué)和分子生物學(xué)方法對CTV進行了研究。 目前國內(nèi)外學(xué)者應(yīng)用生物學(xué)對CTV進行研究的技術(shù)是酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）。它是一種固相吸附和免疫酶技術(shù)相結(jié)合的方法，將抗原和抗體包被在固相支持物上，使免疫反應(yīng)在固體表面進行，并借助結(jié)合在抗原或抗體上酶與底物的反應(yīng)所產(chǎn)生的顏色來進行檢測，在此基礎(chǔ)上，發(fā)展了組織印跡法(DTBIA)。這些技術(shù)直接將組織印跡在膜上，不僅保持了ELISA的靈敏性和特異性等特點，而且簡化了操作程序，使病毒檢測更加快速、簡單、方便，且印跡在硝酸纖維素膜上的樣品保持時間較長，檢測結(jié)果能直觀地顯示病毒感染的部位，適用于植物病毒的大規(guī)模普查。應(yīng)用分子生物學(xué)方法對CTV進行研究的技術(shù)主要是PCR擴增技術(shù)，是CTV檢測中最有效和最靈敏的方法之一，并得到了廣泛的應(yīng)用。它是一種體外模擬自然DNA復(fù)制過程的核酸擴增技術(shù)，即通過引物核酸的某個區(qū)域而進行的重復(fù)雙向DNA體外合成。能把很少量的遺傳物質(zhì)迅速而簡便的擴增百萬倍，使原來無法進行分析和檢測的各種項目得以完成。 隨著種植規(guī)模地不斷壯大，贛南已經(jīng)發(fā)展成為世界上最大的臍橙主產(chǎn)區(qū)，由于在生產(chǎn)中存在危險性病害的威脅等因素的影響，導(dǎo)致產(chǎn)量和品質(zhì)得不到很好的提升，使我國臍橙產(chǎn)量僅居世界第三。危險性病害中特別是臍橙衰退病，嚴重的制約著產(chǎn)業(yè)的進一步發(fā)展。因病原菌存在多株系分化現(xiàn)象，不同的地方病原物存在不同的生物學(xué)特性，以往研究結(jié)果也表明建立的快速檢測技術(shù)，如血清學(xué)檢測技術(shù)針對當(dāng)?shù)氐牟≡晗的芷鸬胶芎玫臋z測效果，而在其他地方檢測效果不明顯，甚至沒有作用。而目前針對贛南臍橙產(chǎn)區(qū)適用性和專一性的衰退病快速檢測技術(shù)和贛南臍橙衰退病的發(fā)生情況還未見報道，相關(guān)研究也很薄弱，更無生產(chǎn)上可應(yīng)用的快速檢測方法，制約著生產(chǎn)上病害的早期檢測、預(yù)測預(yù)報等關(guān)鍵技術(shù)的開展，針對此問題，本研究立足贛南臍橙高效安全生產(chǎn)重點解決贛南臍橙生產(chǎn)存在的衰退病的快速檢測技術(shù)，提升贛南臍橙病害的防控水平，對確保臍橙產(chǎn)業(yè)安全健康發(fā)展具有重要的戰(zhàn)略意義。
